Amorphigenin联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞的协同抗肿瘤作用

背景与目的 Amorphigenin是从紫穗槐属植物的种子中分离提取的鱼藤酮类化合物,研究发现amorphigenin对多种肿瘤细胞具有增殖抑制作用。本研究拟探讨amorphigenin对人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的抗肿瘤作用及其可能的分子机制。方法采用CCK-8法测定A549/DDP细胞的增殖;克隆形成实验测定A549/DDP细胞的克隆形成;流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot技术检测caspase-3、PARP和LRP蛋白的表达。结果Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞的增殖48 h[半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentra-tion, IC50）]为（2.19±0.92）μmol/L、抑制克隆形成及诱导细胞凋亡。此外,Amorphigenin与顺铂联合可协同地抑制A549/DDP细胞生长和促进凋亡;降低耐药蛋白LRP蛋白的表达。结论 Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞增殖和促进细胞凋亡;amorphigenin可能是通过抑制耐药蛋白LRP蛋白表达,进而与顺铂对A549/DDP细胞产生协同抑制作用。     

霸王花药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立霸王花药材的HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用高效液相色谱法对10批霸王花药材进行分析。色谱条件:Phonemenex Luna PFP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-甲醇-0.2%甲酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长为360 nm,柱温35℃。结果:10批药材的相似度均在0.92以上,建立了霸王花药材的HPLC指纹图谱,确定了18个共有峰,并利用对照品对照法和LC-MS法对其中的10个共有峰进行了成分指认。结论:本法准确、简便,重现性好,可用于霸王花药材的定性鉴别。     

红树林内生真菌多样性及其次级代谢产物GH-9-1抗肺癌活性的研究

摘 要：目的 分析湛江观海长廊红树林内生真菌多样性,筛选具有抗肺癌活性的内生真菌次级代谢产物,对其中1株内生真菌Penicillium sp. GH-9发酵产物4-甲基-3-甲氧基-2,4-戊二烯酸（GH-9-1）进行抗肺癌活性研究。方法 利用微生物培养和发酵技术对红树林内生真菌进行分离纯化及液体发酵,通过16S rRNA基因序列构建系统发育树分析红树林内生真菌多样性,利用高效液相色谱（HPLC）检测技术对其次级代谢产物进行特征峰追踪分离,根据核磁共振数据鉴定化合物结构,采用CCK-8法、流式细胞术、Western blot技术评价单体化合物的体外抗肺癌活性。结果 从湛江市观海长廊采集6种红树林植物组织标本及红树林根部土壤标本,共分离得到130株内生真菌,从真菌Penicillium sp. GH-9的发酵产物中获得其主要特征性代谢产物4-甲基-3-甲氧基-2,4-戊二烯酸（GH-9-1）。化合物GH-9-1可抑制非小细胞肺癌细胞A549和H460细胞生长增殖,并可诱导A549和H460细胞发生凋亡和细胞周期阻滞。结论 湛江市观海长廊红树林内生真菌具有丰富的多样性,从其中1株内生真菌Penicillium sp. GH-9的次级代谢产物分离得到的GH-9-1具有显著的抗肺癌活性。     

紫穗槐种子体外抗肿瘤活性部位的筛选

目的 筛选紫穗槐种子体外抗肿瘤的活性部位.方法 利用溶剂法从紫穗槐种子中提取总有机成分,利用乙醇-水梯度洗脱的D101大孔树脂柱层析法获得各极性部位,利用高效液相色谱分析方法检测各部位的主要成分,利用噻唑蓝(MTT)法评价各部位的体外抗肿瘤活性.结果 D101大孔树脂柱层析获得的各部位高效液相色谱色谱峰差异明显.90％乙醇洗脱(F90)部位具有显著的细胞毒性,用药72 h时对A549、HepG2、MCF-7、HCT-116的IC50值分别为8.58±0.59、5.57±0.44、6.94±0.52、9.03+0.63 μg·mL-1,其它各部位的细胞毒性均不明显.化学成分指认表明,F90中的主要成分为鱼藤酮类似物.结论 D101大孔树脂柱层析法可以有效的将紫穗槐种子中的化学成分进行极性分段,90％乙醇洗脱部位为抗肿瘤活性部位,主要活性成分为鱼藤酮类成分,但其确切的化学成分和作用机制有待进一步的研究.     

全自动样品前处理技术在中药禁用农药残留检测中应用

目的 将全自动样品前处理平台应用于中药农药残留的检测，探索其替代手动处理完成实验流程的可行性。方法 选择人参、金银花、枸杞3种不同种类药材，通过手动和自动QuEChERS方法对样品进行前处理，通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS/MS)对35种禁用农药残留进行检测。结果 35种农药中人参基质的手动与自动回收率显著性差异的成分占88.6%，金银花基质为37.1%，枸杞基质为4.3%，其中超过80%的农药是自动回收率大于手动，其余农药手动和自动的回收率无显著性差异。在3种不同基质下，35种农药在考察的浓度范围内均呈良好的线性关系(r>0.990)，除杀虫脒外，其他农药在3种基质中的回收率为70.05%~112.54%，RSD为0.3%~9.8%。结论 全自动QuEChERS方法高效，准确，可应用于中药农药残留的检测。