骨保护素系统与冠状动脉粥样硬化性心脏病的研究进展

骨保护素（OPG）是肿瘤坏死因子（TNF）超家族的一种可溶性分泌型糖蛋白,与核因子 κB 受体活化因子配 体（RANKL）、核因子 κB 受体活化因子（RANK）以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）共同组成骨保护素系 统。大量临床及实验研究证实骨保护素系统参与内皮功能调节、炎症反应、氧化应激及细胞凋亡等生理过程,其有 望成为冠心病发生、发展、严重程度及其远期预后的生物学标志物,为冠心病的早期诊断及治疗提供新的可行途径。 本文就骨保护素系统在冠心病发生、发展中的生物学效应、作用机制及未来的临床应用前景进行综述。     

重组腺病毒Ad-hBNP对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡因子及Ⅱ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的观察外源基因人B型利钠肽对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法 30只慢性心力衰竭模型大鼠,随机分为携带人B型利钠肽基因重组腺病毒组(Ad-hBNP组,14只)、重组空白腺病毒组(Ad-Track组,8只)、生理盐水组(NS组,8只),分别给予腹腔注射人B型利钠肽基因重组腺病毒、重组空白腺病毒及生理盐水1mL,每周1次,共4周。另设10只未造模但实行了假手术的大鼠为假手术组;4周后处死大鼠,行RT-PCR检测心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA含量。结果 Ad-hBNP治疗后,Ad-hBNP组大鼠心肌组织Bcl-2mRNA表达较Ad-Track组及NS组升高;BaxmRNA表达较假手术组升高;Caspase-3mRNA表达较Ad-Track组、NS组及假手术组均升高。Ad-hBNP组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较Ad-Track组降低。结论间断给予Ad-hBNP能够影响慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡相关基因的表达,减少心肌细胞间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。     

抑郁情绪对慢性心力衰竭患者血浆细胞因子水平及预后的影响

目的 探讨抑郁障碍对慢性心力衰竭(CHF)患者血浆细胞因子及其预后的影响.方法 选择CHF伴抑郁障碍70例(抑郁组)和CHF不伴抑郁障碍130例(非抑郁组)作为研究对象,采用Beck抑郁问卷评定抑郁症状严重程度,酶联免疫吸附法检测外周血白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(INF-γ),随访观察死亡、因心衰恶化再住院事件.结果 抑郁组血清IL-1β、IL-6、TNF-α和INF-γ水平显著高于非抑郁组[分别为(22.56±6.27)ng/L vs(18.58±5.95)ng/L;(29.96±6.23)ng/L vs(24.43±8.40)ng/L;(20.34±4.45)ng/L vs(16.56±5.87)ng/L和(176.79±37.89)ng/L vs(156.39±34.01)ng/L,均P＜0.01];Beck抑郁问卷积分与IL-1β、IL-6、TNF-α和INF-γ显著正相关(均P＜0.01);2年随访期间抑郁组死亡率及再住院率均显著高于非抑郁组(分别为40%vs19%和79%vs61%,均P＜0.01);多因素Cox回归分析结果显示抑郁障碍与CHF患者死亡独立相关(HR=1.126,P=0.000).结论 CHF患者伴抑郁血清致炎性细胞因子水平增高;抑郁可能是CHF患者预后差的独立预测因子.     

冠心病患者血清瘦素水平变化及其与血小板膜GPIb的关系

目的：探讨冠心病患者血清瘦素水平变化及其与血小板膜GPⅠb的关系。方法：选择经冠状动脉造影确诊的冠心病患者50例（冠心病组）、非冠心病患者30例作为对照（对照组）。应用全血流式细胞术检测血小板膜GPⅠb阳性百分率及平均荧光强度，酶联免疫吸附法检测血清瘦素水平。结果：冠心病组血小板膜GPⅠb阳性百分率及平均荧光强度均低于对照组（P＜0．05）；校正收缩压、体质量指数（BMI）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、空腹血糖、2h血糖、空腹胰岛素水平及定量胰岛素敏感指数。冠心病组血清瘦素水平高于对照组（P＜0．05）；单因素相关分析表明冠心病患者血清瘦素水平与血小板膜GPⅠb平均荧光强度呈负相关（P＜0．05）；多元逐步回归分析显示冠心病患者血清瘦素水平与血小板膜GPⅠb平均荧光强度呈独立负相关（P＜0．05）；Logistic回归分析显示血清瘦素与冠心病发病呈独立正相关（P＜0．05）。结论：冠心病患者表现为高瘦素血症；血清瘦素水平增高可能影响血小板活化，高瘦素血症可能在冠心病的发病中具有重要的作用。     

Ad-VEGF121和Ad-VEGF165重组腺病毒的构建和制备

目的:以pAdEasy-1缺陷性腺病毒系统为载体构建用于实验动物模型基因治疗的Ad-VEGF121和Ad-VEGF165重组腺病毒。方法:采用RT-PCR方法从人心肌组织中扩增获得VEGF121、VEGF165cDNA片段,分别插入pUCm-T载体构成pUC-VEGFs;限制性内切酶SalⅠ、KpnⅠ切下目的基因片段,插入pAdTrack-CMV载体相应的多克隆位点构成pAdTrack-CMV-VEGFs。电转法将被PmeⅠ切成线性的pAdTrack-CMV-VEGFs转入E coli BJ5183,与其中的pAdEasy-1同源重组成pAdEasy-VEGFs。阳离子脂质体法将被PacⅠ线性化的重组子转染293T细胞进行腺病毒包装。转染后7～11d可在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白(GFP)呈彗星状,收集细胞反复冻融获得含重组腺病毒的上清液。感染293T细胞3～4次,待细胞出现细胞病变效应(CPE)时收获腺病毒(Ad-VEGFs),并用CsCl密度梯度超速离心进行纯化。结果:重组腺病毒在电镜下呈多面体,形态完整;Ad-VEGF121和Ad-VEGF165病毒滴度分别达到1.155×1012和1.281 5×1012 V.P/mL。结论:利用pAdEasy-1缺陷性腺病毒系统构建携带目的基因的重组腺病毒方法较简便,易掌握。获得的重组腺病毒纯度高、滴度高,适用于实验动物模型和体外培养细胞的基因治疗。     

瘦素与冠心病

瘦素是肥胖基因编码的一种蛋白质产物,主要由白色脂肪组织分泌,通过与其受体结合发挥抑制食欲、减少能量摄入、增加能量消耗的生物学作用。大量临床研究表明冠心病患者常存在高瘦素血症,表现为瘦素抵抗。本文就瘦素在冠心病发病中的作用机制作一综述。     

循环酶法测定血浆同型半胱氨酸

目的建立简便的循环酶法,直接检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)。方法在H itach i 7170S全自动生化分析仪上,以循环酶法测定血浆Hcy,采用两点速率法,主波长340 nm,副波长405 nm,温度37℃,两点线性校准。结果本法线性范围1.5~50μmol/L;日内不精密度为2.2%~3.0%,日间不精密度为4.0%~5.9%;回收率为94.6%~102.5%。循环酶法(Y)和商品试剂盒(X)比较:Y=1.018X-0.895,决定系数(r2)=0.945。结论循环酶法简便、灵敏,试剂稳定,适用于血浆Hcy的常规和自动化分析。     

胶乳免疫散射比浊法测定β2微球蛋白在全自动生化分析仪上的应用研究

目的探讨胶乳免疫散射比浊法检测血清及尿液中的β2微球蛋白在全自动生化分析仪上的应用。方法采用Hi-tachi7170S全自动生化分析仪,终点法测定,主波长540nm,副波长700nm,温度37℃,血清∶试剂1∶试剂2为:3μl∶270μl∶30μl,并与放射免疫方法进行对比。结果对比试验:取50份血清及30份尿液标本分别用全自动生化分析仪胶乳凝集比浊法和放免法进行测定,两法差异无显著性。精密度实验:血清批内CV值为2.3%,批间3.4%;尿液批内CV值2.5%,批间4.4%。回收实验:回收率在96%~103%之间,平均99.6%。线性测定:该法线性范围为0~18mg/L。结论应用胶乳免疫散射比浊法检测血清及尿液β2微球蛋白在全自动生化分析仪测定,其反应的线性、准确性、精密度良好,方法简便稳定,适用于临床应用。     

鹅掌楸苷抑制心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的相关研究

目的:探讨鹅掌楸苷对急性期心肌梗死(心梗)大鼠心肌凋亡的保护作用,并分析其作用的相关因子与机制。方法:2019年1-12月选择SPF级雄性Wistar大鼠30只,体重(200±10)g,数字表法分为假手术组,心梗组、鹅掌楸组各10只。鹅掌楸苷组大鼠造模前5 d至术后3 d予以鹅掌楸苷溶液(10 ml/kg)灌胃1次/d...     

急性心肌梗死患者急诊PCI术后血浆B型钠尿肽水平变化及意义

目的 观察急性心肌梗死（AMI）患者血浆B型钠尿肽（BNP）水平变化,并分析其与左心室重构（LVRM）及预后的关系.方法 选择首次AMI住院患者112例,均行急诊经皮冠状动脉介入术（PCI）,梗死相关动脉（IRA）开通69例（开通组）、未开通43例（未开通组）.入院时检测心肌损伤指标[CK、CK-MB、肌钙蛋白I（cTnI）],入院第7天超声检查左心室射血分数（LVEF）、左心室舒张末期容积指数（LVEDVI）,测定入院时、AMI后24 h、入院第7天血浆BNP（记为BNP1、BNP2、BNP3）;术后随访2 a,记录心血管不良事件（MACE）发生情况.结果 两组入院时血清CK、CK-MB、cTnI、TG、LDL-C比较,P均＞0.05;入院后第7天,开通组较未开通组LVEF升高（P＜0.05）;两组BNP1差异无统计学意义,BNP2明显高于BNP1、BNP3（P均＜0.05）,未开通组BNP2、BNP3较开通组明显升高（P均＜0.01）.AMI患者3个时点血浆BNP与LVEDVI、CK、CK-MB、cTnI均呈正相关（P均＜0.01）,与LVEF呈负相关（P均＜0.01）.开通组2 a内发生MACE 10例,未开通组16例,P＜0.01;BNP2预测AMI急诊PCI患者2 a内MACE的ROC曲线下面积为0.791,P＜0.05;其分界值为332 ng/L时,预测MACE的敏感性为76.9％、特异性为73.3％.结论 AMI急诊PCI术后血浆BNP水平升高,其水平变化有助于判断IRA开通情况;AMI后24 h血浆BNP水平可预测患者MACE,有助于更早了解LVRM情况,以阻止或减缓AMI后心力衰竭的发生、发展.