吡拉格雷钠对氧糖剥夺/复氧后星形胶质细胞水肿及AQP4表达的影响北大核心CSCD

目的探讨氧糖剥夺并复氧培养后星形胶质细胞水肿及其水通道蛋白4(AQP4)表达的变化以及吡拉格雷(TSF)对其表达变化的影响。方法体外培养原代星形胶质细胞,建立氧糖剥夺/复氧细胞水肿模型,并随机分为正常组、氧糖剥夺/复氧损伤(OGD/Reox)组、奥扎格雷钠(Ozagrel)阳性对照组和TSF治疗组,在氧糖剥夺/复氧损伤后6、12、24和48 h 4个时间点测定细胞体积变化,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、MTT法检测细胞损伤及存活情况,Western blot法检测各组细胞膜AQP4蛋白的表达水平,RT-PCR法检测各组细胞AQP4 m RNA的转录水平。结果星形胶质细胞经缺氧再复氧处理,随着复氧时间的延长细胞损害加重(P<0.05,P<0.01);TSF治疗组的细胞体积明显低于OGD/Reox损伤组(P<0.05);给予TSF治疗后细胞在氧糖剥夺/复氧后的LDH漏出率较OGD/Reox损伤组明显降低(P<0.05);TSF治疗组与单纯氧糖剥夺/复氧相比较MTT检测细胞活力明显升高(P<0.05);给予TSF治疗组,AQP4表达明显降低(P<0.05);与Ozagrel相比较差异无显著性。Western blot及RT-PCR检测蛋白及m RNA的表达水平,给予TSF治疗组的AQP4蛋白及m RNA表达均明显降低(P<0.05)。结论TSF治疗能明显减轻体外氧糖剥夺/复氧损伤引起的星形胶质细胞水肿,可能是通过降低氧糖剥夺后AQP4的表达水平而实现。     

口服胰高血糖素样肽-1受体激动剂研究进展及非临床评价的考虑

胰高血糖素样肽-1（Glucagon-like Peptide-1,GLP-1）是一种由肠道L细胞分泌的肠促胰素 （Incretin）,根据人体血糖水平调控胰岛素和胰高血糖素分泌,维持血糖稳定。胰高血糖素样肽-l受体激动剂（GLP-1 Receptor Agonists,GLP-1RA）是近年来开发的新型降糖药,通过模拟天然GLP-1而激活GLP-1受体,达到控制血糖的目的,同时GLP-1RA还具有控制体质量和改善非酒精性脂肪肝等多重临床获益,正逐步成为治疗糖尿病的第一大处方药物。目前已上市的GLP-1RA主要为注射用药,而与注射给药相比,口服制剂给药方便、治疗痛苦小,患者依从性更好。口服GLP-1RA药物已成为新的糖尿病治疗药物的重要研发方向之一。本文梳理了目前在研GLP-1RA口服小分子和肽类降糖药的研发现状,分析该靶点药物研究应用进展,并从非临床有效性和安全性方面提供评价策略,以期为同类药物的研发和应用提供参考。     

阿达木单抗生物类药非临床评价的思考

阿达木单抗(Humira?)自上市以来,以其确切的靶向作用在自身免疫性疾病患者显示出临床价值.阿达木单抗的专利在美国2016年到期、欧洲2018年到期,阿达木单抗注射液的研发和注册申请已成为注册申报量最高的生物类似药之一,使得阿达木单抗注射液的评价点值得关注和思考.阿达木单抗生物类似药与Humira?的非临床对比研究试...     

早期糖尿病大鼠心肌Wnt/β-catenin信号通路的变化

目的检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白在早期糖尿病大鼠心肌中的表达变化,明确其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法采用链脲佐菌素(60μg·g-1)一次性腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,喂养2周,HE染色法观察心肌病理结构变化,Western blot和免疫组化法检测心肌Wnt2、β-catenin、c-Myc和DKK1蛋白的表达变化。结果显微镜下糖尿病组大鼠心肌可见局灶性心肌细胞变性、坏死。糖尿病组大鼠相对于正常对照组心肌Wnt2、β-catenin和c-Myc的表达明显增加(P<0.01),而DKK1的表达与正常对照组相比没有明显差异(P=0.885)。结论 Wnt/β-catenin信号通路的激活参与早期糖尿病心肌损伤,进一步研究其在糖尿病心肌中的变化可能为糖尿病心肌病找到新的治疗靶点。     

2型糖尿病大鼠早期血清cTnI水平与心功能的变化

目的:研究2型糖尿病大鼠早期血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)的水平及心功能变化,探讨早期2型糖尿病大鼠血清cTnI水平与糖尿病心肌损伤发生发展之间的关系,明确cTnI在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法:通过高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为正常对照组、糖尿病2周模型组及4周模型组,超声心动图检测心功能相关指标,血清检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹胰岛素(FINS)及cTnI水平,HE染色法观察心肌病理结构变化,Western blot法检测心肌cTnI蛋白表达变化,通过上述指标变化分析2型糖尿病大鼠早期血清cTnI与大鼠心功能改变之间的关系。结果:与正常组比较,2型糖尿病大鼠TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低;糖尿病大鼠4周模型组与2周模型组相比较,TC、TG、LDL-C水平升高更明显,HDL-C水平降低更显著(P0.01);显微镜下糖尿病组大鼠心肌可见局灶性心肌细胞变性、坏死;糖尿病组大鼠相对于正常对照组血清及心肌cTnI表达显著增加(P0.01),且4周模型组比2周模型组增加更明显。结论:糖尿病大鼠早期即出现cTnI水平升高和心功能改变,有望为糖尿病心肌病的早期诊断和治疗提供理论依据。     

索马鲁肽对早期2型糖尿病心肌病大鼠mTOR信号通路的干预作用

目的 探讨索马鲁肽对糖尿病心肌病大鼠心肌组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路表达的干预作用。方法 高脂饮食5周后,腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为正常对照组、糖尿病2周、4周模型组和索马鲁肽组,索马鲁肽组在造模成功后给予索马鲁肽灌胃处理。4周后,各组动物进行血清学检测,包括空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、空腹胰岛素,超声心动图检测心功能相关指标,Western blot检测心肌mTOR、p-mTOR、S6K1、Atg5和P62蛋白表达变化。结果 与正常对照组比较,2型糖尿病大鼠2周和4周模型血清中总胆固醇、甘油三酯、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低;索马鲁肽组空腹血糖值趋于正常,HDL-C水平升高显著（P<0.05）,LDL-C水平显著降低（P<0.01）。相对于正常对照组,糖尿病模型组大鼠心肌组织中mTOR、p-mTOR、S6K1的表达与正常对照组相比随时间持续增加（P<0.01）,自噬相关蛋白Atg5和P62表达也显著增加（P<0.05）,而索马鲁肽组均显示出降低趋势。结论 在早期糖尿病心肌病的发生发展过程中,索马鲁肽对mTOR信号通路具有抑制作用,能降低心肌细胞自噬损伤的发生。     

单克隆抗体药物非临床研究与评价的监管考虑

基于单克隆抗体药物的特点，结合国内外监管机构发布的技术指导原则和工作实践，本文针对单克隆抗体药理毒理专业审评中关注的重点内容进行了探讨，包括受试物质量、相关动物种属选择、免疫原性和免疫毒性评价以及首次人体临床试验起始剂量选择等，以期为申办方和研究者提供参考。