孕妇外周血血浆胎儿DNA的检测

目的：建立可靠有效的检测孕妇血浆胎儿DNA的方法,探讨其在非创伤性产前诊断中的价值。方法：采用引物引伸预扩增（PEP）法及巢式PCR技术对65例孕妇外周血血浆DNA进行正常男性SRY基因检测。结果：单用巢式PCR技术和联合应用PEP,PCR技术对怀男胎的孕妇血中SRY基因检出率分别为65．2％（30／46）和89．1％（41／46）,两组差异有极显著性,对怀女胎孕妇血中SRY基因的未检出率为78．9％（15／19）和94．7％（18／19）,两组差异无显著性。结论：应用PEP法可对胎儿DNA进行全基因组扩增使DNA模板量增加,并使继后的PCR技术检测SRY基因的敏感性明显提高,PEP法是解决母血中胎儿细胞数量太少的途径之一,孕妇血浆中胎儿DNA可成为非创伤性产前诊断的胎儿物质来源。     

孕妇外周血中胎儿细胞及胎儿DNA的检测

目的　建立从孕妇外周血中分离有核红细胞 (NRBC)及DNA的可靠方法 ,并鉴定其来源。方法　对88例孕妇外周血分别通过密度梯度离心法 ,流式细胞术 (FCM )和荧光激活细胞分离技术 (FACS)分离NRBCs。应用套式PCR技术对 6 5例孕妇血浆DNA进行正常男性SRY基因检测。结果　①NRBCs:2 7例样品经密度梯度离心 ,其中 14例分选到 1～ 10个NRBCs。FACS技术对 6 1例样品进行转铁蛋白受体阳性细胞 (CD71+ )分选 ,所有样品均有CD71+ 细胞 ,其浓度为 (0 35± 0 2 5 )× 10 -2 。②胎儿DNA :4 6例怀男胎孕妇血浆DNA中SRY基因检测出率为 6 5 2 2 % (30 / 4 6 ) ,怀女胎的 19例样品SRY基因未检出率为 94 74 % (18/ 19)。结论　从孕妇外周血中分选胎儿NRBCs和血浆中胎儿DNA的方法已取得较大进展。利用母血中胎儿细胞及DNA诊断遗传性疾病可望成为最佳非创伤性产前诊断技术     

正常月经和异常子宫出血机制的概念

月经周期末 ,黄体萎缩致使雌孕激素水平下降而来月经。月经来潮的机制 ,目前认为主要涉及两个方面。一是血管活性的变化源于 1 940年 Mar-kee在恒河猴中所观察到月经前内膜血管收缩 ,继而扩张 ,导致组织缺血、坏死而出血。有学者认为子宫内膜特有的螺旋动脉是月经出血的基础。近年研究表明血管活性的变化主要受前列腺素、内皮素及一氧化氮等血管活性物质的影响。二是组织破坏。1 96 1年 Hisaw等发现 ,灵长类子宫内膜萎缩 ,螺旋动脉不复存在时仍有月经来潮 ,从而对前述观点提出异议。 1 991年L udwing等发现在正常周期第 2 8日 ,子宫内膜腔…     

子宫峡部瘢痕组织妊娠合并子宫动静脉瘘一例报告

胚胎种植于剖宫产术后子宫瘢痕组织处，是一种少见面危险的情况。本文报道1例子宫峡部瘢痕组织妊娠合并子宫动静脉瘘，并对其发生，诊断及处理方法等，结合文献复习进行分析。     

孕妇外周血中胎儿细胞及DNA分离方法的比较

产前非创伤性诊断技术是国内外围生学关注的重要课题。近 10年来 ,由于相关分子生物学、流式细胞学技术的进展 ,人类对研究母亲外周血中胎儿细胞的工作迈进了一大步。但由于母血中胎儿细胞甚微 ,分离及纯化胎儿细胞的技术难点尚未解决 ,使该技术还无法在临床上广泛应用。本研究旨在探索可靠稳定的分离胎儿细胞和ＤＮＡ的方法 ,为产前诊断奠定基础。一、材料和方法1.材料来源 :(1)研究对象 :选择 1997年 10月至 1999年6月在武汉华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科进行产前检查的健康孕妇 15 3例。年龄 2 1～ 35岁 ,孕 5～ 41周 ,血红…     

应用探针微孔板杂交技术检测孕妇血浆中胎儿DNA的研究

寻找一种检测孕妇血浆中胎儿DNA新方法.采用SRY探针微孔板杂交法,通过PCR产物与SRY探针杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取光密度值.结果发现探针微孔板杂交检测法的灵敏性和特异性均高于电泳检测方法.提示探针微孔板杂交检测技术的灵敏性和特异性较高,更适用于临床应用.     

多剂量光动力联合姜黄素治疗宫颈癌体外移植瘤及肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α、半胱氨酸蛋白酶-8的表达研究

目的 探讨多剂量光动力联合姜黄素治疗宫颈癌体外移植瘤及肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)的表达情况.方法 将宫颈癌Hela细胞接种于裸鼠背部皮下,一周后,接种部位出现黄豆大小的肿物,提示造模成功,随即分为10组,每组6只.1...     

盆腔脓肿28例临床分析

目的:探讨盆腔脓肿的病因学和治疗方法.方法:通过对28例盆腔脓肿的回顾分析,总结盆腔脓肿的病原学、诱发因素、如何运用抗生素及治疗原则.结果:28例盆腔脓肿中10例脓液培养为阳性,23例手术治疗后全部治愈,5例保守治疗,痊愈出院亦无复发.结论:治疗原则为控制感染,恢复生育功能,防止复发.目前仍以手术治疗为主,疾病早期可采用抗生素保守治疗.     

5296例妊娠和产后妇女宫颈细胞学筛查及随访

目的：对妊娠和产后妇女行宫颈细胞学检查并随访,研究其宫颈细胞病理学特征,制订妊娠和产后妇女宫颈细胞学筛查计划,确定异常妇女的管理方案.方法：对5296例妊娠和产后妇女行宫颈细胞学检查,均采用2001年TBS诊断标准,对结果异常者随访至正常,对持续异常或升级者行进一步检查.结果：本组妊娠妇女细胞学筛查阳性462例（8.72%）,对其中419例细胞病理学异常者成功随访.3个月总体转阴率为73.74%（309/419）,其中不典型的鳞状上皮细胞（ASC-US）组79.56%,不除外高度鳞状上皮内病变的不典型的鳞状上皮细胞（ASC-H）组64.29%,不典型腺上皮细胞（AGC）组100%,低度鳞状上皮内病变（LSIL）组72.14%,高度鳞状上皮内病变（HSIL）组44.12%;转阴后持续6个月以上者72.32%（303/419）;升级者1.43%（6/419）.46例行阴道镜下活检,细胞病理与组织病理总符合率63.04%.结论：应重视妊娠和产后妇女宫颈细胞学筛查工作,妊娠期和产后妇女宫颈细胞学形态具有独特性,易造成假阳性诊断.为避免漏诊真正的病变,必须密切随诊.可适当放宽阴道镜下活检指征.     

应用探针微孔板杂交技术检测孕妇血浆中胎儿DNA的研究

寻找一种检测孕妇血浆中胎儿DNA新方法,采用SPY探针微孔板杂交法,通过PCR产物与SRY探针杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取光密度值,结果发现：探针微孔板杂交检测法的灵敏性和特异性均高于电泳检测方法,提示：探针微孔板杂交检测技术的灵敏性和特异性较高,更适用于临床应用。