益气通络方对大鼠短暂性脑缺血后海马DND的保护作用

目的 :探讨益气通络方对大鼠短暂性脑缺血后海马迟发性神经元死亡 (DND)的保护作用及其机制。方法 :用Pulsinelli四血管闭塞法制作全脑缺血模型。实验动物随机分为假手术对照组、脑缺血加生理盐水组和脑缺血加益气通络方组。缺血再灌 3天后进行HE染色、TUNEL染色。结果 :①HE染色 ,光镜下观察CA1区组织病理学变化 ,并用显微测微尺测量CA1区存活锥体细胞密度 (存活锥体细胞的个数 /mm) ,表明益气通络口服液组 ( 1 1 4 .5± 1 9.0 )与生理盐水组 ( 1 0 .5± 3.0 )比较 ,P <0 .0 1。②TUNEL染色 ,光镜下假手术组未见阳性结果 ,缺血再灌流加生理盐水组CA1区大部分锥体神经元发生凋亡 ( 1 2 4 .0± 1 1 .5) ,益气通络方组CA1区凋亡的锥体神经元明显减少 ( 2 4 .5± 3.0 ) ,存活细胞增多。结论 :益气通络方能够显著降低大鼠短暂性脑缺血后海马迟发性神经元死亡 ,抑制细胞凋亡可能是其临床疗效的机制之一。     

Different properties of single voltage-dependent potassium channels in adult rat pyramidal neurons acutely dissociated from CAI and CA3 regions of hippocampus

<正> Previous whole-cell study has showed that delayed rectifier current inCA1 pyramidal neurons is smaller than that in CA3 neurons in rat(Klee R.et al,J.Neurophysiol,1995,74:1982).Here we investigated the dif-ferences of Ca~(2+)-independent,4-AP-insensitive and TEA-sensitive voltage-dependent single K~+ channel between acutely isolated CA1 and CA3pyramidal neurons of adult rat hippocampus using cell-attached and inside-out configurations.During a given depolarizing step of 300 ms,thechanneIs didn’t show machtivation in both types of cells.     

钾通道阻断剂对大鼠海马神经元迟发性死亡的保护作用

<正> 我们以往的研究表明,脑缺血再灌流后细胞膜兴奋性降低可能是海马CA1区锥体细胞迟发性死亡的机制之一,而膜兴奋性降低与钾通道活动增强密切相关.因此,本实验研究了钾通道阻断剂TEA对短暂性前脑缺血后海马CA1区锥体细胞死亡的影响,以期探讨钾通道在神经元迟发性死亡中的作用.成年雄性Wistar大鼠(200～250g)随机分为6组:(1)正常对照组,(2)缺血组,(3)1.25mM TEA组,(4)2.5mM TEA组,(5)5mM TEA组,(6)生理盐水对照组.实验采用改良的四血管闭塞法制作15分钟前脑缺血模型.再灌注30分钟后,经侧脑室分别给子5ul生理盐水或TEA溶液(终浓度分别为1.25mM、2.5mM、5mM),每日1次,连续7天.常规病理石蜡切片(片厚5um),光镜下计数CA1区存活的锥体细胞密度(个/mm).结果:正常对照组:192±12(n=10);缺血组:7±2(n=10);生理盐水对照组:21±7(n=8);1.25mM TEA组:20±3(n=10);2.5mM TEA组:69±13(n=8);5mM TEA组:61±14(n=4).经统计,2.5mM TEA组、5mM TEA组与缺血组及生理盐水对照     

益气通络口服液对大鼠短暂性脑缺血后海马迟发性神经元死亡的保护作用

<正> 益气通络口服液具有补肾益气,活血化瘀,理气化痰的功效,临床用于缺血性心脑血管疾病的治疗收到一定效果.为进一步阐明其疗效机制,本文研究益气通络口服液对大鼠短暂性脑缺血后海马迟发性神经元死亡的保护作用.     

大鼠腰骶髓中间带外侧核向臂旁核的投射——BDA顺行追踪研究

为了解贫办脏器感觉信息的传递道路，用结合生物素的葡聚糖妥作为顺行追踪剂，研究了大鼠腰骶髓中间带外侧核向脑桥臂旁核的投射。将ＢＤＡ注射酝中间带外侧核后，顺行标记的轴突终末出现于双侧的臂旁核，同侧略大。大量的ＢＤＡ标记的轴突终末出现于臂旁外侧核的外侧内核和外侧中央核，少量分布于外侧背核。     

膀胱伤害性刺激条件下大鼠腰骶髓后连合核及背根节内SP的动态变化

将１０％福尔马林１．０～１．５ｍｌ经尿道注入大鼠膀胱，于刺激后的０．５，１，２，８，２４，４８ｈ取材，进行兔疫组化（ＡＢＣ法）反应，观察脊髓腰骶段后连合核区的ＳＰ样纤维和终末的分布，并随机抽样进行图像分析、另设对照组，向膀胱内注入生理盐水，０．５，２．０ｈ后取材。结果显示：福尔马林刺激后，腰骶髓后连合核区ＳＰ样阳性纤维和终末与对照组相比，在ｌｈ内明显减少，而在２ｈ时则呈增加趋势，８ｈ又恢复正常。同时本文以同样动物模型，实验组分别于刺激后１，３，８，１２，２４，４８ｈ和５ｄ取材，对照组于刺激后２４ｈ取材，进行原位杂交组化反应，观察腰骶髓背根神经节内ＳＰｍＲＮＡ阳性神经元的数量。结果显示：福尔马林刺激后３ｈ即出现ＳＰｍＲＮＡ表达神经元数量的明显增加，２４ｈ达到高峰，并在４８ｈ以后开始下降，到５ｄ后回落到正常水平。     

猫脊髓后角浅层内GABA能神经终末与表达阿片μ受体神经元之间的突触联系

为了研究ＧＡＢＡ与ＭＯＲ在吗啡镇痛中的相互关系，用包埋前免疫组织化学方法结合包埋后胶体金电镜技术，观察了猫脊髓后角浅层内γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）能轴突终末与表达阿片μ受体神经元之间的突触联系。结果表明，后角浅层内约有三分之一的ＭＯＲ阳性树突和胞体与ＧＡＢＡ阳性终末形成突触连接，这些突触均为对称性突触。本实验结果提示猫脊髓后角浅层内ＭＯＲ阳性神经元的功能活动可能受到突触前成分释放的ＧＡＢＡ的影响     

大鼠腰骶髓后连合核内P物质受体阳性神经元与GABA能轴突终末的突触联系

用包埋前免疫组织化学方法结合包埋后免疫金电镜技术，研究了大鼠腰骶髓后连合核内Ｐ物质受体（ＳＰＲ）免疫反应神经元与ＧＡＢＡ能终末的突触联系。ＳＰＲ免疫反应产物主要分布于神经元胞体和树突的胞膜下。双重标记电镜结果表明，约有４６％的ＳＰＲ阳性树突和胞体与ＧＡＢＡ能终末形成对称性突触。其中绝大部分为轴树突触，个别为轴体突触。本研究结果提示，大鼠腰骶髓后连合核ＳＰＲ阳性神经元可能接受ＧＡＢＡ能终末的调控。     

大鼠福尔马林实验中脊髓后角浅层内P物质和降钙素基因相关肽的变化

为研究福尔马林实验动物行为反应与脊髓内Ｐ物质（ＳＰ）和降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）之间可能的相互关系，应用免疫组织化学方法结合图像分析技术，对福尔马林实验大鼠不同时程的脊髓后角浅层内ＳＰ、ＣＧＲＰ的含量进行了半定量分析，并与大鼠的行为反应分期进行了比较。结果显示：脊髓后角浅层内ＳＰ和ＣＧＲＰ的含量在福尔马林实验后的第１期反应（０～５ｍｉｎ）时迅速降低；在间歇期（５～２０ｍｉｎ）仍持续降低，在１５ｍｉｎ达最低值；间歇期后进入第２期反应（３０～６０ｍｉｎ）时，逐渐开始缓慢恢复，６０ｍｉｎ后恢复至正常水平，并开始逐渐增高，于９０ｍｉｎ达最高值。之后逐渐回落，在１２～２４ｈ又恢复至正常水平。结果提示：福尔马林实验引起的大鼠两期伤害性反应可能与伤害性信息传递引起的ＳＰ和ＣＧＲＰ在脊髓后角浅层内的释放有密切关系     

阿片μ受体在猫脊髓背角浅层内的超微定位分布

用免疫电镜技术观察了阿片μ受体（ＭＯＲ）在猫脊髓背角浅层内的超微定位分布。电镜下观察发现ＭＯＲ样免疫反应产物主要位于小树突和无髓纤维内，偶见有阳性的胞体。ＭＯＲ阳性树突多与阴性轴突终末形成对称性突触，个别为非对称性突触。背角浅层内分布有一定数量的ＭＯＲ阳性无缝纤维，但仅观察到少量阳性轴突终末，且其中大部分并不与其周转形成突触连接。本研究结果为ＭＯＲ在脊髓水平参与阿片类物质镇痛过程中存在突触前和突触