腹腔镜联合手术临床应用分析

目的探讨腹腔镜联合手术的临床应用价值。方法回顾分析35例腹腔镜联合手术的临床资料。结果35例腹腔镜联合手术全部获得成功,无手术并发症。结论腹腔镜联合手术能将多种腹腔疾病同时处理,创伤小,痛苦轻,住院时间短,恢复快,经济实用,能充分体现微创外科手术的优越性。     

清热消肿膏配合西药治疗丹毒疗效观察

目的:观察清热消肿膏配合西药治疗丹毒的疗效。方法:治疗组66例用清热消肿膏配合青霉素治疗,对照组38例单用青霉素治疗,比较两组疗效。结果:治疗组总有效率100%,对照组总有效率89.5%,两组比较有显著性差异(P<0.05)。治疗组发热、患肢红肿热痛症状的消失时间明显优于对照组。结论:清热消肿膏配合青霉素治疗丹毒有效而安全。     

脐血和骨髓来源的CD34^＋细胞体外扩增巨核祖细胞差异的研究

本研究探讨脐血（CB）和骨髓（BM）来源的CD34^＋细胞体外扩增巨核祖细胞的差异。采用Ficoll—Hypaque分离法分离人CB及BM单个核细胞，免疫磁珠法制备CD34^＋细胞，在含血小板生成素（TPO）、TPO＋白介素11（IL—11）或TPO＋IL11＋肝素的无血清液体培养体系中培养14天。流式细胞术检测扩增产物（CD34^＋、CD41a^＋及CD34^＋CD41a^＋细胞）免疫表型、巨核细胞凋亡率及DNA含量，并以集落形成单位测定法进行粒巨-噬细胞集落形成单位（CFU—GM）、红系爆式集落形成单位（BFU—E）及巨核细胞集落形成单位（CFU—Mk）计数。结果表明：14天培养中，CB来源细胞在总细胞数、CD41a^＋及CD34^＋CD41a^＋细胞扩增倍数上均高于BM（P均〈0．05）。0天CB及BM来源CD34^＋细胞在CFU—GM、BFU—E及总的CFU—Mk的形成能力上无显著性差异（P均〉0．05），但CB来源CD34^＋细胞形成的CFU—Mk以大集落为主，其数量高于BM（P〈0．05）；在培养7、10和14天，CB及BM来源细胞CFU—GM扩增倍数无显著性差异（P均〉0．05），但CB来源细胞的BFU—E及总的CFU—Mk扩增倍数均高于BM（P均〈0．05）。14天培养中CB和BM来源巨核细胞的凋亡率无显著性差异（P均〉0．05）。DNA含量检测发现，14天培养中CB来源巨核细胞始终以2N细胞为主（比例〉90％），而BM来源巨核细胞随着培养时间延长，4N、8N及以上倍体巨核细胞比例逐渐增加。结论：CB来源CD34^＋细胞体外扩增巨核祖细胞能力高于BM，它可能是巨核祖细胞体外扩增较好的来源。     

经鼻持续气道正压通气治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者行经鼻持续气道正压通气（nCPAP）治疗后的效果及压力滴定变化。方法选择30例经多导睡眠监测确诊中重度OSAHS并愿意行家庭长程nCPAP治疗的患者,行多导睡眠监测（PSG）及初始压力滴定,于家庭治疗3、6个月后随访,比较治疗后体重指数（BMI）、Epworth嗜睡评分、睡眠呼吸紊乱指数（AHI）、最大氧减饱和度及压力滴定结果。结果28例完成本研究的患者,经有效nCPAP治疗后,AHI3个月（2．3±1．6）次／h及6个月（1．84-1．9）次／h时,较治疗前（484-18）次／h明显下降（P〈0．05）;BMI3个月（32±6）kg／m^2,6个月（30±4）kg／m^2,较治疗前（33±5）kg／m^2相比均有下降,其中6个月时较治疗前相比差异有统计学意义,（P〈0．05）;Epworth嗜睡评分,3个月（3．8±1．4）分,6个月（3．1±1．6）分,较治疗前（13．6±3．8）分相比,均明显下降（P〈0．05）,最大氧减饱和度3个月（4．2±2．8）％,6个月（1．8±1．7）％较治疗前（28±12）％相比均明显下降,（P〈0．05）;压力滴定值,3个月（10．2±1．5）cmH20,6个月（9．8±1．3）cmH2O,较治疗前（12．5±2．2）CnlH2O相比呈下降趋势,（P〈0.05）。结论家庭长程nCPAP治疗是OSAHS有效治疗方法,但随着治疗时间的推移．nCPAP压力逐渐下降．有必要在随访过程中行压力再滴定。     

脐血CD34^＋细胞体外扩增脐血巨核祖细胞的研究

本研究探讨人脐血CD34^＋细胞体外扩增的巨核祖细胞的生物学特性及其免疫原性变化，为体外扩增脐血巨核祖细胞的临床应用提供实验依据。采用Ficoll-Hapaque分离法分离人脐血单个核细胞，应用免疫磁珠法（MACS）再分离富集CD34^＋细胞，在含血小板生成素（TPO，50ng／ml）、白介素-1]（IL—11，50ng／ml）和肝素（25U／ml）的无血清液体培养体系中培养14天。用流式细胞术检测扩增产物免疫表型（CD34^＋、CD41a^＋、CD61^＋、CD34^＋CD41a^＋及CD34^＋CD61^＋）、巨核细胞凋亡率及其表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子的表达，并进行巨核细胞集落形成单位（CFU—Mk）的检测。结果显示：脐血CD34^＋细胞能够有效地向巨核细胞分化，CD41a^＋和CD61^＋细胞比例在培养第14天达到峰值，CD34^＋CD41^＋和CD34^＋CD61^＋细胞比例在扩增第7天达到最高峰[分别为（3．41±2．80）％和（1．89±1．43）％]；CFU—Mk大集落在扩增第7天达到高峰（（20．66±32．79）倍]，小集落在扩增第10天达到高峰[（435．62±482．65）倍]；在培养7、10和14天时巨核细胞的凋亡率分别为（19．48±9．64）％、（26．87±9．03）％和（52．46±11．74）％，其中培养7天和10天的凋亡率无显著性差异（P〉0．05），培养14天的凋亡率显著高于7天和10天（P均〈0．05）；巨核细胞表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子的表达随着扩增天数的延长逐渐降低，其中培养0到10天阶段下降明显．结论：采用TPO＋IL 11＋肝素组合．可以有效地扩增脐血巨核祖细胞；培养7天，CFU—Mk大集落扩增倍数、CD34^＋CD41^＋和CD34^＋CD61^＋细胞比例均达高峰，这是巨核祖细胞体外扩增的较佳培养时间。     

细胞凋亡在放射医学领域的研究进展

细胞凋亡的研究日益引起人们的关注，成为近年生物学科的研究热点。随着分子生物学向放射医学领域的渗透，使对辐射诱发细胞凋亡现象的认识达到一个新的高度。长期以来，放射生物学者按死亡出现的时间将细胞死亡分为间期死亡和增殖死亡。近年来KerrJ等学者用细胞凋亡来描述具有一系列特征性形态变化的细胞死亡过程，细胞凋亡是在一系列相关基因参与下发生的生化级联反应的结果。ICE基因在哺乳类细胞凋亡过程中起着重要作用，目前已发现ICE／Ced-3半胱氨酸蛋白酶家族成员包括：ICE，ICErel－Ⅱ，ICErel-Ⅲ，Nedd2／Ich-1，Tx／Ich－…     

心肺功能综合评定对优秀径类运动员选才及训练的指导作用

对我国34名优秀径类运动员(男23,女11)进行递增式踏车试验,连续观察(?)E,气促指数,心率,心搏效率,氧脉,(?)O_2max,无氧阈((?)E/(?)O_2,(?)CO_2/(?)O_2曲线的拐点),结果显示,我国男子中长跑运动员(?)O_2显著低于世界水平,而女子长跑运动员则接近于世界水平。综合心肺功能评定可以发现运动员心肺或肌肉功能薄弱环节,为青少年选材提供依据,并可用于评价训练效果。     

加热诱导小鼠L5178Y细胞间期死亡的细胞周期依赖性

实验选用小鼠L5178Y淋巴细胞,在Fischer's培养基中37℃悬浮培养,分别水浴加热至42℃、43℃和44℃,并与照射细胞(6Gy)比较,观察同步细胞各时相及非同步细胞的集落计数,结合伊红染色,测定细胞存活分数;以~3H-TdR掺入测定细胞内核素溢露,说明膜的完整性被破坏;观察膜的形态改变说明细胞死亡模式;并以流式细胞计测定细胞DNA含量.结果如下:同步化细胞热效应,加热组;44℃15分加热后,M期细胞存活最低,热敏感性最高,此后存活分数逐渐升高,G_1期达最大值,继之逐渐下降直     

突变型人胰岛素原基因的克隆及其腺病毒载体的构建

目的:构建含有定点突变的人胰岛素原基因的腺病毒表达载体.方法:首先利用RT-PCR方法从正常流产胎儿胰腺组织获取野生型人胰岛素原eDNA;然后通过重叠延伸PCR方法在人胰岛素原cDNA上产生2个突变位点,使突变的eDNA编码的蛋白质含弗林蛋白酶的识别位点,该突变型胰岛素原cDNA片段命名为INS-M2;最后将INS-M2亚克隆至腺病毒载体系统的穿梭载体的多克隆位点上,并与骨架载体共转染至细菌内,通过细菌内同源重组得到重组载体.结果:HindⅢ和Xho I酶切、Poc I酶切及测序均证实载体pAd-INS-M2构建成功.结论:构建的含定点突变人胰岛素原基因腺病毒载体pAd-INS-M2为进一步转染非胰岛β细胞,对糖尿病进行基因治疗奠定了基础.     

成年大鼠破骨细胞体外培养及细胞凋亡的观察

目的　为研究骨重建过程中破骨细胞的关键作用,建立成年大鼠（１２ ～５０ 周龄） 破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。方法　大鼠处死后,在无菌条件下取出股骨,剪去两骺端,以αＭＥＭ 将骨髓细胞冲洗出, 并离心洗细胞２ 次,置于αＭＥＭ 培养液,内含αＭＥＭ,体积分数为１０％ 的胎牛血清（ＦＣＳ） 和１α,２５（ＯＨ）２ Ｖｉｔ Ｄ３ １０ －８ ｍｏｌ／Ｌ,在２４ 孔板内,以体积分数为５ ％ 的ＣＯ２ ,３７ ℃,培养８ 天。按原位ＤＮＡ 末端标记（ＴＵＮＥＬ）检测试剂盒方法染色细胞,以荧光显微镜观察细胞凋亡。结果　经活体观察、ＨＥ染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（ＴＲＡＰ） 染色,光学显微镜、扫描电镜观察骨片之陷窝的形成,证实培养的细胞为破骨细胞;ＴＵＮＥＬ 检测,荧光显微镜下可见破骨细胞核染色质浓缩、裂解等凋亡细胞的典型变化与未凋亡的破骨细胞。结论　本实验建立了成年大鼠破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。