长期铅暴露对小鼠胸腺细胞亚群分化的影响

目的探讨铅暴露对小鼠胸腺细胞不同亚群的影响。方法将24只健康初断乳21日龄清洁级雄性KM小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(200 mg/L)、中(400 mg/L)、高(800 mg/L)剂量乙酸铅染毒组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒12周。采用流式细胞技术检测小鼠外周血和胸腺内不同T细胞亚群的百分率。结果与对照组比较,中、高剂量乙酸铅染毒组小鼠外周血和胸腺中αβT细胞百分率和CD4+T细胞百分率明显降低,γδT细胞百分率明显增加(P<0.05),各剂量乙酸铅染毒组小鼠αβT/γδT值和CD4/CD8比例均明显下降(P<0.05);中、高剂量乙酸铅染毒组小鼠外周血中CD8+T细胞明显增加(<0.05),CD4+T细胞百分率明显下降(P<0.05),而在胸腺中CD4+T细胞和CD8+T细胞百分率均明显减少(P<0.05)。且随着乙酸铅染毒剂量的升高,小鼠外周血和胸腺αβT细胞百分率、CD4+T细胞百分率、αβT/γδT值以及胸腺CD4/CD8值均呈现下降,而外周血和胸腺γδT细胞百分率以及外周血CD8+T细胞百分率均呈现上升趋势。结论长期铅暴露可导致小鼠胸腺细胞亚群异常导致免疫损伤。     

脂多糖对长期铅暴露小鼠致死率及外周血炎症因子的影响

目的探讨48 h半数致死量(LD50)脂多糖对长期铅暴露小鼠致死率及外周血炎症因子的影响。方法将100只健康初断乳21日龄清洁级雄性昆明小鼠随机分为5组,分别为空白(蒸馏水)组、对照组和低(200 mg/L)、中(400mg/L)、高(800 mg/L)剂量乙酸铅+LPS(LD50,8.6 mg/kg)染毒组,每组20只。采用自由饮水方式进行铅染毒,连续染毒12周;再一次性腹腔注射染毒LPS,染毒容量为2.5 ml/kg,空白组注射等体积的生理盐水。统计48 h的死亡数并计算死亡率;检测外周血白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)及高迁移率组蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)的浓度。结果与对照组比较,400、800mg/L乙酸铅+LPS染毒组小鼠48 h死亡率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着乙酸铅染毒剂量的升高,小鼠48 h死亡率呈上升趋势。与对照组比较,各剂量乙酸铅+LPS染毒组小鼠血清IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均下降,而HMGB1水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着乙酸铅染毒剂量的升高,小鼠血清IL-6、TNF-α、IFN-γ水平呈下降趋势,HMGB1水平呈上升趋势。结论长期铅暴露可导致小鼠的抗感染能力下降。     

长期铅暴露对小鼠胸腺细胞移行相关趋化性细胞因子受体的影响

目的探讨铅暴露对小鼠胸腺细胞胸腺内迁移相关趋化性细胞因子受体的影响。方法将48只健康初断乳21日龄清洁级SD小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(200 mg/L)、中(400 mg/L)、高(800 mg/L)剂量乙酸铅染毒组,每组12只,雌雄各半。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒12周。染毒结束后,采用石墨炉原子吸收法检测血清、胸腺中的铅含量,采用流式细胞技术检测小鼠胸腺细胞趋化因子受体CXCR4、CCR5、CCR9的表达。结果与对照组比较,各剂量乙酸铅染毒组小鼠血清、胸腺铅含量以及小鼠胸腺细胞膜分子CXCR4、CCR5、CCR9的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着乙酸铅染毒剂量的升高,小鼠血清、胸腺铅含量以及小鼠胸腺细胞膜分子CXCR4、CCR5、CCR9的表达呈上升趋势。结论趋化性细胞因子受体参与长期铅暴露小鼠胸腺的免疫损伤。     

内皮细胞在感染性休克炎症性细胞因子释放中的作用

目的 以感染性休克患者血清刺激人原代内皮细胞(HPAEC)和外周血单个核细胞(PBMC),观察内皮细胞在感染性休克细胞因子释放中的作用.方法 采用密度梯度离心法分离健康人PBMC;RT-PCR及免疫印迹检测HPAEC细胞表面标志CD144和血管假性血友病因子(von Will-ebrand factor,vWF)的表达;ELISA检测感染性休克患者和健康对照者血清中的IL-6、TNF-α、MCP-1的水平;两种血清及LPS刺激HPAEC和PBMC后,ELISA检测培养上清中IL-6、TNF-α、MCP-1的水平;流式细胞技术检测休克患者血清和LPS刺激后HPAEC膜表面ICAM-1的表达;S1P1受体激动剂CYM-5442预处理后,休克血清刺激HPAEC培养上清中IL-6、TNF-α、MCP-1的水平.结果 HPAEC表达内皮细胞标志性分子CD144和vWF;感染性休克患者血清中炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1水平明显高于健康对照(P＜0.01);休克血清和LPS处理PBMC和HPAEC后,相对于对照组,均有明显升高(P＜0.01);PBMC的休克组炎症因子与PBMC的LPS组均无明显差异(P＞0.05),而HPAEC的休克组炎症因子相对于HPAEC的LPS组均明显升高(P＜0.01);同样地,LPS刺激两种细胞后,HPAEC的IL-6、TNF-α明显低于PBMC(P＜0.01),MCP-1的水平无明显变化(P＞0.05),但是休克血清刺激后,HPAEC的IL-6、TNF-α与PBMC无明显变化(P＞0.05),MCP-1则明显升高(P＜0.01);休克患者血清刺激S1P1受体特异性激动剂CYM-5442预处理的HPAEC后,培养上清中炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1水平明显降低(P＜0.01).结论 内皮细胞在感染性休克细胞因子释放中起着关键作用.