高效抗逆转录病毒治疗对HBV/HIV共感染者HBV耐药基因突变影响的研究

目的了解高效抗逆转录病毒治疗(HAART)对HBV/HIV共感染者HBV耐药突变情况。方法收集123例未进行HAART的HBV/HIV共感染者(组1)和80例已接受HAART的HBV/HIV共感染者(组2)血清标本及其临床资料。对所有血清标本HBV DNA聚合酶基因进行巢式PCR扩增,对扩增产物进行电泳分析和测序,并构建基因进化树,通过单因素及多因素logistic回归模型分析耐药突变相关因素。结果有86例HBV DNA成功扩增并测序(组1有69例,组2有17例);组2耐药突变率(76.5%,95%CI:56.3%—96.7%)显著高于组1(1.4%,95%CI:-1.4%—4.2%),差异有统计学意义(χ~2=50.955,P0.05)。两组患者中,耐拉米夫定的主要耐药突变形式是rtL180M+rtM204I+rtL80I(35.7%,95%CI:10.6%—60.8%);耐恩替卡韦的主要耐药突变形式是rtM204V+rtL180M(71.4%,95%CI:47.7%—95.1%);未发现替诺福韦酯耐药突变。组2有5例(6.3%)HBV病毒载量超过10×106拷贝/m L;其中1例治疗方案里含替诺福韦酯且已治疗4年。多因素Logistic回归分析发现,HAART是唯一与耐药突变发生有关的因素(P=0.000 1,OR=195.757,95%CI:14.14—2711.00)。结论抗HIV治疗可导致HBV/HIV共感染者HBV耐药突变率增高,在HAART治疗方案中替诺福韦酯不能完全抑制HBV复制。     

广西那坡县发现乙肝病毒新基因亚型D11

目的 2011年,在广西那坡县发现一例HBsAg阳性携带者,其所携带的HBV利用S基因序列分型法无法分型,本研究意在用全基因组分型法对其进行分型。方法为便于前后对比,除2011年血清标本外,还收集该携带者2018年的血清标本。检测前后2份标本HBV血清标志物和病毒载量,使用酚氯仿法提取HBV DNA,巢式PCR扩增HBV全基因组,将扩增产物进行克隆并测序。利用软件Mega 6.0、 Bioedit 7.0对测序结果进行分析。结果 2011年和2018年的2份标本HBsAg均为阳性, 2份标本的PCR产物分别获得15个克隆株。对获得的克隆株进行生物信息学分析发现, 2011年该携带者体内乙肝病毒基因型为B型、 D型以及未知基因型; 2018年该携带者体内乙肝病毒基因型仅为D型。30个克隆株中有23个单独聚集成簇, bootstrap值为100%,与D1-D10亚型间核苷酸的差异4%。结论该携带者体内的HBV基因型为新基因亚型D11。     

广西灵山县2~6岁儿童乙肝疫苗免疫效果观察

目的 了解广西灵山县2~6岁儿童乙肝疫苗免疫效果,为乙肝病毒（HBV）高流行区乙肝防控提供依据。方法 2016年12月,按照横断面调查研究原理,用整群抽样的方法选取灵山县2~6岁儿童为研究对象,采用问卷调查并采集静脉血3~5 mL,用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测HBV血清学标记物。结果 调查了1 594名儿童,乙肝疫苗免疫覆盖率为100%;5岁以下儿童HBsAg标准化阳性率为0.17%（3/832,95%CI：-0.11~0.45）;抗-HBs标准化阳性率为68.98%（95%CI：66.71~71.25）;HBeAg 和抗-HBe 标准化阳性率分别为0.16%（95%CI：-0.04~0.36）和0.38%（95%CI：0.08~0.68）;抗-HBc 标准化阳性率为43.97%（95%CI：41.53~46.41）。不同年龄组间抗-HBs阳性率差异有统计学意义（P<0.001）,且随着年龄增长而呈下降的趋势（P<0.001）。非条件多因素Logistic回归模型分析结果显示,年龄、城乡分布、低出生体重和分娩医院级别与抗-HBs阳性率有关,加强免疫与低龄儿童抗-HBs阳性率无关。3名HBsAg持续阳性儿童的母亲产检检测HBsAg阳性。结论 广西灵山县达到全国乙型病毒性肝炎防治规划的目标 （<1%）;已经完成乙肝疫苗全程基础免疫的学龄前儿童没必要进行乙肝疫苗加强免疫。     

血清miR-483-5p是感染HBV基本核心启动子双突变(A1762T,G1764A)株人群潜在肝癌高危标记物

目的探索同为感染HBV基本核心启动子(BCP)双突变病毒株的肝细胞癌(HCC)患者和HBs Ag无症状携带者血清中差异表达的miRNA。方法采用病例对照研究方法,分初筛阶段(miRNA测序)和验证阶段(q RTPCR),筛选组间差异表达的miRNA。初筛阶段招募HCC病例组18人,HBs Ag无症状携带者对照组25人;验证阶段招募200名研究对象,包括1个病例组(39人)和4个对照组(161人)。结果初筛阶段共发现58条差异表达的miRNA,包括39条已知的miRNA和19条新的miRNA。选择7条与肝脏疾病有关的miRNA进行验证,结果发现3条miRNA得到证实。miR-483-5p的ROC曲线下面积(AUC)有最大值(0.815,95%CI:0.750~0.880),若将诊断肝癌阈值设为6.7,其敏感性、特异性分别为89.5%、61.1%;将AFP诊断肝癌阈值设在20.8 ng/m L,AFP的敏感性、特异性分别为61.5%、92.0%。miR-483-5p的表达水平在感染HBV BCP双突变病毒株的无症状携带者组与HBs Ag阴性组间的差异没有统计学意义,但在感染BCP双突变病毒株的无症状携带者组与HCC患者组之间差异有统计学意义(P0.05)。结论将miR-483-5p与AFP联合使用可提高AFP诊断HCC的敏感性。miR-483-5p可能作为进一步缩小用标记物BCP双突变筛查出来作为肝癌监测的高危人群范围的标记物。