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金属硫蛋白电化学分析法的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
金属硫蛋白(metallothionein,简称MT)是一类在生物界中普遍存在的低分子量、富含半胱氨酸的热稳定性蛋白,结构分析表明MT含有两个结构域:α结构域和β结构域,分别结合4个和3个金属离子。MT的重要功能是结合重金属与清除氧自由基,还具有参与体内微量元素储存、运输和代谢,增强机体对各种不良状态的适应能力及抗电离辐射作用的功能。因此对MT进行快速、灵敏的检测有助于进一步研究和探讨其生物学功能,对生物化学、发育生物学及毒理学研究都有重要意义。 相似文献
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目的:基于热休克信号响应和分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告基因,建立HSE-SEAP-HeLa细胞模型,预测重金属(汞及其化合物)的早期毒性。方法:将pHSE-SEAP质粒转染到人子宫颈癌HeLa细胞中,建立瞬时HSE-SEAP响应模型。热休克(42 ℃,1 h)或重金属化合物(CdCl2,5 μmol·L-1,4 h)处理后,在完全DMEM培养基中恢复48 h后,检测细胞上清液中的分泌型碱性磷酸酶的含量(表示该状态下细胞中的热休克蛋白表达量),同时用MTT方法检测对应浓度下的细胞活性,以验证模型的有效性和重复性。并用亚致死浓度(由MTT实验确定)的无机和矿物汞(HgCl2,HgS和朱砂)和柳硫汞钠处理细胞,检测诱导的细胞热休克响应。结果:热休克和CdCl2作用HSE-SEAP-HeLa细胞模型后,细胞上清液中的分泌型碱性磷酸酶的含量显著升高;热休克蛋白表达早于Cd2+对细胞活性的降低。4种汞化合物在亚致死浓度均诱导细胞内热休克蛋白的变化,但4种化合物的作用时间和浓度效应不同,显示不同类型的汞化合物早期毒性存在差异。结论:HSE-SEAP-HeLa细胞模型可有效检测重金属诱导的热休克应激作用,并具有良好的重复性,可应用于重金属有关的早期毒性预测或药物毒性评估。 相似文献
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钒化合物在癌症及糖尿病治疗中显示出其潜在的可能而受到人们的关注,但是其毒性限制了其作为药物的进一步发展。已有研究表明钒通过影响线粒体功能诱导的氧化应激是钒化合物毒性的主要原因。本工作主要考察了两种钒化合物-偏钒酸钠和乙酰丙酮氧钒对线粒体活性氧产生和呼吸链复合体活性的影响。结果表明,钒化合物依其化学物种的不同而对活性氧和复合体活性以不同的方式产生影响。偏钒酸钠抑制线粒体复合体Ⅰ和Ⅱ的活性,同时在低浓度范围内促进活性氧的产生。而氧钒化合物则促进复合体Ⅱ活性,同时促进复合体Ⅰ相关途径的电子漏。本工作为研究钒化合物作为抗糖尿病药物毒性提供了新的结果。 相似文献
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化学疗法和化学预防是控制癌症发病率和死亡率的重要手段,而针对氧化性/亲电性胁迫的细胞防御机制对这两种手段中都有重要影响。这种细胞防御机制主要由代谢消除氧化性/亲电性物种的细胞保护酶和蛋白组成,而转录因子Nrf2调控着很多这些酶和蛋白的基础和可诱导表达,是协调细胞防御响应的枢纽。Keap1蛋白可以感受氧化性/亲电性信号,正常情况下与Nrf2结合并抑制其活性。在氧化性/亲电性胁迫下,这种结合被破坏并导致Nrf2的激活和细胞保护酶/蛋白的表达。因此,Nrf2成为了化学预防药物的重要作用靶标。然而,在不同细胞环境下Nrf2的激活可能导致完全不同的后果。Nrf2对细胞不加区别的保护作用在癌症发生和癌细胞化疗耐药性中扮演了不受欢迎的角色。Nrf2信号的激活给癌变细胞以生长优势,也保护癌细胞免受化疗药物杀伤,导致不良的临床后果。从这方面而言,Nrf2信号的抑制剂可以增强化疗药物的效果,也值得深入研究开发。而对Nrf2的调控和功能的深入研究和了解,对化学预防和化学治疗都具有重要意义。 相似文献
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以往的研究证明稀土离子(Ln)具有类似磷脂酶C(PLC)的作用[1,2],促进肌醇磷脂(PIP2)水解产生三磷酸肌醇(IP3)和甘油二酯(DAG).已知IP3和DAG分别激活肌醇磷脂信号系统中的IP3/Ca2 和DAG/蛋白激酶C(PKC)两条信号传递途径.DAG激活PKC转位,以磷酸化形式对许多蛋白质和酶类进行修饰,从而调节和控制一系列生理反应.本工作以大鼠肝脏、人红细胞以及K562细胞为研究对象,采用免疫组织化学方法、酶联免疫法(ELISA)以及激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)研究稀土离子La3 、Ce3 、Tb3 和Y3 对PKC的含量、分布和转位的影响. 相似文献
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钒化合物是具有前景的抗糖尿病候选药物,但其药理作用机制尚未完全阐明。在I型和II型糖尿病发病过程中,炎症和自免疫紊乱可能发挥了重要作用?其中热休克蛋白60(HSP60)是关键的内源性促炎因子之一。本文研究了偏钒酸钠和硫酸氧钒两种化合物对R AW264.7巨噬细胞在HSP60刺激下分泌白细胞介素6(IL-6)的作用。结果表明,两种钒化合物均可浓度依赖的调节I L-6的表达。然而,钒化合物的作用并没有通过NF-κB和PPAR-γ这两种常见的炎症信号调节机制。本文结果提示,钒化合物调节免疫的作用可能与其抗糖尿病药理作用机制有关,值得深入的研究阐明。 相似文献
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目的研究鹰嘴豆及豆芽与低剂量原钒酸钠联合使用的减毒、降糖作用。方法以链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导形成糖尿病大鼠模型,鹰嘴豆及豆芽和原钒酸钠分别单独和联合服用4周,观察大鼠血糖和血脂等的变化。结果与正常对照组比较,糖尿病组血糖升高了4倍,血浆胰岛素(insulin, INS)降低了57.63%,血浆脂质水平明显异常,肝肾功能明显受损。而分别单独和联合口服鹰嘴豆及豆芽和原钒酸钠4周后,糖尿病大鼠的上述指标均得到改善,其中以鹰嘴豆芽联合低剂量原钒酸钠(0.2?mg/mL)治疗组(D+Ps+V)效果最明显:血糖降低了72.24%(P<0.05);血浆胰岛素水平接近正常;血浆脂质水平、葡萄糖耐量、肝肾功能均得到改善。结论鹰嘴豆及豆芽和原钒酸钠均能改善糖尿病大鼠高血糖的发展状况和血浆脂质水平的变化状况;鹰嘴豆芽与原钒酸钠联合应用疗效最佳,既降低了钒毒性又增强了两者的抗糖尿病作用。
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目的:研究钒酸根和钒氧离子分别作为磷酸根和二价金属离子的类似物作用于微管蛋白对其聚合过程的影响。方法:用浊度法和荧光光度法测定钒化合物对猪脑微管蛋白的作用。结果:钒酸根促进微管蛋白聚合,而钒氧离子则抑制其聚合,对微管蛋白荧光影响表明二者均使蛋白内源荧光淬灭,但钒酸根作用大于钒氧离子。结论:钒酸根作用类似于其它磷酸类似物如AlF4和BeF3-即促进微管蛋白的聚合,钒氧离子的作用类似于二价阳离子钙(Ⅱ),抑制微管蛋白聚合,虽二者均使微管蛋白内源荧光淬灭,但作用方式可能不同。 相似文献