PCR微流芯片与基因芯片、基因测序在HBV基因型、病毒变异上应用比较

目的 对PCR微流芯片与基因芯片、基因测序在HBV基因型、病毒变异上应用进行比较。方法 分别采用PCR-微流芯片、基因芯片法对15例临床考虑拉米呋定耐药的患者血清进行HBV多点变异检测，从中随机抽取8例患者标本采用PCR-微流芯片、基因测序法进行HBV基因型、HBVYMDD检测。结果 基因芯片法与PCR--微流芯片检测HBV多点变异9／15三项完全一致，3／15两项一致；8例患者双份标本两种方法检测HBV基因型结果完全一致均为IIBVC型；基因测序法8例患者中1例HBVYMDD阳性，PCR微流芯片法8倒患者中栓出2倒HBVYMDD。结论 PCR-微流芯片法与基因芯片法、基因测序法有较好的一致性．适用于临床和流行病学调查研究。     

慢性肝病患者肾功能损害与血清CL-IV的关系

探讨慢性肝病患者伴肾功能损害时与血清CL-IV的关系。选择肾功能异常(17例)和肾功能正常(28例)的慢性肝炎中度、重度及肝炎肝硬化患者为检测对象。结果慢性肝炎中度、重度及肝炎肝硬化的CL-V呈递增趋势,且均显著高于正常对照(P<0.05)肾功能异常组CL-V值高于肾功能正常组(P<0.05),SCR、BUN值亦如此(P<0.01)。提示血清CL-V变化与肾功能损害、疾病活动状态相关,可作为监测慢性肝病合并肾功能损害预后的辅助指标。     

江苏省南通地区丙型肝炎病毒的分子流行病学分析

目的 :调查南通地区丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)的亚型分布特征。方法 :2012年5—9月间,在南通市第三人民医院收集到109例全血样本用以病毒的RNA提取,RT-PCR扩增和测序。所得的病毒序列与HCV参考序列构建系统发育树。结果:在收集到的109例HCV抗体(Anti-HCV Ig G)阳性样本中,有49例HCV RNA阳性,基于NS5B和C/E2片段构建的进化树显示,南通地区至少流行有1b、2a、3a、3b、6a 5个亚型病毒株。其中,1b是最主要流行的病毒株,占阳性样本中的63.3%;2a次之,占20.4%;3a、3b、6a 3个亚型分别占4.1%、8.2%和4.1%。相较于在普通人群中1b(68.9%)和2a(22.2%)为主要流行的病毒株,6a(50.0%)是静脉吸毒人群中最流行的亚型。结论:多个亚型的HCV病毒株共流行于南通地区,其中1b和2a是最主要流行的病毒株。     

甲状腺功能亢进症患者骨代谢指标的变化

目的观察甲状腺功能亢进症患者血钙、血磷、血碱性磷酸酶(ALP)、血甲状旁腺激素(PTH)和血25羟维生素D[25(OH)D]水平变化及其在骨代谢中的作用。方法选取109例初发或复发的甲状腺功能亢进症患者作为甲亢组,91例正常健康人群为对照组,采用电化学发光法测定其血浆25(OH)D和PTH,生化法测定血钙、血磷、血ALP。结果与对照组比较,甲亢组血钙、血磷、血ALP、血浆25(OH)D水平升高,血浆PTH降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。甲亢组中,维生素D缺乏30例(27.5%),不足37例(33.9%),充足42例(38.5%);对照组中,维生素D缺乏54例(59.3%),不足31例(34.1%),充足6例(6.6%)。Spearman相关分析显示,甲亢组血浆25(OH)D与血浆PTH呈负相关(r=-0.323,P=0.001)。结论甲亢骨转换加速;甲亢患者血25(OH)D水平升高,可能与高血钙、血PTH降低及高血磷导致1-α-羟化酶活性降低有关;维生素D缺乏在甲亢骨代谢中的作用不大。     

HBV-DNA定量检测在乙型病毒性肝炎诊断中的临床价值

目的 :探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA在乙型病毒性肝炎诊断中的临床价值。方法 :乙型肝炎患者180例为观察组,另选体检健康者300例为对照组,两组均行血清HBV-DNA检测,同时将检测结果与酶联免疫吸附试验测定的乙肝血清标志物进行对比分析。结果:HBs Ag+HBe Ag+HBc Ab+阳性率最高达98.0%,其病毒拷贝数为6.25±1.72copies/m L,也显著高于其它组(P<0.01);急性乙肝HBV-DNA阳性为85.7%,显著高于其它组(P<0.01);病毒拷贝数为6.25±1.72copies/m L,均明显高于其他疾病(P<0.01)。结论:荧光定量PCR方法检测HBV-DNA可准确判断乙型肝炎病毒的复制能力和传染性,从而为临床治疗提供更多依据。     

慢性病毒性肝炎患者血清sICAM-1与肝组织病理变化的相关性研究

目的评价sICAM-1在慢性肝病诊治中的临床意义。方法对130例慢性肝炎患者血清sICAM-1、纤维化指标和肝活检病理改变等进行相关性研究。结果ICAM-1在慢性肝炎肝组织的表达与炎症活动度、肝纤维化程度均呈显著正相关。血清sICAM-1水平与肝组织ICAM-1表达呈显著正相关(r=0.64,P<0.01),并与慢性肝炎的临床及病理分度呈一致性改变。血清sICAM-1水平与HA、PCⅢ、CⅣ、LN亦有良好的相关性(P<0.01)。结论慢性肝炎患者肝组织及血清ICAM-1水平可一定程度反映肝脏炎症和纤维化程度。血清sICAM-1水平的监测可作为临床判断慢性肝炎病情严重程度和预后的重要免疫学指标之一。     

慢加亚急性肝衰竭患者血清VEGF检测及意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对慢加亚急性肝衰竭(SACLF)患者预后判断的意义.方法 选择SACLF患者132例,同步测定血清VEGF、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(Tbi)、白蛋白(ALB)、胆碱酯酶(CHE)、凝血酶原时间(PT)、甲胎蛋白(AFP),分析血清VEGF水平变化与肝功能状态、肝脏损伤程度的关系.结果 SACLF患者血清VEGF与Tbi、PT呈正相关,与ALB、CHE呈负相关,与ALT、AFP之间无相关性;有慢性肝炎基础的SACLF者血清VEGF为(147.46±60.99)pg/ml,有肝硬化基础者为(153.85±127.40)pg/ml,有肝癌基础者为(179.24±115.26)pg/ml;SACLF患者早期血清VEGF水平为(126.88±110.43)pg/ml,中期为(233.21±109.04)pg/ml,晚期为(251.44±99.44)pg/ml,均明显高于正常对照组(P＜0.01);中、晚期患者血清VEGF明显高于早期患者(P＜0.01);死亡患者血清VEGF水平明显高于病情好转者(P＜0.01).结论 SACLF患者VEGF的水平与疾病的严重程度及预后密切相关,VEGF在SACLF发生发展过程中可能起重要作用.     

乙型肝炎相关性肝脏疾病肝移植后乙肝病毒复发的预防及检测

目的通过拉米夫定联合乙型肝炎免疫球蛋白（HBIG）治疗下供肝植入前后受体乙型肝炎病毒标志物变化、HBV基因及序列变化检测,探讨对其预防乙型肝炎相关性肝脏疾病患者HBV再感染的效果。方法采用MEIA法、PCR微流芯片法、基因测序法检测21例受体手术前后HBVM、HBVDNA定量、HBVYMDD、HBV1762/1764、HBV1896、HBVcccDNA及HBVS基因“α”决定簇变异,以7例HBsAg、HBsAb共阳性慢性乙肝患者、15例乙肝疫苗免疫失败儿童为HBVS基因“α”决定簇变异对照。结果术前21例受体HBsAg、HBeAg/HBeAb、HBcAb阳性,16例HBVDNA阳性,1例HB-VDNA阴性,4例HBVDNA未测;术后18例患者HBVM变成HBsAb或HBsAb、HBcAb或HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性,3例未有变化,其中19例HBVDNA阴性,2例HBVDNA阳性,2例外周血白细胞中HBVcccDNA阳性19例阴性,无1例术后出现HBVYMDD、HBV1762/1764、HBV1896、HBVS基因“α”决定簇变异。结论拉米夫定联合HBIG预防肝移植后乙肝复发疗效确切;乙肝低复发可能与受体无HBV基因变异、供肝质量有关;术前受体HBVDNA结果与术后乙肝复发相关性未显示。     

丙型肝炎75例血清自身抗体水平测定

目的:检测丙型肝炎病毒(HCV)感染患者血清中各种自身抗体指标,以探讨HCV患者体内自身免疫反应的情况。方法:应用免疫散射浊度法、间接免疫荧光法、电化学发光法对75例HCV感染者及40例健康体检者血清分别检测类风湿因子(RF)、抗核抗体(ANA)、抗甲状腺球蛋白及抗甲状腺过氧化物酶抗体(抗TG/抗TPO)。结果:HCV感染者RF、ANA、抗TG和(或)抗TPO的阳性率均明显高于正常对照组(P<0.05);HCV感染中,丙氨酸氨基转移酶(ALT)增高者其RF、ANA阳性率明显高于ALT正常者(P<0.05);HCV-RNA阳性者其RF、ANA阳性率明显高于HCV-RNA阴性者(P<0.05)。结论:HCV感染者存在自身免疫反应,且与病毒的复制有关,提示自身免疫反应是HCV感染后肝功能受损的病理机制之一。     

PCR-微流芯片法检测HBV感染者外周血HBV cccDNA和HBV DNA

目的：探讨HBV感染的肝病患者血中HBV cccDNA、HBV DNA的临床意义。方法：采用PCR-微流芯片法检测105例HBV感染者血清HBV DNA、HBVccc DNA、白细胞中HBV cccDNA（3例进行肝组织HBV cc-cDNA检测）,以6例非乙型肝炎患者作为对照。结果：6例非乙型肝炎患者HBVM、HBV DNA、HBV cccDNA均阴性;HBV感染者中41.9%（44/105）白细胞HBVccc DNA阳性,其中2例阳性PCR产物经基因测序得到验证;HBVDNA≥105copy/ml中HBV cccDNA阳性率57.4%（35/61）显著高于HBV DNA〈105copy/ml者20.5%（9/44,P〈0.01）;18.9%HB VDNA〈103copy/mlHBV感染者HBV cccDNA阳性;抗病毒治疗的慢性肝病患者HBV cccDNA阳性率显著低于未抗病毒治疗者（5/25 VS 34/65,P〈0.01）。结论：HBV感染的患者外周血中存在HBV cccDNA;HBV DNA高浓度者HBV cccDNA检出率高;外周血白细胞HBV cccDNA、血清HBVDNA联合检测更能准确判断抗病毒治疗效果及提高HBV复制检出率。