不同粒径纳米氧化铝对体外培养神经细胞凋亡的影响

[目的]体外检测不同粒径纳米氧化铝颗粒对昆明乳鼠神经细胞凋亡的影响。[方法]透射电镜观察纳米氧化铝形态与尺寸,以10nm、50nm、10μm Al2O3同剂量对体外培养的昆明乳鼠进行染毒,运用细胞计数试剂盒（cell counting kit,CCK-8）试剂检测细胞活力,用吖啶橙/溴化乙锭（acridine orange/ethidium bromide,AO/EB）双重染色法观察细胞死亡的形态学,采用Rhodamine123染色方法检测线粒体膜电位变化情况,间接反映早期凋亡变化,应用流式细胞仪测定各染毒组细胞凋亡。[结果]纳米粒子超声后,静置前后相比,电镜下可见纳米粒子均匀分布,且粒径小于100nm符合实验要求;AO/EB染色后,细胞形态学发生明显改变;罗丹明测线粒体膜电位,随着纳米氧化铝粒径的减小,膜电位逐渐降低;应用流式细胞术检测凋亡,随着纳米氧化铝粒径的减小,凋亡率逐渐增加。[结论]氧化铝颗粒能够引起原代培养的神经细胞凋亡,且粒径能够影响细胞凋亡率。     

亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆能力及大脑皮质β-淀粉样蛋白表达的影响

目的研究铝对大鼠学习记忆能力及脑组织β-淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响。方法选用健康清洁级雄性(SD)大鼠32只,按体质量随机分为4组,即对照组,麦芽酚铝[Al(mal)3]0.27,0.54,1.08mg/kg染毒组,每组8只,采用亚慢性腹腔注射方式染毒60d。采用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠大脑皮质Aβ蛋白表达。结果 Morris水迷宫结果显示,亚慢性铝暴露可导致大鼠潜伏期和找到平台的时间逐渐延长,1.08mg/kg染毒组潜伏期与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),0.54,1.08mg/kg染毒组找到平台的时间与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。随染毒剂量的增加,0.54,1.08mg/kg染毒组大脑皮质Aβ40明显减少,各染毒组Aβ42显著升高,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论铝对大鼠学习记忆能力具有明显损伤作用,其机制可能与脑内Aβ42生成增多有关。     

麦芽酚铝对大鼠学习记忆能力影响

目的 探讨麦芽酚铝[Al(mal)3]的神经毒性.方法 经行为学筛选后,40只雄性SD大鼠按体重随机分为5组,对照组、麦芽酚组、Al(mal)30.27、0.54、1.08 mg/kg染毒组,采用亚慢性腹腔注射方式染毒60d.通过水迷宫实验、跳台试验测定大鼠神经行为学改变,石墨炉原子吸收光谱法测定大鼠脑皮质铝含量.结果 亚慢性腹腔注射Al(mal)3染毒可导致大鼠morris水迷宫实验潜伏期逐渐延长,穿越原平台位置次数明显减少(P ＜0.05);Al(mal)3染毒组潜伏期明显缩短,错误次数1和错误次数2明显增加,与对照组、麦芽酚组比较,差异具有统计学意义(P ＜0.05);Al(mal)3 0.27、0.54、1.08 mg/kg染毒组脑皮质铝含量分别为(43.16±1.54)、(53.38±3.85)、(89.20±14.45) ng/g,与对照组和麦芽酚组脑皮质铝含量(19.50±4.12)、(21.63±4.05) ng/g比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 亚慢性Al(mal)3染毒对大鼠神经系统有损伤作用.     

麦芽酚铝暴露对大鼠神经行为的影响

目的 探讨麦芽酚铝暴露对大鼠神经行为的影响.方法 将40只健康清洁级雄性SD大鼠按体重随机分为随机分成5组,分别为对照(生理盐水)组、麦芽酚组(20 mmol/L)和低(10 mmol/L)、中(20 mmol/L)、高(40mmol/L)剂量麦芽酚铝染毒组,每组8只.采用腹腔注射方式对大鼠进行染毒,染毒容量为1 ml...     

亚慢性铝暴露对大鼠认知能力及大脑皮质β-分泌酶-1表达的影响

目的研究铝对大鼠认知能力及大脑皮质β-分泌酶-1(BACE1)蛋白表达的影响。方法健康清洁级SD大鼠32只,按体质量随机分成4组:对照组,0.27、0.54、1.08mg/kg麦芽酚铝染毒组,每组8只,采用腹腔注射方式染毒60d。采用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用ELISA法测定大鼠皮质BACE1蛋白表达。结果 Morris水迷宫结果显示,亚慢性铝暴露可导致大鼠游泳距离逐渐延长,而在原平台象限游泳时间则明显缩短,与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);随染毒剂量的增加,0.54、1.08mg/kg染毒组大脑皮质BACE1含量显著升高,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论铝可能通过使大鼠大脑皮质BACE1表达增多而导致其认知能力受损。     

铝对PC12细胞淀粉样前体蛋白β位点裂解酶-1蛋白及基因表达的影响

[目的]探讨铝对PC12细胞淀粉样前体蛋白（APP）β位点裂解酶-1（beta-site amyloid precursor proteincleaving enzyme-1,BACE1）蛋白及基因表达的影响。[方法]采用PC12细胞进行培养及麦芽酚铝[Al（mal）3]染毒,将细胞分为6组,分别为：200μmol/L生理盐水组;0、50、100、200和400μmol/L Al（mal）3组。分别采用酶联免疫吸附测定法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、荧光实时定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chainreaction,qRT-PCR）于染毒12、24和48 h后测定BACE1蛋白含量及基因表达。[结果]细胞计数试剂盒-8（CCK-8）细胞活力测定结果显示,不同浓度Al（mal）3染毒PC12细胞,可使其细胞活力呈现随染毒时间延长而逐渐下降的趋势。qRT-PCR结果显示,100μmol/L Al（mal）3组在染毒48 h后BACE1基因表达明显高于生理盐水组、0μmol/L Al（mal）3组,差异有统计学意义（P〈0.05）;200、400μmol/L Al（mal）3组染毒12、24、48 h后BACE1基因表达明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。ELISA测定结果显示,染毒12 h后400μmol/L Al（mal）3组BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;染毒24 h后200、400μmol/L Al（mal）3组BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异有统计学意义（P〈0.05）;染毒48h后400μmol/L Al（mal）3组的BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al（mal）3组,差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]Al（mal）3对PC12细胞具有明显毒性作用,该作用可能与麦芽酚铝致PC12细胞BACE1蛋白和基因表达增强有关。     

亚慢性铝暴露对大鼠大脑皮质中β-位点切割酶1 mRNA和蛋白表达及活力的影响

目的 探讨铝暴露对大鼠大脑皮质中β-位点切割酶1 (beta-site APP cleaving enzyme1,BACE1 )mRNA、蛋白表达及活力的影响.方法 将16只健康清洁级雄性SD大鼠按体重随机分成4组,分别为对照(生理盐水)组和低(0.27 mg/kg)、中(0.54 mg/kg)、高(1.08 mg/kg)剂量麦芽酚铝染毒组,每组4只.采用腹腔注射方式进行染毒,染毒容量为1 ml/kg,连续染毒60 d.测定大鼠大脑皮质中的BACE1 mRNA、蛋白表达及活力.结果 0.54、1.08 mg/kg麦芽酚铝染毒组BACE1 mRNA和蛋白表达及活力均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).且随着麦芽酚铝染毒剂量的升高,大鼠皮质BACE1 mRNA和蛋白表达及活力呈上升趋势.结论 铝暴露可导致大鼠大脑皮质BACE1 mRNA、蛋白表达和活力升高.