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摘要:目的?探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01224是否通过调控微小RNA-125b(miR-125b)的表达,从而影响口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖及凋亡。方法?采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测OSCC患者癌组织及癌旁组织中LINC01224的表达水平;体外培养OSCC细胞系CAL-27,将si-NC、si-LINC01224、si-LINC01224与anti-miR-NC、si-LINC01224与anti-miR-125b转染至CAL-27细胞;甲基噻唑基四唑(MTT)试验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡率;双荧光素酶报告试验验证LINC01224与miR-125b的靶向结合关系;western blot检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3前体蛋白(pro-caspase-3)、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原67(Ki67)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(clv-caspase-3)、P21蛋白的表达水平。结果?与癌旁组织相比,OSCC患者癌组织中LINC01224的表达水平(1.00±0.05 vs 2.43±0.17)显著升高(t=94.345,P<0.05),miR-125b的表达水平(0.98±0.06 vs 0.22±0.02)显著降低(t=14.838,P<0.05);与si-NC组比较,si-LINC01224组细胞存活率[(100.02±6.73)% vs (47.94±4.69)%]显著降低(t=19.047,P<0.05),G1期细胞比例[(31.03±3.01)% vs (42.29±4.12)%]显著增加(t=6.615,P<0.05),S期细胞比例[(34.18±3.38)% vs (23.49±2.57)%]显著减少(t=7.553,P<0.05),细胞凋亡率[(8.10±0.92)% vs (24.17±1.74)%]显著升高(t=24.494,P<0.05),Ki67、pro-caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05),P21、clv-caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告试验证实LINC01224与miR-125b靶向结合;与si-LINC01224+anti-miR-NC组比较,si-LINC01224+anti-miR-125b组细胞存活率[(48.03±4.57)% vs (90.01±5.59)%]显著升高(t=17.442,P<0.05),细胞凋亡率[(24.11±1.58)% vs (12.81±1.12)%]显著降低(t=17.504,P<0.05),G1期细胞比例[(42.27±4.10)% vs (35.09±3.18)%]显著减少(t=4.151,P<0.05),S期细胞比例[(23.53±2.54)% vs (30.03±2.96)%]显著增加(t=4.999,P<0.05),pro-caspase-3、Ki67蛋白水平显著升高(P<0.05),clv-caspase-3、P21蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论?LINC01224能够靶向调控miR-125b的表达,从而促进OSCC细胞增殖及抑制细胞凋亡。 相似文献
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摘要:目的:探讨虫草素通过调控微小RNA-524-5p(miR-524-5p)表达对口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法:体外培养口腔鳞癌细胞HSC3,分别使用不同浓度(10,20,40μmol·L-1)的虫草素处理;采用甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖; Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-524-5p的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量;分别将miR-524-5p mimics或anti-miR-524-5p转染至HSC3细胞后,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭。结果:与对照组比较,虫草素各浓度组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),迁移细胞数及侵袭细胞数显著减少(P<0.05),Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P<0.05),p21、E-cadherin蛋白水平及miR-524-5p的表达水平显著升高(P<0.05),且虫草素浓度组间的上述指标比较差异均有统计学意义(P<0.05); miR-524-5p过表达可抑制HSC3细胞增殖、迁移及侵袭,而抑制miR-524-5p表达可减弱虫草素对HSC3细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:虫草素可能通过上调miR-524-5p的表达从而抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭。 相似文献
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目的 研究山慈菇提取物对口腔鳞状细胞癌(鳞癌)细胞生物学行为的影响,分析其作用机制是否与调控circ_0003998和miR-330-5p表达有关。方法 采用集落形成实验、划痕愈合实验、Transwell小室法分析不同剂量山慈菇提取物对口腔鳞癌细胞CAL-27增殖、迁移和侵袭的影响。实时定量PCR分析CAL-27细胞中circ_0003998和miR-330-5p表达情况。双荧光素酶报告基因实验用于确定circ_0003998和miR-330-5p之间靶向关系。分别转染circ_0003998小干扰RNA、miR-330-5p模拟物至CAL-27细胞,分析干扰circ_0003998或过表达miR-330-5p对CAL-27细胞生物学行为的影响。结果 山慈菇提取物作用后CAL-27细胞集落形成数、迁移距离、侵袭数量和circ_0003998表达量显著降低(P<0.05),而miR-330-5p表达量显著升高(P<0.05)。circ_0003998与miR-330-5p直接结合,干扰circ_0003998可上调miR-330-5p表达(P<0.05)。干扰circ_0003998或过表达miR-330-5p后CAL-27细胞集落形成数、迁移距离、侵袭数量显著降低(P<0.05)。过表达circ_0003998或抑制miR-330-5p均可减弱山慈菇提取物对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响(P<0.05)。结论 山慈菇提取物能够降低口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制与下调circ_0003998/miR-330-5p分子轴有关。 相似文献
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目的 探讨口腔癌患者中性别决定基因盒 9 ( sex-determining region Y box 9, SOX9)、 自噬基因
(Beclin1) 的表达与预后转归的关系。 方法 选取 2017 年 5 月至 2018 年 5 月河北省保定市第一中心医院口
腔科收治的 38 例口腔癌患者, 取其口腔癌组织标本 38 份和癌旁组织标本 30 份, 检测患者口腔癌组织中
SOX9、 Beclin1 的表达情况。 分析 SOX9、 Beclin1 阳性表达与临床病理因素的关系, 采用 COX 分析影响口腔
癌预后转归的危险因素, 分析 SOX9、 Beclin1 与预后转归的关系。 结果 口腔癌组织中 SOX9 和 Beclin1 阳
性表达率显著高于癌旁正常组织 (P< 0. 05), SOX9、 Beclin1 阳性表达与年龄、 性别无关 (P > 0. 05), 与
肿瘤分期、 分化程度和淋巴转移相关 (P< 0. 05)。 对口腔癌预后影响因素采取 Cox 逐步回归分析, 结果显
示肿瘤分期、 淋巴转移、 SOX9、 Beclin1 是影响口腔癌患者预后转归的独立危险因素 (P< 0. 05)。 SOX9 阳
性及阴性表达患者无进展生存期分别为 10 ~ 18 月 [平均 (12. 5 ± 2. 4) 月]、 14 ~ 23 月 [平均 (17. 5 ±
3. 1) 月]; Beclin1 阳性及阴性表达患者无进展生存期分别为 11 ~ 18 月 [平均 (13. 7 ± 2. 4) 月]、 13 ~ 22
月 [平均 (15. 7 ± 3. 1) 月]。 SOX9、 Beclin1 阳性表达患者无进展生存期显著低于阴性表达患者 (c2=7.969、3.315,P<0.05)。结论 口腔癌患者中 SOX9、 Beclin1 呈阳性表达, 其表达与预后转归密切相关,
口腔癌患者 SOX9、 Beclin1 表达越高预后转归越差。 相似文献
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目的 应用超声心动图测量右心系统一系列常规参数与右心导管测值对比,为临床提供简单可靠重复性良好的测量肺动脉高压的方法.方法 选择临床确诊肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)患者82例(PAH组),正常对照组86例,将所有研究对象的常规超声心动图参数进行对比,并对超声心动图参数与右心导管测值进行相关性研究.结果 PAH组舒张末期右心室前后径、舒张末期右心室左右径、收缩期右心房上下径、收缩期右心房左右径、右心房容积、下腔静脉内径、三尖瓣反流压差(tricuspid regurgitation pressure gradient,TRPG)均高于正常对照组(P<0.01),PAH组的下腔静脉塌陷指数(collapsible index of inferior vena cava,IVCCI)、收缩期s波速度峰值(systolic peak velocity,s')、舒张早期e波速度峰值(early diastolic peak velocity,e’)、舒张晚期a波速度峰值(late diastolic peak velocity,a ')、收缩期三尖瓣瓣环平面位移(tricuspid annular plane systolic excursion,TAPSE)、右心室射血前期(previous ejection period,PEP)/右心室射血期(ejection time,ET)均低于正常对照组(P<0.01).PAH组82例临床确诊的PAH患者中58例行右心导管测值,TRPG、IVCCI与右心导管测得肺动脉收缩压呈正相关(r=0.961、0.669,P<0.01).TAPSE、s'与右心导管测得肺动脉收缩压呈负相关(r=-0.629、-0.772,P<0.01).结论 收缩期TAPSE、IVCCI、TRPG、组织多普勒三尖瓣瓣环运动频谱s波与右心导管测值相关性良好,综合以上几个参数可以提高超声心动图诊断PAH的准确性. 相似文献