矽肺大鼠肺组织let-7d-3p和miRNA-21-5P差异表达及其初步分析

目的探索let-7d-3p和miRNA-21-5p在二氧化硅(SiO_2)诱导的大鼠纤维化肺组织中的差异表达及其意义。方法 SPF级Wistar雄性大鼠随机分为对照组和模型组,每组30只,采用一次性气管内灌注1 ml SiO_2悬浊液建立大鼠矽肺模型,对照组大鼠相同方法灌注1ml灭菌生理盐水。分别于染尘后1、7、14、21、28 d采集各组大鼠肺组织,每组取6只,对3只大鼠肺组织进行病理学观察,另外3只采用miRNA微阵列芯片技术筛选肺组织中差异表达的miRNA,通过miRNA芯片筛选结合反转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证let-7d-3p和miRNA-21-5p在两组间的表达水平,对let-7d-3p和miRNA-21-5p进行靶基因预测并进行GO(gene ontology)富集分析和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路分析。结果对照组大鼠1、7、14和21 d Masson染色均可见正常肺组织,未发现胶原纤维,28 d大鼠肺间质和支气管周围仅有少量纤细的胶原分布;模型组大鼠1 d和7 d未发现胶原纤维,14 d染色可见较多以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,未见明显纤维组织,21 d和28 d模型组大鼠肺间质内可见大片状密集的胶原纤维沉积,在肉芽组织、支气管及血管壁周围胶原蛋白增生明显。模型组中let-7d-3p的表达水平均显著下调,miRNA-21-5p表达水平均显著上调,与对照组相比差异均有统计学意义(P0.05)。结论模型组中let-7d-3p和miRNA-21-5p表达变化明显,可能与早期矽肺的发生发展有关。     

双氢青蒿素对矽肺大鼠肺组织 TGF-b1､Smad2/3､Col-Ⅰ蛋白表达的影响

目的 观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对矽肺大鼠肺组织中转化生长因子-b1(TGF-b1)?Smad2/3?Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)表达的影响?方法 60只雄性SD大鼠随机分成对照组?模型组?DHA组,每组20只?模型组和DHA组给予1ml二氧化硅(SiO2)混悬液造模,对照组给予1ml生理盐水造模,造模后第2天开始灌胃给药,DHA组每只大鼠给予DHA75mg/kg灌胃,模型组和对照组给予1ml/100g生理盐水灌胃,每周给药6d,连续给药4周,并于第7?14?28天处死大鼠取肺组织,检测肺脏器系数,观察肺组织病理学变化,免疫印迹(Western blot)法检测TGF-b1?Smad2/3?Col-Ⅰ的蛋白表达?结果 与对照组相比,DHA组肺系数升高,差异具有统计学意义(P<0. 01);与模型组相比,DHA组肺系数降低,差异有统计学意义(P<0. 05);苏木素-伊红(HE)染色法显示DHA 组肺泡内的巨噬细胞和中性粒细胞低于模型组? Western blot实验结果显示,与模型组相比,DHA组TGF-b1?Smad2/3?Col-Ⅰ蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0. 05)?结论 DHA可以降低矽尘大鼠肺系数,减轻大鼠肺组织炎症,减少肺泡内巨噬细胞和中性粒细胞浸润,抑制TGF-b1?Smad2/3?Col-Ⅰ蛋白的表达,起到抑制肺纤维化作用,其机制可能与调控TGF-b1/Smad信号通路有关?     

双氢青蒿素对矽肺大鼠肺组织TGF-β1、 Smad2/3、Col-Ⅰ蛋白表达的影响

目的观察双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对矽肺大鼠肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2/3、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)表达的影响。方法 60只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组、DHA组,每组20只。模型组和DHA组给予1 ml二氧化硅(SiO_2)混悬液造模,对照组给予1 ml生理盐水造模,造模后第2天开始灌胃给药,DHA组每只大鼠给予DHA 75 mg/kg灌胃,模型组和对照组给予1 ml/100 g生理盐水灌胃,每周给药6 d,连续给药4周,并于第7、14、28天处死大鼠取肺组织,检测肺脏器系数,观察肺组织病理学变化,免疫印迹(Western blot)法检测TGF-β1、Smad2/3、Col-Ⅰ的蛋白表达。结果与对照组相比,DHA组肺系数升高,差异具有统计学意义(PSymbol|@@0.01);与模型组相比,DHA组肺系数降低,差异有统计学意义(PSymbol|@@0.05);苏木素-伊红(HE)染色法显示DHA组肺泡内的巨噬细胞和中性粒细胞低于模型组。Western blot实验结果显示,与模型组相比,DHA组TGF-β1、Smad2/3、Col-Ⅰ蛋白表达降低,差异具有统计学意义(PSymbol|@@0.05)。结论 DHA可以降低矽尘大鼠肺系数,减轻大鼠肺组织炎症,减少肺泡内巨噬细胞和中性粒细胞浸润,抑制TGF-β1、Smad2/3、Col-Ⅰ蛋白的表达,起到抑制肺纤维化作用,其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

补阳还五汤对矽肺大鼠肺组织Smad3、Smad7蛋白质表达的影响

目的观察补阳还五汤对矽尘染毒肺纤维化大鼠肺组织Smad3、Smad7蛋白质表达的影响。方法 2017年9月将实验室饲养一周的144只雄性健康SD大鼠随机分成对照、模型、给药干预组(包括泼尼松组、补阳还五汤高、中、低剂量组),每组24只。以矽尘混悬液注入大鼠气管染毒造模,造模后第2d起,各药物干预组给予相应药物灌胃。造模后第7、14、28d分3批次处死大鼠,每组8只。分离肺组织制备病理切片,观察病理变化;采用免疫组化染色法(S-P法)检测大鼠肺组织Smad3、Smad7蛋白质的表达情况。结果 (1)与对照组相比,各组大鼠肺组织Smad3蛋白质的表达升高(P0.01),Smad7的表达下降(P 0.01),其中模型组smad3和smad7的IOD值分别为(450.97±14.39)×103、(217.61±20.32)×103,变化最为明显;(2)与模型组相比,各给药干预组大鼠肺组织Smad3蛋白的表达水平均有不同程度的下降(P 0.01或0.05),Smad7表达增高(P 0.01或0.05);(3)与泼尼松组相比,补阳还五汤中、低剂量组大鼠肺组织Smad3蛋白的表达有所下降(P 0.01或0.05),Smad7的表达有所增高(P 0.05)。结论补阳还五汤可以有效控制TGF-β/Smad信号通路中可致纤维化的Smad3蛋白质的增高,同时促进该通路中Smad7蛋白的增加以发挥负性调控效应。     

双氢青蒿素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用

目的研究双氢青蒿素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用,比较双氢青蒿素和汉防己甲素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预效果。方法将80只SD大鼠随机分成对照组、模型组、双氢青蒿素组、汉防己甲素组,每组20只。对照组大鼠气管内注入生理盐水1 ml,其余3组大鼠气管内注入浓度为50 mg/ml的二氧化硅混悬液1 ml染尘,染尘后第2天开始灌胃给药。双氢青蒿素组给予双氢青蒿素75 mg/kg,汉防己甲素组给予汉防己甲素22 mg/kg,模型组和对照组给予生理盐水1 ml/100 g,每周给药6 d,连续给药3个月,并于染尘后的第7、14、28、90天分批处死大鼠,取大鼠肺组织,检测肺组织羟脯氨酸含量,观察肺组织病理学改变,酶联免疫法(Elisa)检测大鼠血清中转化生长因子-#1 (TGF-#1)和Smad2/3含量。结果双氢青蒿素、汉防己甲素和模型组羟脯氨酸含量均高于对照组(P0. 05),双氢青蒿素、汉防己甲素组羟脯氨酸含量低于模型组(P0. 05);双氢青蒿素和汉防己甲素组之间羟脯氨酸含量差异无统计学意义(P0. 05)。双氢青蒿素和汉防己甲素组大鼠血清中TGF-#1、Smad2/3表达水平均低于模型组(P0. 05),双氢青蒿素和汉防己甲素组之间大鼠血清TGF-#1与Smad2/3表达水平比较差异无统计学意义(P0. 05)。结论双氢青蒿素对染矽尘大鼠肺纤维化有抑制作用,双氢青蒿素和汉防己甲素对染矽尘大鼠肺纤维化的干预效果无明显差异。     

双氢青蒿素抗肺纤维化作用的研究进展

肺纤维化是一种由多种因素引起的慢性肺部疾病,发病机制不明,以传统抗纤维化药物治疗为主,但疗效甚微。双氢青蒿素是青蒿素的一种重要衍生物,具有抗炎、抗真菌、免疫调节、抑制细胞增殖和抗纤维化的作用。近年来双氢青蒿素的抗纤维化作用已成为研究热点,现就双氢青蒿素干预肺纤维化可能的作用机制加以综述。     

补阳还五汤对矽尘所致肺纤维化大鼠血清PCⅢ和Ⅳ-C含量的影响

目的探讨补阳还五汤对矽尘所致肺纤维化大鼠血清PCⅢ、Ⅳ-C表达的影响。方法将144只健康雄性SD大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组、给药组(包括泼尼松组和补阳还五汤高、中、低剂量组),每组24只。对照组气管内滴注生理盐水,模型组与给药组气管内滴注矽尘悬液制作矽肺大鼠模型,造模第2天起,给药组给予相应药物灌胃,于造模后第7、14、28天分3批处死动物,每次8只。检测各组大鼠血清PCⅢ、Ⅳ-C的含量。结果与对照组比较,各组大鼠血清PCⅢ、Ⅳ-C的含量逐渐升高,模型组最为明显(P0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清PCⅢ、Ⅳ-C含量均降低(P0.01);与泼尼松组比较,补阳还五汤中、高剂量组第14、28天时PCⅢ含量明显降低,补阳还五汤中剂量组第14、28天及高剂量组第28天时,Ⅳ-C含量明显降低(P0.05)。结论补阳还五汤可以有效降低染尘大鼠血清PCⅢ、Ⅳ-C的含量抑制矽肺肺纤维化。