牛至挥发油对小鼠腹腔巨噬细胞活性及免疫器官重量的影响

一定浓度的牛至挥发油(OVLVO)能显著提高Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)形成EA和YC花环的能力,显著增强腹腔Mφ的吞噬作用,有明显的增加小鼠脾脏重量的作用,而对胸腺的重量则无显著的影响。表明OVLVO在一定浓度下不引起免疫器官萎缩并能显著提高小鼠腹腔Mφ的活性。提示OVLVO的抗感染作用与增强Mφ的功能有关。     

南宁市1～4岁儿童及成人血清破伤风IgG抗体水平调查

目的了解南宁市1~4岁儿童及成人血清破伤风IgG保护性抗体水平,并比较两种试剂的检测效率。方法用间接ELISA法,两种试剂盒分别定性和定量检测儿童及正常成人血清破伤风IgG抗体,比较检测结果的符合度并评价之。结果儿童及成人血清破伤风IgG抗体阳性率分别为75.0%~76.0%和5.3%~6.3%;抗体水平中位数分别为0.228IU/ml和0.027 IU/ml;破伤风IgG抗体≥0.1 IU/ml者分别占57.8%和13.5%;两种试剂定性检测结果有很好的符合度。结论本地区1~4岁儿童及成人血清破伤风IgG抗体阳性率和保护率较低,加强人群破伤风类毒素免疫很有必要。     

弓形虫-IgM诊断试剂的研制

目的　对间接酶联免疫吸附法 (EL ISA)法检测人弓形虫 (TOXO) - Ig M的试剂进行优化改良。方法　以自制原材料采用间接 EL ISA法研制 TOXO- Ig M检测试剂 ,对试剂的特异性、精密性、灵敏度以及稳定性进行鉴定。结果　质量检定结果表明 ,该试剂特异性强、本底低 ,能有效消除类风湿因子等干扰因素的影响 ;灵敏度>1∶ 16 0 ;精密性好 ,变异系数 (C.V )均 <15 % ;试剂稳定 ,37℃存放 6天 ,各项指标的变化率不超过 15 %。结论　本试剂盒有较好的特异性、敏感性和稳定性 ,可广泛应用于临床优生优育检测     

酶联免疫吸附试验间接抗体夹心检测SARS-CoV抗原方法的建立和应用

目的制备和鉴定严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳(N)蛋白单克隆抗体(rnAb)和多克隆抗体建立SARS—CoVN抗原捕获抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法用于SARS-CoV感染的早期诊断。方法用基因重组SARS-CoV N蛋白免疫BALB/c小鼠和新西兰大白兔制备mAb和多克隆抗体，采用ELISA间接法、免疫荧光和免疫印迹进行筛选和鉴定，用单克隆抗体与兔多克隆抗体进行配对试验，建立抗原捕获抗体夹心ELISA法测定SARS-CoV N抗原。结果获得9株特异性针对SARS-CoV N蛋白的mAb和高效价的兔多克隆抗体，通过高亲和力的mAb与兔多抗的配对试验，筛选出3株单抗N1E8、N8E1和N10E4混合作为捕获抗体，与兔多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG组合作为测定抗体，建立了抗体夹心ELISA法，测定重组SARS-CoV N蛋白最高灵敏度为50pg／ml，特异性达99．86％，测定420份血清学确诊的SARS患者血清，其中发病1—10天阳性检出率为90.1％，11—20天检出率为23％，21天以上均为阴性，与其他呼吸道病毒和冠状病毒无交叉反应。结论获得特异性好、亲和力高的单克隆抗体和高效价的兔多克隆抗体，经过抗体的配对和优化，建立了一种灵敏度高、特异性强的SARS-CoV抗原的ELISA捕捉法．可应用于SARS早期诊断、溯源及流行病学研究。     

广州市新发4例SARS患者SARS-CoV核衣壳蛋白和抗体变化规律

研究证明严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(CoV)的核衣壳蛋白(N)比较保守，具较强的免疫原性，在感染细胞中可大量的表达。作为病毒感染的靶标志物，检测N蛋白可能成为早期诊断的一种有用的方法。我们通过研究2003年12月至2004年1月在广州市新发4例SARS患者血液中的N蛋白和抗体的变化规律，探讨循环N蛋白在SARS早期诊断中的价值。     

酶联反应板包被链霉亲合素的优化方法

目的对链霉亲合素(streptavidin,SA)预包被酶联反应板的优化方法进行研究,比较干法、湿法包被的优越性。方法通过对包被缓冲液、SA浓度、17种市售反应板的比较试验,得出SA包被的较优条件。结果选择洁特高亲和力板,采用碳酸缓冲液干法包被,37℃温育16 h至全干,达最佳包被效果,此时SA浓度为2μg/ml。干法包被的孔间差2.95%,批间差7.37%,37℃保存7 d结合生物素的效果无显著改变。生物素结合量为每孔1 ng,是国产SA预包被反应板的5倍。结论用干法预包被SA优于传统的湿法包被,效果等同甚至超过现有进口SA预包被板。