抗EBV—EA单克隆抗体的制备

利用正丁酸盐(n-butyrate)可以在含EB病毒(EBV)基因组的类淋巴母细胞(Lymphoblastoid)Raji细胞中诱导出表达EBV早期抗原复合物(EBV-EA)的细胞,但不能诱导EBV衣膜抗原(EBV-EA)的表达。本文以正丁酸盐诱导过的Raji细胞(n-Raji)为免疫原制备出一组抗EBVEA单克隆抗体,报道如下:     

应用随机多肽文库分析BAC5单抗相关的抗原表位

目的　鉴定能被BAC5单抗识别的定位于鼻咽癌细胞表面的抗原表位。方法　应用BAC5单抗作为靶抗体对噬菌体呈现的随机 12肽文库进行 3轮生物淘洗 ,用抗体捕获和竞争试验的夹心ELISA方法选择和鉴定阳性噬菌体克隆 ,对阳性和阴性噬菌体的外源性DNA片段进行序列分析 ,推导和比较由这些噬菌体所呈现的多肽氨基酸序列。结果　通过 3轮生物淘洗能被抗体捕获的噬菌体克隆为 77% ( 35 /45 )。用竞争试验从所捕获的克隆中测得 8个阳性克隆。来自这 8个克隆的噬菌体呈现三种外源多肽 ,即$CH Q S H Y P Y P V V S L ( 4/8)$CQ N Q A W F S Q P P V R M ( 3/8)和 T Q A Y K G F P V L P S ( 1/8) ,与来自阴性克隆的多肽序列 N H Q S T F W Q K W T A ( 6 /6 )比较 ,前 3个序列在靠近肽的N端都具有相同的脯氨酸 (P)和缬氨酸 (V)结构 ( P V )。结论　BAC5单抗能识别近N端含有脯氨酸和缬氨酸结构的多肽。这些多肽可能模拟存在于鼻咽癌细胞表面并与BAC5单抗相关的抗原表位的构象。     

肝癌组织中P73蛋白表达的意义

【目的】检测肝癌组织中P73蛋白表达 ,了解P73在肝癌中的意义。【方法】采用LSAB免疫组织化学方法检测 5 8例原发性肝癌组织中P73α、β蛋白表达 ,并与相应的癌旁肝组织、远癌正常肝组织进行比较。同时用LSAB法检测P5 3和PCNA ,探讨P73蛋白与这两者间的关系。【结果】①P73蛋白在正常肝组织、癌旁肝组织和肝癌组织中的表达比例分别为 97% ,88%和 2 6 % ;②缺失P73蛋白的肝癌细胞PC NA高增殖指数的比例高于P73蛋白表达阳性组 ,前者 79% ,后者 2 7% ;③缺失P73蛋白的肝癌病例在P5 3蛋白阳性组和阴性组中的比例分别为 79%和 6 8% ,二者间无统计学差异。但是在P5 3阳性的病例中 ,伴有P73蛋白缺失时PCNA高增殖指数的比例高于P73蛋白无缺失组 ,前者 80 % ,后者 2 9%。【结论】P73蛋白在正常肝细胞、癌旁肝细胞和肝癌细胞中的表达呈递减趋势 ,缺失P73蛋白的肝癌细胞生长快 ,P73在肝癌中可能起着抑癌基因的作用。P73的缺失与P5 3的异常表达无关系 ,但是在P5 3异常表达的情况下 ,如果存在P73蛋白时可能对细胞有一定的调控作用 ,抑制细胞增殖 ,起补偿作用。     

人源性抗EB病毒IgG/VCA抗体在SCID小鼠中的诱导

将人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）和腹腔淋巴结淋巴细胞（ＰＬＮＬ）移植入严重联合免疫缺陷疾病（ＳＣＩＤ）小鼠腹腔，２个月后，小鼠血清内产生人源性ＩｇＧ和抗ＥＢ病毒壳抗原ＩｇＧ抗体（ＩｇＧ／ＶＣＡ）。比较结果显示，用Ｂ９５－８细胞作为ＶＣＡ来源所诱导的实验组１０只小鼠，ＩｇＧ／ＶＣＡ阳性率为７０％（７／１０），对照组为１７％（２／１２）。ＩｇＧ／ＶＣＡ的几何平均滴度（ＧＭＴ）和血清ＩｇＧ浓度，在１４只ＳＣＩＤ－ＰＬＮＬ小鼠中为１∶１０８和（９６．２±５６．４）μｇ／Ｌ；在８只ＳＣＩＤ－ＰＢＬ小鼠为１∶７．８和（１３．８４±６．０）μｇ／Ｌ。该结果提示，ＳＣＩＤ－ＰＬＮＬ小鼠较ＳＣＩＤ－ＰＢＬ小鼠更适合用于人源性特异ＩｇＧ的诱导。     

虹吸法制备冷沉淀的容量控制探讨

<正>冷沉淀由新鲜冰冻血浆(FFP)经6℃融化后,具有凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原(Fg)和vW因子(血管性血友病因子)活性的冷不溶解成分。冷沉淀在我国医学领域中广泛应用,被用于HA、Fg缺乏、大量输血和DIC等凝血功能障碍患者的治疗,特别适用于难以给予大量的FFP(防止发生循环超负荷)来提供足量的凝血因子的患者,更多的是配合性输注[1]。     

如何实践科学合理用血的几点看法

输血作为一种特殊的治疗手段,涉及医院内、外、妇、幼等多个临床科室,在挽救患者生命中具有不可替代的作用.血液作为一种特殊资源,目前仅来源于人体,具有稀缺性.虽然早在20世纪30年代,人们就开始进行血液替代品的研究,但真正应用于临床的只有血浆代用品(如右旋糖酐),而具有携氧能力的红细胞代用品和具有凝血功能的血小板代用品,目前尚处于研究阶段[1,2].由于有偿献血存在卖血者冒名顶替、影响血液安全的风险,国家自1998年颁布<中华人民共和国献血法>,并逐步推进实施无偿献血制度.十余年来,我国输血事业得到长远发展,血液安全得到很大保障.但同时也逐渐暴露出一些问题,主要表现为在全国各省市均普遍面临的血源紧张和季节性血荒等问题.在有限的血液资源和临床日益增长的用血需求的矛盾下,如何实践科学合理用血成为一个紧迫需要解决的课题.     

酶联免疫吸附检测鼻咽癌方法的建立

目的：探讨检测鼻咽癌的酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）方法。方法：以正丁酸和巴豆油诱导Ｒａｊｉ细胞表达的ＥＢ病毒早期蛋白为抗原，用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中抗ＥＢ病毒相关早期蛋白的ＩｇＧ抗体水平（吸光度Ａ４９０）。其中鼻咽癌４５４例，肝癌４０例，肺癌２３例，肠癌２０例，乳腺癌２３例，卵巢癌１６例，头颈肿瘤１５例和健康人５２４例。结果：在所有被检血清中鼻咽癌血清Ａ值最高（０．３３３±０．１００），（Ｐ＜０．００１）。以正常人９５％特异性Ａ４９０＜０．１８为界，ＥＬＩＳＡ方法诊断鼻咽癌的敏感性为８９％（４０５／４５４）特异性为９４％（４９３／５２４）。结论：用来自Ｒａｊｉ细胞内的ＥＢ病毒早期蛋白为抗原建立的ＥＬＩＳＡ方法可以应用于鼻咽癌的血清学诊断。     

DETECTION OF EB VIRUS EARLY ANTIGEN IN NASOPHARYNGEAL CARCINOMA (NPC) USING A NEW MONOCLONAL ANTIBODY--BAE-5

A mouse monoclonal antibody against EB virus EA-R named BAE- 5 was prepared applying hybridoma technique by use of n-butyric add and croton oil induced Raji cells as immunogen.And then, 34 NPCs and 29 mm-NPC neoplasms were detected by the BAE-5 using APAAP immunohistochemical staining method.The results Indicated that all of the 34 NPCs and 9 of the 29 non-NPC neoplasms could reacted with the BAE-5 in spite of the columnar epithelium reserve cells showing positivity also. It is reasonable to come to the conclusion that most of the NPC cells can not only harbour EBV DNA but some of them be able to express EA-R. Some non-NPC neoplasms being demonstrated BAE-5 posttlvlty may be due to the presence of EBV EA- R antigenic epitope or polypeptides simulating the structure of EA-R. The authors think that these findings have theoretical significance for understanding the role of EBV- encoded poiypeptides, especially EA complex, In the development and progression of NPC as well as some non- NPC neoplasms harbouri     

环酯红霉素对近5年临床分离菌株的体外敏感性研究

目的通过比较近五年临床分离菌株对多种抗菌药物的药物敏感性及耐药性研究,了解环酯红霉素的体外抗菌活性。方法利用琼脂平板稀释法对临床分离220株细菌进行药敏性分析。结果药物敏感性实验表明肺炎链球菌、化脓链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和流感嗜血菌对环酯红霉素的耐药率分别为35.0%、55.0%、35.0%、36.7%和70.0%。肺炎链球菌、化脓链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和流感嗜血菌对环酯红霉素的MIC50和MIC90分别为1、1、32、0.5、64μg/mL和32、8、256、32、128μg/mL。结论经SPSS17.0统计分析后,发现临床分离菌株对环酯红霉素和阿奇霉素的耐药率表明两者的抗菌活性相当,不存在统计学差异(P>0.05)。