抑癌基因ING1在胃癌组织中的表达及其意义

目的 探索ING1在胃癌组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组化法检测51例胃癌组织及15例正常胃粘膜中p33^ING1b的表达情况。结果 p33^ING1b在胃癌组织中的表达率为41．2％(21／51)。远低于在正常胃粘膜中的表达率100％(15／15)。结论 ING1是抑癌基因，其蛋白产物p33^ING1b在胃癌组织中低表达，对胃癌的发生、发展可能起重要作用。     

胃腺癌组织蛋白质双向电泳图谱分析

目的　利用蛋白质组学方法建立分辨率高和重复性好的人胃腺癌组织及其正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,并分析其差异表达的蛋白质 ,以期用于早期诊断。方法　采用固相pH梯度(immobilizedpHgradient,IPG)双向凝胶电泳 (two -dimensionalgelelectrophoresis ,2 -DE)分离人胃腺癌组织及正常胃黏膜组织的总蛋白质 ,凝胶经银染显色后 ,ImagingMaster 2D图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质。结果　 ( 1 )得到了分辨率较高、重复性较好的人胃腺癌组织和正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,癌组织和正常胃黏膜组织凝胶的平均蛋白质点数分别为 1 0 4 9± 67和 1 0 97± 73,平均匹配的点数分别为 835± 48和 95 3± 5 6,匹配率分别为 79.6%和 86.7% ;同一组织凝胶在蛋白质点位置上有较好的重复性 ,不同凝胶间蛋白质点在等电聚焦 (isoelectricfocusing ,IEF)方向的偏差是 0 .873±0 .1 2 5mm ,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (sodiumdodecylsulfate -polyacrylamidegelelectrophore sis ,SDS -PAGE)方向上的偏差为 1 .0 2 5± 0 .2 1 3mm。 ( 2 )通过比较分析 5例胃腺癌组织及正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,得到平均匹配蛋白质点数为 769± 45 ,差异表达蛋白质点数为 81 ,其中 1 7个点仅     

高分化胃腺癌组织表达缺失蛋白质分析

目的本研究应用蛋白质组学方法,分析胃癌(gastric carcinoma, GC)中表达缺失蛋白质分子.方法提取胃癌及配对正常胃黏膜组织总蛋白,采用双向电泳获得胃癌与配对正常胃黏膜组织蛋白质表达谱并进行分析,鉴定胃癌表达缺失的蛋白质分子.结果通过比较分析5对高分化胃腺癌及配对正常胃黏膜组织的蛋白表达谱,共发现差异表达蛋白点81个,其中7个蛋白点仅正常胃黏膜组织表达,而在胃癌组织中表达缺失,分别为:细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白12(P16)、细胞周期素依赖激酶抑制蛋白1(P21)、抗氧化蛋白2、二硫化蛋白异构酶A2、C-1-四氢叶酸合成酶、Rho-GTPase-激活蛋白4、胰岛素样生长因子结合蛋白2.结论胃癌组织与正常胃黏膜组织之间存在蛋白质表达差异.寻找胃癌组织与正常胃黏膜组织之间表达差异蛋白质,为探讨胃癌发病分子机制提供有用依据.     

DADS诱导人结肠癌细胞双向电泳图谱的差异分析

目的近年来,蛋白质组学技术已广泛应用于肿瘤研究领域,但对结肠癌的研究较少。该实验旨在研究二烯丙基二硫(DADS)体外诱导人结肠癌SW 480细胞蛋白质组差异表达的相关分子机制。方法采用蛋白质组学相关技术,如二维电泳、图像分析、质谱技术等方法,获得DADS体外培养的人结肠癌SW 480细胞蛋白质组的肽质量指纹图,将所得的数据进行生物信息学处理。结果在相同条件下,对DADS处理前后SW 480细胞两种样品的总蛋白质进行双向电泳,经PDQuest软件分析,结果显示,其中167个匹配的蛋白质点存在表达量上的差异,与对照组相比,处理组蛋白质表达量下调的有69个,利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术(MALD I-TOF-MS)对其中8个表达明显下调的蛋白质斑点进行分析鉴定,获得相应的肽质量指纹图谱(PMF),通过数据库搜索,初步确定这8个蛋白质分别是:细胞角蛋白19(Cytokeratin-19)、肌动蛋白解聚因子(Actin-de-polym erizing factor)、V-1蛋白(V-1 prote in)、果糖二磷酸醛缩酶(Fructose b isphosphate aldolase,FBA)、FK506结合蛋白(FK506-b ind ing prote in,FKBP)、成帽蛋白(Capp ing prote in)、硫氧还蛋白过氧化物酶(Th ioredoxin peroxidase)和敏感性转化蛋白(Transform ation-sensitive prote in)。结论这些差异蛋白质涉及细胞周期调控、细胞分化、细胞凋亡及细胞分裂增殖等众多事件,从而说明,DADS可能具有抑制结肠癌细胞生长,阻滞细胞周期,诱导细胞分化及凋亡的作用。     

胃癌组织及癌旁组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析

目的　利用蛋白质组学方法建立分辨率高和重复性好的人胃癌组织及其正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,分析其差异表达的蛋白质 ,为进一步寻找胃癌标志物奠定基础。方法　采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人胃癌组织及正常胃黏膜组织的总蛋白质 ,凝胶经银染显色后 ,ImagingMaster 2D图像分析软件进行比较分析 ,识别差异表达的蛋白质。结果　⑴癌组织和正常胃黏膜组织凝胶的平均蛋白质点数分别为 10 49± 67和 10 97± 73 ,平均匹配的点数分别为 83 5± 48和 95 3± 5 6,匹配率分别为79 6%和 86 7%。⑵通过比较分析 5例胃癌组织及正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,得到平均匹配蛋白点数为 769± 45 ,差异表达蛋白点数为 81个 ,其中 17个点仅在癌组织中表达 ,2 4个点仅在正常胃黏膜中表达 ,2 6个点在癌组织中为高表达 ,14个点在癌组织中为低表达。结论　本研究建立了分辨率高且重复性较好的人胃癌组织与正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,发现两者间存在一些差异表达的蛋白质 ,为进一步筛选胃腺癌特异性的分子标志物打下了坚实的基础。     

STGC3基因表达上调对CNE2细胞系蛋白质表达谱的影响

目的　采用蛋白质组学方法,分析STGC3基因高表达对CNE2细胞系蛋白质表达谱的影响。方法　应用脂质体转染技术,将pcDNA3.1 ( + ) STGC3的表达质粒导入鼻咽癌细胞系CNE2 ,经G41 8筛选、RT -PCR技术鉴定阳性克隆,建立稳定高表达STGC3的细胞系;采用双向凝胶电泳分离CNE2、pcDNA3.1 ( + ) CNE2和pcDNA3.1 ( + ) STGC3 CNE2细胞的总蛋白质,图像扫描后用ImageMaster软件进行比较分析,识别差异表达的蛋白质点。结果　CNE2、pcDNA3.1 ( + ) CNE2和pcDNA3.1 ( + ) STGC3 CNE2细胞的蛋白质点分别为675±2 7、660±2 3和662±1 8个,蛋白质点主要分布在等电点为3.5～8.5、分子量为2 2～80kD的范围内。去除空白载体所致的蛋白质的差异后,在pcDNA3.1 ( + ) STGC3 CNE2细胞系中,确立了1 5个上调的蛋白质点和8个下调的蛋白质点。结论　STGC3基因高表达能引起鼻咽癌细胞系CNE2的蛋白质表达谱改变,此结果为进一步研究STGC3基因的抑瘤分子机制提供了很好的实验资料。