基质金属蛋白酶及其基质金属蛋白酶组织抑制剂与肾脏疾病

纤维化的基本特征为细胞外基质(ECM)的过度沉积。目前认为纤维化是由于ECM合成增加和降解受抑制的综合结果。细胞外基质的合成与降解受多种因素的影响,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMPs的平衡是降解过程中主要调节因素。目前MMPs/TIMPs在器官纤维中的作用日益受到重视。本文拟就MMPs,TIMPs与肾脏疾病的关系综述如下。     

C—MYC蛋白的结构功能区域

ｃ-ｍｙｃ是首先在鸟类髓细胞性白血病病毒中被证实的具有转化作用的癌基因ｖ -ｍｙｃ的细胞基因同源物 ,其转录产物ｃ -ｍｙｃ蛋白的功能甚多。近年来研究认为 ,ｃ -ｍｙｃ蛋白是一个与细胞增殖和分化调控密切相关的转录因子[1] ,其功能与蛋白分子的结构功能区域密不可分。1　ｃ -ｍｙｃ蛋白的基本结构ｃ-ｍｙｃ蛋白的氨基端 (Ｎ端 )的 143个氨基酸组成转录激活区 (ＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎＡｃｔｉｖａｔｉｏｎＤｏｍａｉｎ ,ＴＡＤ) ,是ｃ -ｍｙｃ蛋白激活基因表达和转化的必需区域。中部为酸性区 (ａｃｉｄｉｃｒｅｇｉｏｎ)、非特异…     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的 探讨矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)是否通过影响肺成纤维细胞(FB)基质金属蛋白酶(MMPs)/金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)系统参与矽肺纤维化的发生发展。方法 收集矽肺患者AM培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48 h,用免疫细胞化学的方法检测FB中MMP-1和TIMP-1的表达。结果 未经SiO2刺激的矽肺患者AM培养上清作用于FB 24 h,FB中MMP-1的表达较空白对照组减少(积分光密度值分别为0.103±0.014、0.133±0.023),TIMP-1的表达增多(积分光密度值分别为0.108±0.012、0.065±0.006);经SiO2刺激24 h的矽肺患者AM培养上清作用于FB后,FB中MMP-1的表达量进一步减少(积分光密度值分别为0.062±0.008、0.133±0.023),而TIMP-1的表达量进一步增加(积分光密度值分别为0.143±0.015、0.065±0.006)。结论 SiO2可能通过AM的介导影响了FB中MMP-1/TIMP-1系统的表达,参与了肺纤维化的形成。     

矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清对人胚肺成纤维细胞c-myc基因表达的影响

目的 探讨矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)培养上清对人胚肺成纤维细胞(HEFB)c-myc基因表达的影响.方法 AM分为加尘组(SiO2,30μg/ml)和对照组,培养1、2、6、12、24和36 h,收集培养上清.Ⅲ代HEFB用质量分数为0.5%的血清培养液培养48 h使大部分细胞处于静止期后,加人SiO2刺激6 h的AM培养上清(S6组),用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法观察c-mycmRNA和蛋白的时程变化.然后将各组AM上清与静止状态的HEFB孵育2和7 h,观察c-myc mRNA和蛋白表达的变化.结果 HEFB在静止状态时c-myc mRNA和蛋白的表达为0,在对照组中,培养不同时间的AM上清刺激了c-myc mRNA及蛋白的表达,以AM培养12 h的卜清作用最明显,比值分别为0.749±0.088和0.759±0.101.加尘组中各上清也刺激了c-myc mRNA和蛋白的表达,但作用高峰提前,以SiO2刺激6 h的上清作用最明显,比值分别0.982±0.147和0.978±0.141.与同期对照相比,SiO2刺激1、2和6 h的AM上清诱导mRNA和蛋白表达增多,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 SiO2激活的AM培养上清可促进HEFB c-myc基因的表达.     

肝细胞的超微结构、功能与临床联系(续)

三、肝细胞内质网在药物代谢中的作用许多脂溶性药物,在体内通过肾小球滤过膜,经扩散作用透过肾小管上皮细胞又重被吸收。为使之迅速排泄,机体必须把这些无极性的脂溶性化合物转变为极性水溶性物质,使之在生理 pH 下易于解离,不与血浆白蛋白及组织蛋白相结合。亦不贮存在脂肪中,并失去透过细胞膜的能力,便于经胆汁或肾脏排泄。大多数情况下这种转化作用可导致药物灭活。某些药物生物转化过程所涉及的酶系统位于肝细胞内质网或其它组织中。如将肝细胞制成匀浆,经过超速离心,可把内质网部分分离出来,称为微粒     

SiO2对大鼠肺泡巨噬细胞原癌基因c-sis表达影响的体外研究

目的　探讨SiO2 对大鼠肺泡巨噬细胞原癌基因c sis表达的影响以期进一步了解原癌基因c sis在矽肺发病中的作用。方法　采用支气管肺泡灌洗方法获得肺泡巨噬细胞 (alveolarmacrophage ,AM)。体外予SiO2 对AM进行不同时间的处理 ,利用RT PCR方法检测c sismRNA表达 ,结果用计算机自动分析系统进行定量分析。结果　AM中c sis在SiO2 处理后存在高表达 ,处理时间不同其表达量也不同 ,3 0min即有表达 ,1h表达达高峰 ,以后随处理时间的延长表达量逐渐下降 ,各时间点结果与不加SiO2 处理的同期对照组相比差异均有显著性 (P <0 0 1)。结论　SiO2 可诱导AM原癌基因c sis出现高表达 ,提示原癌基因c sis可能参与矽肺纤维化早期的形成。     

氧自由基检测技术的研究进展

在与自由基氧化损伤有关的疾病发病机制和抗氧化防治研究工作中，经常需要对自由基水平进行测定。自由基活性强、半衰期短、生物体内浓度低，因此生物样品中自由基的测定比较困难。但根据某种自由基的化学性质和生物效应以及研究者的不同目的，目前已建立了多种测定方法，各有其适用性和优缺点，应根据需要进行选择和改进。l自由基的基本概念11自由基的定义自由基（freera山caf）或称游离基（ra山一caf）是指具有未配对价电子（即外层轨道中具有奇数电子）的原子、原子团或分子。如H·，CL·（原子）；OH·，RO·，ROO·（原子团）；NO…     

缺血预适应在大鼠肢体缺血再灌注后胃黏膜损伤中的作用

背景:肢体缺血再灌注作为应激原而引起胃黏膜损伤,导致应激性溃疡的发生。目的:观察肢体缺血再灌注对胃黏膜的损伤,了解肢体缺血再灌注对胃黏膜损伤的作用及其部分机制,以及短暂多次肢体缺血在胃黏膜损伤发生中的作用。设计:随机分组设计、对照动物实验。单位:华北煤炭医学院病理生理学教研室。材料:实验于2002-01/06在华北煤炭医学院病理生理学实验室完成。选择健康成年的雄性Wistar大鼠54只随机数字表法分为3组,每组18只。缺血再灌注组:按Rosenthal方法复制模型,乙醚浅麻醉下以橡皮带环绕结扎大鼠双后肢根部,阻断血流4h后松解,恢复血流灌注4h后自腹主动脉放血处死。缺血预适应组:如上法预先阻断双后肢血流5min,然后恢复血流灌注5min,反复4次,其后操作同缺血再灌注组。对照组:操作同缺血再灌注组,但松弛结扎双后肢,不阻断血流。方法:取各组胃黏膜制作切片于光学显微镜和电子显微镜下进行观察,按Guth标准测定各组胃黏膜损伤指数,在721型分光光度计上于650nm波长比色,计算胃结合黏液量,同时测定胃黏膜血流量、胃黏液中磷脂、氨基己糖的含量、血浆和胃组织一氧化氮含量及胃黏膜一氧化氮合酶活性。主要观察指标:胃黏膜损伤指数、胃结合黏液量、胃黏膜血流量、胃黏液中磷脂、氨基己糖的含量、血浆和胃组织一氧化氮含量及胃黏膜一氧化氮合酶活性。结果:纳入动物54只,均进入结果分析。①缺血再灌注组大鼠胃黏膜损伤严重,光镜下可见黏膜腺体水肿、充血,糜烂、解体,在黏膜基底部及黏膜下层可见炎细胞浸润,即溃疡形成。缺血预适应组胃黏膜较完整,损伤程度较缺血再灌注组轻;电镜下缺血再灌注组胃壁细胞、主细胞细胞器结构不完整,遭到破坏。同样缺血预适应组各类细胞损伤轻于缺血再灌注组[损伤指数分别为18.00±10.71,34.00±15.01,P<0.01]。②缺血再灌注组和缺血预适应组大鼠胃黏膜血流量及胃结合黏液量、胃黏液中磷脂、氨基己糖的含量均明显低于对照组[分别为(2.12±0.56),(10.84±2.56),(25.52±2.97)mL/(kg·h);(2.01±0.91),(2.79±0.73),(3.99±0.87)mg;(7.68±1.95),(9.74±1.04),(11.98±1.98)mg/g;(3.83±1.18),(5.42±0.47),(5.76±1.21)mg/g,P<0.05,0.01]。缺血预适应组胃黏膜血流量及胃结合黏液量、胃黏液中磷脂、氨基己糖的含量均高于缺血再灌注组。③缺血再灌注组和缺血预适应组血浆与胃黏膜组织一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性显著高于对照组[分别为(250.0±5.6),(270.0±11.3),(210.0±7.4)μmol/L;(9.34±0.67),(11.34±1.00),(7.50±0.67)μkat/g,P<0.01],缺血预适应组血浆与胃黏膜组织一氧化氮含量和胃黏膜的一氧化氮合酶活性又显著高于缺血再灌注组。结论:肢体缺血再灌注作为应激原可导致胃黏膜损伤,引起应激性溃疡;缺血预适应可减轻肢体缺血再灌注后的胃黏膜损伤。     

抗利尿激素的作用与临床

抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)也称[后叶]加压素(vasopressin),为小分子肽激素,人ADH与催产素结构相似,仅相差两个氨基酸。目前能合成的后叶肽激素有很多种。精氨酸加压素的结构为:胱—酪—苯丙—谷—天冬—胱—脯—精—甘—NH_2。 近年来应用免疫细胞化学方法已证明ADH和催产素分别由两种神经元合成。AD-H神经元胞体位于下丘脑视上核、室旁核、视上——室旁核间小岛、视交叉上核。电镜下     

MMP-9、TIMP-1在阿霉素肾病大鼠肾小管间质病变中的表达

目的 :研究 MMP- 9及 TIMP- 1在大鼠阿霉素肾病肾小管间质病变中的表达变化及意义。方法 :采用大鼠尾静脉单剂量注射阿霉素 7.5 mg/kg建立阿霉素肾病模型 ,雄性 Wistar大鼠 64只 ,分为正常对照组、阿霉素肾病组。于 7、 1 4、2 8、5 6d四个时间点依次各处死 8只大鼠留取标本。光镜下观察肾小管间质形态学改变 ,生物化学方法检测血清肌酐、胆固醇、白蛋白 ,2 4 h尿蛋白定量 ,免疫组织化学检测肾组织 MMP- 9、TIMP- 1、 型胶原的表达。结果 :阿霉素肾病组大鼠肾小管间质损害明显 ,肾小管上皮细胞 MMP- 9的表达明显上调 ,于第 1 4天达高峰。肾小管的 TIMP- 1的表达上调 ,第 2 8、5 6天与同期对照组相比差异显著。肾小管上皮细胞 TIMP- 1的表达与肾组织 型胶原表达呈正相关 ;MMP- 9/TIMP- 1比值 型胶原表达呈负相关。结论 :阿霉素肾病组大鼠肾小管 MMP- 9、TIMP- 1的表达上调 ,MMP- 9/TIMP- 1的失衡可能参与肾小管间质纤维化的发生发展过程