高丽参提取液对大鼠自身免疫性脑脊髓膜炎的保护作用

目的:探讨高丽参提取液(Korean red ginseng extract,KRG)对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法:取SD 大鼠30 只,随机分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(高丽参提取液治疗),每组10 只,对EAE 大鼠进行神经功能评分及体重测量,通过病理学HE 染色和免疫组化观察25 d 脑和脊髓炎症浸润,流式细胞术检测大鼠脊髓和淋巴结CD4+ 、CD4+ / IFN-β+(Th1)、CD4+ / IL-17+(Th17)和CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量,实时荧光定量q-PCR 检测大鼠脊髓和淋巴结IFN-β、IL-17、IL-23 和Foxp3 mRNA 水平的表达。结果:治疗组大鼠神经功能评分明显改善,体重明显增加;与模型组比较,实验组神经症状和病理改变减轻;与模型组相比,治疗组中大鼠脊髓和淋巴结 CD4+ 、CD4+ / IFN-β+ 、CD4+ / IL-17+ T 细胞数量减少,而CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量增多(P<0.05);大鼠脊髓和淋巴结IFN-β、IL-17、IL-23 mRNA 表达下降,而Foxp3 mRNA 表达增加(P<0.05)。结论:高丽参提取液通过调节免疫系统的CD4+ 、CD4+ / IFN-β+ 、CD4+ / IL-17+和CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量和CD4+ T 细胞分泌细胞因子的水平对EAE 起保护作用。     

百合科开口箭属植物化学成分、活性作用研究进展

开口箭属Tupistra．植物为百合科Liliceae铃兰族Convallarieae,约有30种”主要分布于我国中西部地区湖北、江西、四川、云南、广西、福建、浙江、贵州等地,夏秋二季采挖,除去须根,洗净,晒干,以根状茎入药。该植物多为少数民族民间用药。具有清热解毒,散淤止痛的功效。常用于治疗白喉,风湿关节痛,腰腿疼痛,跌打损伤,毒蛇咬伤。外用治痈疖肿毒。     

人MR1/IgG1 Fc二聚体融合蛋白的构建、表达及功能检测

目的 构建MR1/IgG1 Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1 Fc二聚体,制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法 从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业化合成MR1胞外段和IgG1 Fc融合基因的全序列基因MR1/IgG1 Fc,与β2m基因重组构建pFastBac^TM Dual+[β2m+MR1/IgG1 Fc]表达载体;利用Bac-to-Bac昆虫表达系统表达MR1/IgG1 Fc二聚体融合蛋白,并通过双抗体夹心ELISA、Western blot及流式细胞术进行检测。建立MR1/IgG1 Fc二聚体加载的人工抗原提呈细胞(artificial antigen presenting cells, aAPCs),即MR1 aAPCs,提呈大肠埃希菌(DH5α)来源的代谢物,与人外周血单个核细胞共培养,检测MAIT细胞的活化和增殖水平。结果 经PCR及测序鉴定证实pFastBac^TM Dual+[β2m+MR1/IgG1 Fc]载体中MR...     

微管抑制及尾桥蛋白磷酸化促进骨肉瘤细胞U2OS微核形成

目的 探讨微管及微管相关蛋白尾桥蛋白在肿瘤细胞微核形成中的作用。方法 利用DAPI染色检测不同类型细胞自发微核率;利用诺考达唑(nocodazole)抑制微管聚集后,DAPI染色和胞质分裂阻滞(cytokinesis-block, CB)微核实验观察人骨肉瘤细胞株U2OS中微核形成情况;免疫荧光多重染色检测诺考达唑处理不同时间对U2OS细胞中微管及尾桥蛋白的影响;在U2OS细胞中过表达尾桥蛋白或利用collybistin使尾桥蛋白磷酸化,再利用免疫荧光及DAPI染色检测其对微管及微核形成的影响。结果 相对于人胚肾HEK293细胞和原代神经细胞,U2OS自发微核率更高;诺考达唑处理使U2OS细胞微核数量增加,且与释放时间相关;诺考达唑处理使尾桥蛋白分布改变,逐渐聚集于细胞核;U2OS细胞中磷酸化尾桥蛋白主要表达于分裂期细胞;过表达尾桥蛋白和(或)增加其磷酸化水平并不影响U2OS细胞中微管蛋白的表达,但过表达尾桥蛋白并增加其磷酸化水平可使微核数量增多。结论 肿瘤细胞内微核形成与微管聚集能力关系密切,可形成于细胞周期不同时期,具有积累效应。尾桥蛋白磷酸化后细胞中微核数量增多,提示其可能参与调...     

表没食子儿茶素没食子酸酯纳米颗粒的制备及其体外抗白血病效应研究

目的：制备表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）-壳聚糖（CS）纳米颗粒，并比较EGCG纳米颗粒与原料药对人急性淋巴细胞白血病细胞系Jurkat细胞的抑制作用。方法：选取壳聚糖（CS）为包封材料，采用注入-超声法将EGCG装载到CS形成的纳米粒中，制备出EGCG纳米颗粒。使用激光粒度仪对纳米EGCG的粒径和Zeta电位进行测定，采用场发射扫描电子显微镜观察其形态结构。采用CCK-8实验检测EGCG纳米颗粒抑制Jurkat细胞增殖的作用，采用流式细胞术检测其对Jurkat细胞凋亡的影响，比较EGCG纳米颗粒与原料药的体外抗白血病效应。结果：最优条件下制备的EGCG纳米颗粒包封率为（76±4）%，平均粒径为（116±25）nm，平均Zeta电位为（61.2±1.8）mV，具有球形微观结构。EGCG纳米颗粒抑制Jurkat细胞增殖作用及促Jurkat细胞凋亡作用显著高于EGCG原料药。结论：EGCG纳米颗粒在体外抗白血病效应明显优于原料药，为进一步探索其体内抗白血病效应提供了依据。     

临床免疫学PBL教学改革探讨

临床免疫学是实践性和应用性很强的学科,将PBL教学模式贯穿教学之中,引导学生适应以问题为基础的学习方法,是改善教学效果,全面提升学生综合素质的有效途径。文章阐述了PBL教学的特点和优势,总结了开展教学活动的实践经验,提出采用混合与渐进式相结合的PBL教学方法可起到事半功倍的教学效果。     

右旋布洛芬缓释片的制备及其释放度测定

目的:制备右旋布洛芬缓释片。方法:采用正交设计法进行处方筛选,制备缓释片,测定其释放度。结果:缓释片的释放行为符合Higuchi方程,7 h累积释放量大于75％。结论:该缓释片处方合理,工艺简单,缓释效果较好。