人肺腺癌细胞系A549线粒体差异蛋白质组学研究

目的 研究人肺腺癌细胞系A549与人正常支气管上皮细胞系16HBE线粒体蛋白质组的差异表达.方法 传代培养细胞系A549及16HBE,用线粒体提取试剂盒获取细胞线粒体蛋白质,进行双向凝胶电泳,运用液相色谱串联质谱分析技术筛选出A549和16HBE细胞系线粒体间表达水平显著差异的蛋白,所得结果通过Data Analysis软件标峰,用MASCOT进行结果搜索和数据分析.结果 双向电泳结果显示A549、16HBE细胞系线粒体存在差异的蛋白质点共41个,3倍以上差异的16个,A549细胞系中表达上调的15个,表达下调的26个,其中3倍以上差异表达上调的7个,表达下调的9个.运用液相色谱串联质谱技术鉴定出A549细胞系线粒体表达上调的蛋白质2个:AAA+ ATP酶家族结构域蛋白3B、tRNA鸟嘌呤糖基转移酶,表达下调的蛋白质7个:热休克蛋白75、复合物Ⅲ亚基1、复合物Ⅲ亚基2、鸟氨酸氨基转移酶、异柠檬酸脱氢酶亚基α、SLP-2、抗增殖蛋白.结论 应用亚细胞蛋白质组学方法,鉴定出肺腺癌细胞系线粒体差异表达蛋白,为阐明肺腺癌发生的分子机制、筛选早期诊断标志物提供了有益的线索.     

凋亡抑制基因Livin在肺癌化疗前后的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)对50例非小细胞肺癌患者化疗前、后血清中Livin的表达水平及20例正常健康人血清Livin水平进行检测。结果:1非小细胞肺癌患者血清Livin水平明显高于健康对照组(P<0.05),且化疗后Livin平均水平明显高于化疗前(P<0.05);2非小细胞肺癌患者血清Livin平均水平与临床分期呈正相关关系,~期患者Livin平均水平明显高于~期患者(P<0.05);3非小细胞肺癌患者血清Livin水平与有无淋巴结转移明显相关,有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.05);4Livin水平在性别、年龄、病理类型及分化程度方面无显著性差异(P>0.05)。结论:Livin在正常健康人血清中不表达,而在非小细胞肺癌患者血清中高表达,化疗后血清Livin水平增高,对判断其预后有一定临床意义。     

婚前健康体检者中HBV感染情况检测

1资料与方法 1．1资料来源 本资料来源于市妇幼保健院婚检室，2002年共对全市5317名进行了婚前健康检查，其中男性2670人，女性2647人，市区受检人数为4441人，乡镇为876人。1．2试剂与方法采用ELISA法(酶联免疫吸附试验)检测HBsAg，对阳性者，进一步检测其HBV标志物(HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc)，试剂盒由深圳月亮湾科技有限公司生产，均在有效期内，按试剂盒说明书要求统一操作步骤和结果判定。     

葎草花粉特异性致敏哮喘动物模型的制备

目的 建立葎草花粉粗浸液诱导的小鼠变态反应气管炎症动物模型.方法 制备葎草花粉粗浸液,将40只清洁级雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为4组,每组10只.①空白对照组:PBS+氢氧化铝致敏激发;②低剂量组:100 μg葎草粗浸液+氢氧化铝致敏激发;③中剂量组:200 μg葎草粗浸液+氢氧化铝致敏激发;④高剂量组:300 μg葎草粗浸液+氢氧化铝致敏激发.通过HE染色观察小鼠肺部炎症和黏液分泌,支气管肺泡灌洗液中细胞总数和细胞分类,酶联免疫吸附试验检测BALF,脾组织匀浆上清的IL- 4、IFN-γ和血清抗原特异的抗体验证哮喘动物模型.结果 随着抗原浓度的升高,肺部病理改变呈明显的变态反应炎症;高剂量组小鼠支气管肺泡灌洗液中的细胞总数为(210.75±78.80)×106/L、巨噬细胞数为(48.65±3.27)%、EOS数为(24.37±4.28)%、IL- 4、血清抗原特异性IgE抗体、IgG1抗体明显高于空白对照组(P<0.05);支气管肺泡灌洗液﹑脾组织匀浆上清的IFN-γ较空白对照组下降(P<0.05).结论 葎草花粉成功构建小鼠变态反应气道炎症动物模型.