社区获得性艰难梭菌感染相关因素分析

目的利用快速核酸多重检测平台检测宁波地区腹泻患者艰难梭菌(CD)的感染率及致病性(毒素A、B和二元毒素AB的携带状况),探究社区获得性艰难梭菌感染(CA-CDI)的相关因素。方法收集2016年6-12月因腹泻就诊于宁波11家社区卫生院的门诊患者680例为研究对象。通过厌氧培养法、核酸多重检测平台快速检测法检测艰难梭菌,并对分离到的菌株进行毒素基因检测和4种抗菌药物药敏检测。同时收集患者临床资料,归纳CA-CDI的相关因素。结果共收集646份有效腹泻标本,分离获得CD共42例(6.50%);近4周接受抗感染治疗、近8周接受化疗、4周内使用抑酸药物(PPI)是CA-CDI的相关因素。本地区社区获得性CD普遍携带两种毒素基因,41株为tcdA+/tcdB+/cdtA-,仅有1株为tcdA-/tcdB+/cdtA-。同时发现1株可能引起严重肠道病变的tcdA+/tcdB+/cdtA+的高产毒株。MOKOBIO系统对菌体直接检测法其敏感性为95.24%,特异性100.00%。所有菌株对甲硝唑和万古霉素均呈高度敏感。分离菌株对克林霉素敏感率为11.90%,对红霉素敏感占45.24%;且有45.24%对克林霉素高度耐药(MIC128mg/L)、54.76%的菌株对红霉素呈高度耐药(MIC128mg/L)。结论快速核酸多重检测平台(MOKOBIO)直接检测粪便样本敏感性、特异性良好,可提高艰难梭菌感染的诊断率,方便在基层医疗单位广泛应用。     

D试验和多重PCR检测红霉素耐药葡萄球菌

目的了解红霉素耐药的葡萄球菌对克林霉素的耐药表型和基因型，指导临床合理使用抗生素。方法用NCCLS标准D试验检测红霉素和克林霉素的耐药表型，通过多重PCR检测耐药基因ermA、ermC和msrA。结果所有144株葡萄球菌中，84株（58．3％）对红霉素和克林霉素耐药（cMLS），27株（18．8％）对红霉素耐药对克林霉素敏感但D试验阳性（iMLS），33株（22．9％）对红霉素耐药，对克林霉素敏感但D试验阴性（MS）。在MS型耐药的菌株中均只检测到msrA基因，在cMLS和iMLS型耐药的菌株中，除了1株3种基因均阴性外，其他均检测到ermA或ermC基因。在金葡菌中iMLS型耐药的菌株以ermC基因稍多（3／5），而cMLS型耐药的菌株以ermA基因居多（56／62）；在凝固酶阴性葡萄球菌中iMLS型和cMLS型耐药的菌株均以ermC基因居多（分别为22／22和11／14）结论iMLS型耐药的葡萄球菌在临床比较多见，多重PCR和D试验均可对其鉴别，临床微生物实验室应常规进行D试验。     

鄞州区50株结核杆菌6种耐药基因检测分析

目的：分析鄞州区结核杆菌耐药相关基因的突变特点,评价DNA测序分析在结核分枝杆菌耐药性检测中的价值。方法：利用DNA测序分析方法检测50株结核分枝杆菌的KatG、inhA、rpoB、embB、rpsL及rrs基因片段。结果;50株结核杆菌中,对INH、RFP、EMB、SM耐药的基因突变率分别为88％（包括KatG、inhA基因）、70％（rpoB基因）、100％（embB基因）、55％（包括rpsL、rrs基因）。其中INH耐药以KatG基因突变为主,SM耐药以rpsL基因突变为主,KatG基因突变多见于315位点,rpoB基因突变多见于531位点,embB基因突变多见于306位点,rpsL基因突变多见于43位点。结论：通过对结核杆菌常见耐药基因检测,将在短时间内区分敏感株及耐药株,有效指导临床用药,具有重要的意义。     

非典型病原体在获得性肺炎中的地位

目的探讨非典型病原体在非重症社区获得性肺炎中地位。方法收集宁波市鄞州区农民2006年1月至2007年7月的CAP患者共96例，分别检测就诊时及2～4周后的血清肺炎支原体、肺炎衣原体及嗜肺军团菌抗体的滴度，以出现4倍及4倍以上的增高为诊断标准。结果所有患者的初期治疗均使用β-内酰胺类抗生素，3天治疗效果不佳者，进行抗生素升级治疗同时加用大环内酯类，或单用呼吸喹诺酮类抗生素，所有患者病情都得到控制，96例患者测出非典型病原体21例，其中肺炎支原体14例，肺炎衣原体4例，嗜肺军团菌3例。但21例患者中有11例单用β-内酰胺类抗生素治疗成功，10例加用大环内酯类，或单用呼吸喹诺酮类抗生素。结论农村地区社区获得性肺炎的病原体中，非典型病原体占一定的比例，可能以混合感染为主，其初始治疗可不必覆盖非典型病原体。     

miR-134调控人肺腺癌细胞顺铂耐药

目的:探讨微小RNA-134(miR-134)在人肺腺癌细胞顺铂耐药中的作用及机制。方法:采用miRNA芯片筛选A549/CDDP和A549细胞差异表达miRNA,应用real-time PCR验证miR-134的表达。将miR-134模拟物和抑制物分别转染A549/CDDP和A549细胞,应用MTT法检测肺癌细胞对顺铂的敏感性。Western blot技术检测miR-134对叉头框蛋白M1(FOXM1)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响。结果:miRNA芯片显示,13种miRNAs在A549/CDDP和A549细胞中呈显著表达;其中,miR-134下调最显著。miR-134模拟物转染组A549/CDDP细胞对顺铂的敏感性较阴性对照组显著提高(P0.01),而miR-134抑制物转染组A549细胞对顺铂的敏感性较阴性对照组显著降低(P0.01)。FOXM1 siRNA能够有效抑制FOXM1蛋白表达,si-FOXM1转染组A549/CDDP细胞对顺铂的敏感性较阴性对照组显著提高(P0.01)。此外,Western blot结果显示miR-134能够抑制MRP1蛋白表达。结论:miR-134能够增加肺腺癌细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与调控FOXM1和MRP1表达有关。     

多耐药鲍氏不动杆菌菌株亲缘性分析

目的了解医院感染多耐药鲍氏不动杆菌(MDR-ABA)的耐药基因及亲缘性。方法采用PCR对20株MDR-ABA进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类耐药基因、转座子遗传标记、整合子遗传标记共36种耐药基因的检测,并以耐药基因作为分子标志作聚类分析;同时用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子同源性检测以作参照。结果 20株MDR-ABA中,TEM、ADC、OXA-23群阳性率分别为100%、75%、50%,而其他β-内酰胺酶相关基因均为阴性;aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ阳性率分别为10%、15%、30%、25%;转座子遗传标记tnpU检出率为55%、整合子遗传标记qacE△1-sul1阳性15株(75%),并对检测结果作样本聚类分析,聚类分析提示20株MDR-ABA可分为A、B两群,均存在克隆传播现象;而PFGE法通过图形条带分析所得结果与聚类分析结果具有一定差异。结论 MDR-ABA耐药基因检出率较高,并可导致医院内克隆传播感染,聚类分析比PFGE更能反映菌株遗传信息,是分析同源性更科学方法。     

实时荧光定量PCR对社区暴露腹泻样本CA-CDI的诊断价值

目的评估实时荧光定量PCR检测技术对社区获得性艰难梭菌感染(CA-CDI)的诊断价值。方法选取具有社区暴露史的有效非重复腹泻标本329例,分别以实时荧光定量PCR粪便标本直接检测法与产毒培养+细胞毒性酶免疫分析法(EIA)对CA-CDI进行诊断,并以产毒培养+EIA为“金标准”,评估实时荧光定量PCR检测的效能。结果CA-CDI“金标准”检测阳性率为5.17%(17/329).艰难梭菌荧光PCR检测试剂盒诊断结果与“金标准”差异无统计学意义(P>0.05),检测一致性为0.831,灵敏度与特异度分为76.47%、99.68%。艰难梭菌荧光PCR检测试剂盒对tcd-B的检测结果与“金标准”差异无统计学意义(P>0.05),检测一致性为0.860,灵敏度与特异度为81.25%、99.68%。结论实时荧光定量PCR检测技术以快速、高敏感度、高特异度等特点,可对社区暴露腹泻样本CA-CDI进行独立检测。     

重症监护病房分离的常见病原菌流行情况及耐药性监测

目的调查医院重症监护病房（ICU）分离的病原菌的流行情况及抗菌药物耐药性。方法对ICU分离的655株院内感染病原菌的流行情况及其耐药性进行回顾性分析。结果655株院内感染病原菌中分离率前三位分别为铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌和肺炎克雷伯肺炎亚种,其中非发酵占总分离菌的44.4%（291/655）,革兰阴性需氧杆菌占27.0%（177/655）,真菌占15.1%（99/655）,革兰阳性球菌占9.2%（60/655）;病原菌对抗菌药物多重耐药,泛耐药情况严重。结论ICU病房病原菌构成及耐药性与普通病房明显不同,应根据其病原学及抗菌药物耐药性合理选择抗菌药物。     

性传染病与性病筒析

本文对我国目前把“性传染病”与“性病”两个不同的概念混为一谈,进行了逻辑上和临床上的区分。在介绍世界卫生组织确定“性传染病”概念的同时,并对“性病”的定义提出了初步意见。