不明原因复发性流产患者外周血及蜕膜组织中Th17细胞相关效应细胞因子的表达及意义

目的探讨不明原因复发性自然流产(URSA)患者外周血及蜕膜组织中Th17细胞相关效应细胞因子白细胞介素(IL)-6、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-17、IL-23的表达及意义。方法 20例URSA患者,设为URSA组;20例同期正常早孕要求行人工流产手术孕妇,设为NP组。2组受试者均采集静脉血5 m L及自行排出或人工流产术刮取的蜕膜组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清及蜕膜组织中IL-6、TGF-β、IL-17、IL-23水平。结果 URSA组患者血清及蜕膜组织中IL-6、IL-17、IL-23水平显著高于NP组(P0.01),TGF-β水平显著低于NP组(P0.01)。结论 Th17细胞相关细胞因子IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β可能参与了URSA患者母胎免疫,IL-23有望成为URSA新的治疗靶标。     

血小板活化因子对生育与不育男性精子顶体反应的影响

<正>在动物与人类受精过程中,获能和顶体反应(AR)是精子穿透卵子透明带,并与卵膜融合,最后发生受精的必要条件。只有获能的精子才能发生顶体反应。同样,只有经过顶体反应的精子才能与卵子受精[1]。已知大量的内源性因子可以调节精子     

子宫内膜组织中IL-6、IL-8、IL-10、 TGF-β1水平 与胚胎反复着床失败的关系研究

目的:通过比较胚胎反复着床失败(RIF)妇女与对照妇女子宫内膜组织中IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1水平的差异,探讨IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1与RIF的关系.方法:本研究共纳入24例妇女,其中RIF组12例,对照组12例.采用液相芯片技术比较两组子宫内膜组织中IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1水平的差异,探讨这些细胞因子与RIF的关系.结果:在RIF组妇女子宫内膜组织中IL-10的水平明显高于对照组(P=0.044),而IL-6、IL-8和TGF-β1水平明显低于对照组(均P<0.01).结论:子宫内膜组织中IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1,水平异常可能是胚胎反复着床失败的原因.     

运用Affymetrix网上分析中心初步分析EGCG作用肝癌细胞SMMC-7721前后差异表达基因数据

目的探索如何运用Affymetrix网上分析中心对Affymetrix基因芯片数据进行分析,挖掘其中相关的生物学信息。方法登陆Affymetrix网站,运用BatchQuery(批量查询)、QuickQuery(快速查询)、Intersection(交集)等查询和分析功能,对用AffymetrixU133A2.0人基因表达谱芯片检测的经没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)作用肝癌细胞系SMMC-7721前后的196个表达差异基因进行不同的逻辑运算。结果得到按功能分类的EGCG作用肝癌细胞系SMMC-7721后表达差异基因信息列表6个。分别是细胞周期进展相关基因列表、细胞增殖相关基因列表、能量代谢相关基因列表、凋亡关基因和细胞生长抑制基因列表、免疫应答相关基因列表、信号转导相关基因列表。每个列表包含了每个基因对应的探针序列信息、基因符号、基因功能及参与的生物学过程等一系列生物学信息。结论运用在线、整合的Affymetrix网上分析中心,可快速、并行地操作大量的基因芯片原始数据,实现对差异基因初步的功能归类和生物信息学分析。     

血小板活化因子对精子功能的影响

血小板活化因子(PAF)是一种内源性脂质分子,除具有血小板激活功能外,还具有多效生物学特性。近年来发现,PAF对男性生殖和精子功能起重要作用:通过细胞上特异的G蛋白受体介导的三磷酸肌醇二酰甘油途径使胞内Ca2+浓度升高而间接影响精子功能。精源性PAF浓度能反映精子活力和受精潜能,可作为临床评估男性生育力的指标;外源性PAF能提高精子活力、顶体反应及人工授精的妊娠率。     

慢病毒介导β-珠蛋白基因添加在β-地中海贫血基因治疗中的应用

目的:构建全长人β-珠蛋白基因慢病毒载体,稳定转染K562细胞使得β-珠蛋白高效表达,为β-珠蛋白基因添加治疗奠定基础。方法:采用PCR扩增人正常β-珠蛋白基因,加上Sph I和Not I两个酶切位点进行T载体克隆,获得重组质粒p UC57-β-globin。用限制性内切酶连接目的基因片段和慢病毒载体,筛选获得慢病毒表达载体LV-β-globin,测序。将慢病毒载体转染293T细胞,包装病毒。用LV-β-globin感染K562细胞。采用流式细胞仪检测荧光效率,运用实时PCR及Western Blotting检测K562细胞中β-珠蛋白mRNA及蛋白表达情况。结果:通过PCR获得长度为2 128 bp的目的基因。连接p UC57载体和慢病毒表达载体,慢病毒表达载体LV-β-globin构建成功,序列正确。LV-β-globin转染K562细胞72 h后,显示大量绿色荧光表达,荧光效率为94.8%。β-珠蛋白mRNA 2-ΔΔCt值为4.080±0.078,高于对照组;β-珠蛋白灰度值为1.063±0.082,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建并包装含人β-珠蛋白基因的慢病毒载体并高效稳定表达。     

泼尼松对白细胞介素-17/白细胞介素-23炎症轴调节作用的分子机制

目的 探讨泼尼松对IL-23/IL-17炎症轴的影响.方法 分离昆明小鼠脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,MTT法检测不同浓度(0、0.001、0.01、0.1、1、10、100、1 000 μm)泼尼松对小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响.另取小鼠脾淋巴细胞分为4组,A组用空白完全培养液培养、B组用含0.001 μm泼尼松的培养液培养24 h后用含有转化生长因子-β1 (TGF-β1)、白介素-6(IL-6)、白介素-23(IL-23)培养液继续培养48 h;C、D组用含TGF-β1、IL-6、IL-23培养液培养48 h后,C组改用含0.001 μm泼尼松的培养液、D组改用空白培养液继续培养24h.收集各组细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法检测IL-17a含量;采用实时荧光定量反转录PCR检测IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达水平.结果 0.001 μm泼尼松对小鼠脾淋巴细胞的增殖即有抑制作用(P＜0.05).B组IL-17含量低于A、C、D组(P＜0.05),C组IL-17含量低于A组、D组(P＜0.05).A、B两组IL-23 mRNA表达量比较,差异无统计学差异意义(P＞0.05),C组IL-23 mRNA表达量低于D组(P＜0.05).结论 泼尼松能够抑制淋巴细胞的增殖,当机体免疫系统失衡促炎因子高表达时,泼尼松能够抑制IL-17分泌,抑制IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达而发挥免疫抑制作用.