PI3K-AKT信号通路对人肝癌Huh-7细胞乳酸和乙酰化修饰水平及细胞生长的影响

目的:探讨PI3K/Akt信号通路对人肝细胞癌Huh-7细胞乙酰化及糖酵解的影响及机制?方法:体外培养Huh-7细胞株,应用不同浓度的PI3K/Akt抑制剂LY294002与mTOR抑制剂雷帕霉素分别进行干预;乳酸试剂盒法检测乳酸水平;Western blot法检测肿瘤细胞中三磷酸腺苷柠檬酸盐裂解酶(adenosine triphosphate-citrate lyase,ACL)表达水平与乙酰化修饰水平;WST法检测细胞增殖水平?结果:①LY294002干预组的乳酸水平低于DMSO对照组,下降66.15%,细胞内ACL的表达水平下降20.84%,乙酰化水平在多位点表达水平下降(P < 0.01,n = 3);②雷帕霉素干预组的乳酸水平低于DMSO对照组,下降90.16%,细胞内ACL的表达水平下降64.16%,乙酰化水平在多个位点表现出不同水平的下降(P < 0.01,n = 3);③以DMSO干预作为对照,20 mmol/L的LY294002和20 μg/L的雷帕霉素分别作用24 h后,对Huh-7细胞的增殖抑制率分别为24.78%和20.67%(P < 0.01,n = 3)?结论:Huh-7细胞中活化的PI3K/Akt/mTOR信号通路能通过提高ACL的表达,上调细胞内乙酰化的修饰水平,从而增加肿瘤细胞的糖酵解,促进肿瘤细胞的生长?     

2型糖尿病患者血清PCSK9与动脉粥样硬化指标的相关性分析

目的:研究2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin 9,PCSK9)与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)指标的相关性?方法:对351例T2DM患者进行病史采集?颈部及下肢血管彩色多普勒检查,测定其PCSK9水平?结果:T2DM合并AS组患者的血清PCSK9水平高于T2DM无AS组(P < 0.05),血清PCSK9水平与T2DM患者的颈总动脉内中膜厚度(carotid artery intima-media thickness,CIMT)呈正相关(P < 0.01),与右侧颈总动脉(RCCA)内径?RCCA峰值/次峰值(PI)?右侧颈内动脉(RICA)PI?左侧颈总动脉(LCCA)PI?左侧颈内动脉(LICA) PI?RICA 阻力指数(RI)?LCCA RI等颈动脉粥样硬化相关性指标呈正相关(P < 0.05),而与RCCAVmax?RCCA Vmin?RCCA Tamx等指标呈负相关(P < 0.05)?结论:T2DM患者血清PCSK9水平与评估AS程度的指标密切相关,可能成为临床预测及评估T2DM患者AS相关大血管疾病发生风险的指标?     

总胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇比值与肝脏脂肪变的相关性研究

目的：探讨总胆固醇（total cholesterol,TC）与高密度脂蛋白胆固醇（high?density lipoprotein cholesterol,HDL?C）比值（TC/HDL?C）与肥胖患者肝脏脂肪变病理分级之间的关系。方法：选取2018—2019年在南京医科大学第一附属医院进行减重外科手术,且经腹部B超检查诊断为非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）的肥胖住院患者98例为研究对象,测量其身高、体重、血压,空腹取血行肝肾功能、血脂、血糖等相关指标检查。按照肝脏脂肪变病理分级结果将其分为轻、中、重3组;用Spearman相关性分析及Logistic回归模型分析TC/HDL?C等相关指标与脂肪变病理分级间的关系。结果：①中、重度脂肪肝患者的TC/HDL?C、低密度脂蛋白胆固醇、体重指数、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶等均高于轻度脂肪肝患者（P＜0.05）,而中度与重度脂肪肝患者相比以上指标均无显著性差异;②Spearman 相关分析发现,TC/HDL?C与轻、中度脂肪肝患者的脂肪变严重程度、TC、甘油三酯等因素呈正相关（P＜0.05）,与HDL?C呈负相关（P＜0.05）;③Logistic 回归分析显示,轻中度脂肪肝患者TC/HDL?C与脂肪变病理分级有显著相关性（P < 0.05）。结论：肥胖伴中度脂肪变患者的TC/HDL?C高于轻度患者（P＜0.05）,且TC/HDL?C与肝脏脂肪变程度存在显著的相关性。     

IVGTT过程中血糖及胰岛素急遽波动对血清PCSK9水平的影响

目的：研究静脉葡萄糖耐量试验（intravenous glucose tolerance test，IVGTT）过程中血糖及胰岛素急遽波动对血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9（proprotein convertase subtilisin/kexin type 9，PCSK9）水平的影响，及其与机体糖脂代谢之间的潜在关联。方法：对23例健康志愿者及52例肥胖或糖代谢异常患者进行病史采集、人体测量学、肝肾功能等及IVGTT检查，根据PCSK9在静脉葡萄糖负荷后4 min与0 min时的比值界定下降组、稳定组与上升组，并比较3组在各项糖脂代谢指标间的差异。进一步对39例留取的血清样本使用高通量靶向脂质组学测定游离脂肪酸、神经酰胺及其代谢产物含量，比较上述各组的差异。结果：总体基线PCSK9水平与总胆固醇、空腹C肽水平经校正后存在正相关关系，但与空腹胰岛素水平无显著相关性。随着IVGTT过程中血糖升高导致胰岛素急遽上升，伴随血清PCSK9水平波动，血清PCSK9在60 min后基本恢复至基线水平。PCSK9下降组的基础PCSK9及空腹胰岛素水平显著高于稳定组与上升组，且PCSK9下降组糖尿病前期与糖尿病者占比更高。此外，下降组血清总神经酰胺、总葡糖神经酰胺水平也明显高于其他两组；脂质亚类分析显示，基线PCSK9含量与Cer d18：1/24：0、GM3 d18：0/24：0在校正其他因素后正相关性仍存在。结论：IVGTT过程中血糖升高导致胰岛素急遽上升，伴随血清PCSK9水平波动；波动模式受基线糖脂代谢状态影响。     

肥胖代谢状态与内脏脂肪免疫细胞的关联分析

目的：探究体重正常（lean）、肥胖代谢正常（metabolically healthy obesity,MHO）与肥胖代谢异常（metabolically unhealthy obesity,MUO）个体内脏脂肪组织（visceral adipose tissue,VAT）中免疫细胞占比差异。方法：内脏脂肪组织标本来源于南京医科大学第一附属医院因肥胖行代谢手术治疗的48例患者及体重和代谢指标正常但因其他非炎症性疾病（疝气、胆结石及肾囊肿等）行腹腔镜手术的11例患者。提取脂肪组织RNA,进行RNA-seq检测,根据RNA-seq结果统计分析3组间内脏脂肪免疫细胞构成比情况和差异基因表达情况,通过单因素方差分析及Pearson相关性分析等分析方法进行数据统计。结果：各组间调节性T细胞,激活的NK细胞及M0、M2型巨噬细胞占比存在差异,P值分别为0.031、0.002、0.004和0.024;与其他两组相比,MUO组M2型细胞占比下降（P=0.014）;两组肥胖患者的内脏脂肪中SPP1、CHIT1、ITGAX、CD300LB、IL1RN及DCSTAMP等基因与M0、M1型巨噬细胞占比呈正相...     

神经节苷脂 GM3在非酒精性脂肪肝炎小鼠肝脏中的表达变化

目的：探究高脂高糖饮食诱导的非酒精性脂肪肝炎（non?alcoholic steatohepatitis,NASH）小鼠模型较对照组肝脏内单唾液酸神经节苷脂 3（monosialodihexosylganglioside,GM3）等鞘糖脂的变化。方法：16只6周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组和模型组,每组8只,对照组喂普通饲料,正常饮水;模型组喂高脂饲料,含糖饮水（23.1 g/L蔗糖+18.9 g/L葡萄糖）。检测两组小鼠血清生化指标丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）,采用HE染色观察两组小鼠肝脏组织病理变化。使用Exion UPLC?QTRAP 6500 PLUS（Sciex）液质联用仪,以电喷雾电离（ESI）模式进行脂质组学分析。采用独立样本t检验、曼?惠特尼检验进行组间差异的统计学分析。结果：①高脂高糖饮食喂养7个月组小鼠较普通饲料喂养组ALT、AST水平显著升高（P < 0.05）。②模型组较对照组显著降低的指标有肝脏内总GM3（P=0.016）及GM3 d18：1/20：0（P=0.005）、GM3 d18：1/22：0（P=0.004）、GM3 d18：1/24：0（P=0.004）和GM3 d18：1/26：0（P=0.042）,总神经酰胺、总乳糖神经酰胺等显著升高（P < 0.05）。结论：高脂高糖饮食喂养的NASH模型小鼠肝脏中经乳糖神经酰胺向GM3转化的合成通路受阻。     

非酒精性脂肪性肝病临床病理学特征分析

目的探讨我国成人肥胖患者非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)的临床病理学特征, 为非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis, NASH)的诊断提供病理依据。方法选取南京医科大学第一附属医院2018年6月至2019年9月接受减容代谢手术同时进行肝活检且符合纳入条件的病例共262例, 行HE染色、网状纤维染色及Masson染色, 采用SPSS 20.0进行统计学分析。结果 262例患者年龄18～66岁, 男性65例(65/262, 24.8%), 女性197例(197/262, 75.2%), 其中NAFLD 201例(201/262, 76.7%), 非NAFLD 61例(61/262, 23.3%), NAFLD中包括非酒精性单纯性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver, NAFL)27例(27/201, 13.4%)、NASH 174例(174/201, 86.6%)。NAFLD的病变以肝腺泡3区为主, 非NAFLD组、NAFL组与NASH组在年龄、丙氨酸氨基转移酶、...