穿心莲内酯对TBHP诱导的椎间盘髓核细胞凋亡的作用及机制研究

目的：探讨穿心莲内酯（andrographolide,ANDRO）对叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide,TBHP）诱导的椎间盘髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPC）凋亡的作用及其机制。方法：用TBHP诱导NPC建立细胞模型。将NPC分为5组：对照组、模型组（100μmol/L TBHP）、ANDRO低剂量组（100μmol/L TBHP+9μmol/L ANDRO）、ANDRO中剂量组（100μmol/L TBHP+18μmol/L ANDRO）和ANDRO高剂量组（100μmol/L TBHP+36μmol/L ANDRO）。流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,ELISA试剂盒检测氧化应激相关指标超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-PX）和过氧化氢酶（catalase,CAT）水平,JC-1探针法检测线粒体膜电位,Western blot检测动力相关蛋白1(dynam...     

9例妊娠肾病综合征临床分析

目的 探讨妊娠期肾病综合征（nephrotic sydromeinpregancy,NSP）的临床特点。方法选自我院住院分娩的578例孕妇中的重度妊高征患者47例,其中NSP9例（A组）,非NSP44例（B组）。观察2组发病情况、临床表现及辅助检查、母儿预后等。结果NSP占分娩总数的1．56％,占重度妊高征的19．15％。A组合并低蛋白血症及腹水者分别为100．0％、66．67％％,明显高于B组的36．84％、28．95％（P〈0．05）,A组脐动脉收缩期最高血流速度（S）与舒张期最低血流速度（D）的比值（S／D）,明显高于B组（P〈0．05）。A组围产儿死亡3例（33．3％）;B组围产儿死亡5例（13．16％）,二者差异有显著性（P〈0．01）。结论妊娠肾病综合征患者病情重,并发症多,围产儿预后差。应加强产前检查,预防为主。     

116例剖宫产原因分析

剖宫产术是处理高危妊娠和异常分娩,挽救孕产妇和围产儿生命的有效手段。近几年来,由于产妇和家属的偏见及部分医务人员手术指征掌握不够严格等因素,剖宫产所占比例逐年升高。作者就我院2009年4月-2010年4月我院116例剖宫产原因进行分析,报告如下。     

自拟方配合小剂量缩宫素促进内源性催产素分泌在中期妊娠引产的应用

目的探讨自拟方配合小剂量缩宫素,促进内源性催产素分泌在妊娠中期引产时的应用效果。方法将160例妊娠中期初产妇,作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组各80例。对照组采用羊膜腔内引产术;观察组采用自拟方配合小剂量缩宫素,比较两组用药前后的催产素水平、宫颈成熟评分及分娩率。结果研究对象48h后的宫颈成熟评分、催产素水平、分娩率比较(P0.05),差异有统计学意义。结论自拟方配合小剂量缩宫素促进宫颈成熟,提高引产成功率,且不良反应少,对初产妇生育能力没有影响,能够降低再次妊娠先兆流产的概率。     

shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响

目的观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组。RT-qPCR和Western Blot检测Twist和凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的表达。Transwell法检测人绒毛膜癌细胞侵袭能力,CCK-8法检测人绒毛膜癌细胞增殖能力,AV-PI试剂盒检测人绒毛膜癌细胞凋亡水平。结果 RT-PCR结果显示,空白质粒组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.011±0.125);shRNA干扰组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(0.377±0.021),高于空白质粒组的mRNA表达水平(P <0.05)。Caspase-3和Caspase-9的mRNA含量具有同样的趋势。Western-Blot结果显示,空白质粒组和shRNA干扰组的的Twist蛋白相对表达量(与空白对照组相比)分别为(7.211±0.934... 更多     

shRNA-FAM-38A基因对宫颈癌CS1213细胞增殖和迁移的影响

目的探讨shRNA-FAM-38A基因在宫颈癌CS1213细胞增殖和迁移中的作用。方法宫颈癌CS1213细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组。空白对照组细胞不转染慢病毒载体,阴性对照组细胞转染无序序列慢病毒载体,实验组细胞转染沉默shRNA FAM-38A慢病毒载体。采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞FAM-38A、caspase-3和caspase-9 mRNA相对表达量,采用Transwell小室实验检测3组CS1213细胞迁移细胞数,采用CCK-8实验检测3组细胞增殖率。结果实验组细胞FAM-38A mRNA相对表达量(0.32±0.07)、迁移细胞数[(44.38±5.32)个]、细胞增殖率[(47.54±7.63)%]低于空白对照组[0.95±0.13、(99.72±19.63)个、(144.63±21.75)%]和阴性对照组[1.14±0.23、(119.63±21.87)个、(145.62±11.97)%](P0.05),caspase-3、caspase-9 mRNA相对表达量(5.11±1.21、12.64±2.87)高于空白对照组(0.84±0.09、0.22±0.03)和阴性对照组(0.89±0.12、0.21±0.04)(P0.05),空白对照组FAM-38A、caspase-3、caspase-9 mRNA相对表达量及迁移细胞数、细胞增殖率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 shRNA-FAM-38A基因可抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移能力,可作为宫颈癌的潜在治疗靶点。     

腹腔镜宫颈癌根治术后TAP、CEA水平变化及其临床意义

目的探讨腹腔镜宫颈癌根治术后肿瘤异常蛋白(TAP)、癌胚抗原(CEA)水平变化及其临床意义。方法选取2015年5月至2017年5月本院收治的腹腔镜宫颈癌根治术后患者100例,依据1年内复发情况分为复发组(n=24例)和未发组(n=76例),同期选取健康人员100例,检测所有人员血清TAP、CEA水平,分析所有人员血清TAP、CEA水平及其与宫颈癌复发的关系。结果在血清TAP、CEA水平方面,宫颈癌患者明显高于健康人员,腹腔镜宫颈癌根治术患者术后(出院日)明显低于术前,差异有统计学意义(P0.05);在血清TAP、CEA水平方面,复发组术后3、6、9、12个月明显高于未发组,复发组术后呈持续上升的趋势,未发组呈持续下降的趋势,差异有统计学意义(P0.05)。结论腹腔镜宫颈癌根治术后患者TAP、CEA水平变化与其复发有关,术后监测二者水平变化可作为评估患者复发的重要参考指标。     

血清抗苗勒管激素与卵泡卵泡刺激素的相关性及对胚胎移植的预测作用

目的研究血清抗苗勒管激素(AMH)与卵泡卵泡刺激素(FSH)的相关性及对胚胎移植的预测作用,以期寻找对预测胚胎移植有价值的指标成分。方法选取2012年1月-2016年12月在该院生殖中心就诊的121例不孕患者为研究对象,检测卵泡发育不同时期血清AMH和卵泡FSH的含量,分析二者的关系以及二者单独和联合预测胚胎移植后活产率的价值。结果在卵泡发育不同时期,血清AMH和卵泡FSH呈负相关关系。妊娠组和未妊娠组血清AMH和卵泡FSH的含量均未发生显著变化(P>0.05)。AMH和FSH联合预测胚胎移植活产率的特异度和灵敏度高于AMH、FSH单独预测(P<0.05)。结论AMH和FSH在卵泡不同发育时期含量呈负相关关系,二者联合预测胚胎移植活产率的诊断价值高于二者单独预测,且具有一定的诊断价值。     

N-myc下游调节基因2在子宫内膜癌组织中表达及意义

目的探讨N-myc下游调节基因2(N-myc downstream-regulatedgene 2,NDRG2)在子宫内膜癌组织中的表达,及对肿瘤细胞增殖、侵袭的影响。方法行根治性切除术子宫内膜癌患者77例,手术切除的肿瘤组织为子宫内膜癌组,癌旁正常组织为癌旁组,采用实时荧光定量PCR法检测2组NDRG2基因表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。将对数生长期子宫内膜癌HEC-1A细胞随机分为NDRG2抑制组(转染NDRG2干扰序列)、NDRG2正常表达组(转染NDRG2干扰对照序列)、空白对照组(不作任何处理),采用实时荧光定量PCR法检测3组转染48 h NDRG2基因表达,CCK-8法检测3组转染48、96 h增殖活力,划痕试验检测3组转染后培养12、24 h迁移能力,Transwell小室法检测3组转染48 h侵袭能力。结果子宫内膜癌组NDRG2 mRNA相对表达量(1.30±0.11)低于癌旁组(1.95±0.15)(P<0.05);FIGO分期Ⅱ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移者NDRG2 mRNA相对表达量(1.16±0.07、1.14±0.10、1.24±0.07)低于FIGO分期Ⅰ期、高分化、无淋巴结转移者(1.52±0.13、1.56±0.17、1.48±0.12)(P<0.05);转染48 h,NDRG2抑制组NDRG2 mRNA相对表达量(0.48±0.11)低于NDRG2正常表达组(1.07±0.08)、空白对照组(1.09±0.16);转染48、96 h,NDRG2抑制组增殖活力吸光度(optical density,OD)值(0.47±0.06、0.76±0.03)高于NDRG2正常表达组(0.33±0.07、0.58±0.03)、空白对照组(0.36±0.08、0.61±0.02)(P<0.05);NDRG2正常表达组、空白对照组转染48 h,NDRG2 mRNA相对表达量及转染48、96 h增殖活力OD值比较差异均无统计学意义(P>0.05);NDRG2抑制组转染后培养12、24 h划痕愈合率[(14.32±2.17)%、(34.28±4.95)%]及侵袭细胞数[(122.91±8.87)个]均高于NDRG2正常表达组[(7.14±1.52)%、(12.73±3.02)%、(104.21±2.94)个]、空白对照组[(6.82±1.24)%、(11.64±2.86)%、(99.71±5.40)个](P<0.05),NDRG2正常表达组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论NDRG2在子宫内膜癌组织中呈低表达,下调NDRG2基因表达可促进子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、迁移和侵袭。     

牛磺酸上调基因1对人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖及迁移和凋亡的影响

目的探讨牛磺酸上调基因1(taurine-upregulated gene 1,TUG1)在人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖、迁移和凋亡中的作用。方法采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术构建TUG1慢病毒载体。将对数生长期人绒毛膜癌JEG-3细胞随机分为空白对照组(不作任何处理)、阴性对照组(转染阴性对照靶序列慢病毒载体)和转染组(转染siRNA-TUG1慢病毒载体)。采用实时荧光定量PCR法检测3组TUG1mRNA、caspase-3mRNA、caspase-9mRNA相对表达量,采用Western blot法检测3组TUG1、caspase-3、caspase-9蛋白相对表达量,采用Transwell小室试验检测3组培养24h细胞侵袭能力,采用CCK-8法检测3组细胞培养72h吸光度值,采用流式细胞术检测3组培养72h细胞凋亡率。结果构建siRNA-TUG1载体的慢病毒滴度为3×108 TU/mL;转染72 h,转染组TUG1 mRNA、caspase-3mRNA、caspase-9mRNA相对表达量(0.42±0.02、0.31±0.01、0.21±0.01)低于阴性对照组(1.09±0.03、1.29±0.03、1.02±0.01)和空白对照组(1.01±0.01、1.02±0.02、1.00±0.01)(P0.05),TUG1、caspase-3、caspase-9蛋白相对表达量(0.24±0.07、0.49±0.23、0.11±0.02)低于阴性对照组(7.32±0.05、10.12±1.47、9.98±2.78)和空白对照组(6.08±0.19、9.88±0.93、9.91±1.44)(P0.05);培养24h,转染组迁移细胞数[(52.11±4.09)个]较阴性对照组[(142.11±14.02)个]和空白对照组[(131.32±18.39)个]少(P0.05);培养72h,转染组细胞吸光度值(24.27±3.11)较阴性对照组(51.12±2.47)和空白对照组(60.34±1.24)低(P0.05),细胞凋亡率[(35.21±13.31)%]较阴性对照组[(3.09±1.13)%]和空白对照组[(4.21±1.24)%]高(P0.05);阴性对照组各观察指标与空白对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 TUG1沉默表达慢病毒载体可明显抑制人绒毛膜癌JEG-3细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡。