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B7-1和IL-12基因转染对肝癌细胞免疫原性的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 观察B7-1和IL-12基因表达对人肝癌细胞免疫原性原影响。方法 分别将B7-1和IL-12基因以逆转录病毒介导转染HepG2细胞。阳性克隆细胞与健康人外周血淋巴细胞(PBL)混合培养后,用流式细胞仪检测PBL表面Ⅰ类人白细胞抗原(HLA-Ⅰ)分子表达,以MTT法检测PBL的特异性杀伤活性K562细胞的活性。结果 混合HepG2/B7-1HepG2/IL-12细胞组PBL表面的HLA-Ⅰ分子 相似文献
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重组人内皮抑素腺病毒抑制肝癌裸鼠移植瘤生长 总被引:4,自引:2,他引:4
目的 观察重组人内皮抑素腺病毒(Ad/hEndo)对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法 人脐静脉内皮细胞ECV-304经Ad/hEndo感染后,western印迹检测人内皮抑素的表达。人肝癌BEL-7402细胞移植到裸鼠背脊部后,检测Ad/hEndo对肝癌移植瘤生长的抑制作用。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中内皮抑素mRNA的表达。分析人内皮抑素在裸鼠体内的表达分布。结果 Western印迹检测到人内皮抑素基因在ECV-304细胞内高效表达。Ad/hEndo明显抑制人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤生长(F=4.061,P<0.05)。Ad/hEndo组血管密度计数为6.88±1.08,DMEM组为13.60±1.71(t=9.216,P<0.01)。瘤内注射Ad/hEndo后3d,RT-PCR在肿瘤组织检测到内皮抑素mRNA的表达,7d后表达不明显。人内皮抑素蛋白主要分布在肿瘤组织。结论 腺病毒介导的人内皮抑素基因在体内、体外获得高效表达,并明显抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长与血管生成。 相似文献
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HSV-TK/CD基因联合IL-12基因体内治疗肝癌 总被引:7,自引:0,他引:7
目的观察HSV-TK/CD基因联合IL-12基因体内治疗肝癌的疗效.方法SCID小鼠双侧腋部皮下植入5×105(0.2ml)HepG2细胞,同时腹腔注射PBL 2×107(0.5 ml).荷瘤小鼠分为4组,左侧腋部瘤内分别注射5×105(0.1 ml)丝裂霉素处理过的HepG2-IL-12细胞、5×105(0.1 ml)HepG2-pALBeAFP-CD/TK细胞或两者(各0.05 ml),次日起腹腔注射PBS或GCV 100 mg/kg 5-FC 500 mg/kg,连续10天.Ⅰ组:HepG2-IL-12 GCV,5-FC;Ⅱ组:HepG2-pALBeAFP-CD/TK PBS;Ⅲ组:HepG2-pALBeAFP-CD/TK GCV,5-FC;Ⅳ组:HepG2-pALBeAFP-CD/TK HepG2-IL-12 GCV,5-FC.治疗结束5天后作常规肿瘤组织病理学检查.结果与Ⅱ组比较,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组治疗侧均有明显的生长抑制,第30天较Ⅱ组分别减小20.5%、54.9%和87.6%,且Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组之间差异明显.Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组右侧肿瘤较Ⅱ组同侧显著缩小,分别达23.2%、24.9%和45.0%.结论pALBeAFP-CD/TK双自杀基因体内治疗肝癌有效.在免疫活性鼠,局部转染IL-12基因可增强双自杀基因的疗效和远处旁观者效应. 相似文献
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[目的]构建肝癌特异性双自杀基因表达质粒。[方法]用平端连接方法将pUH-3质粒中822bp的pALBeAFP片段(含有416bp的白蛋白启动子pALB和406bp的甲胎蛋白增强子eAFP)代替pCEA-CD/TK质粒的CEA启动子,用PCR法鉴定插人方向,构建肝癌特异性双自杀基因表达质粒pALBeAFP-CD/TK。将pALBeAFP-CD/TK转染HepG2等4种肝癌细胞,MTT法测定前药GCV、5-FC对HepG2细胞的杀伤作用。[结果]获得pALBeAFP-CD/TK克隆,RT-PCR证实HepG2细胞转染pALBeAFP-CD/TK后可表达自杀基因.pALBeAFP-CD/TK转染可使前药GCV、5-FC特异性地杀伤HepG2细胞。[结论]肝癌特异性HSV-TK/CD基因表达质粒构建成功。 相似文献
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严重急性呼吸综合征患者血清病毒抗体消长规律的研究 总被引:4,自引:1,他引:4
2003年传染性非典型肺炎在全世界几十个国家和地区暴发流行,世界卫生组织根据其发病特征于2003年4月16日正式命名为严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome,简称SARS)。由SARS冠状病毒(SARS-associated coronavirus,简称SARS-CoV)引起的此次传染性非典型肺炎发病后,病情发展较急,部分病人病情较重,临床上大致符合病毒感染的病情变化。我们检测了95例SARS患者体内不同时期SARS病毒抗体,探讨病毒抗体在患者体内出现的规律,现报道如下。 相似文献
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目的构建小鼠T—bet基因重组真核表达载体pcDNA3一T—bet,为T—bet基因治疗研究提供有效的生物表达系统。方法采用内切酶切从质粒T—bet/GFP—RV中获得约1.7 kb的小鼠T—betcDNA片段,以单酶切非定向克隆方式与真核表达质粒pcDNA3连接,构建真核表达载体pcDNA3-T-bet。结果经PCR筛选阳性重组子,双酶切鉴定T—bet基因重组方向,并测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变。结论本实验成功构建了小鼠T—bet基因真核表达载体pcDNA3-T-bet。 相似文献
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肝移植术后的营养治疗 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨肝移植术后的营养治疗方法。方法对11例肝移植病人术后的营养治疗方法和营养状况进行回顾性分析。术后1~3天采用全肠外营养(TPN),辅以人白蛋白、血浆;术后4—5天肠内营养(EN)结合肠外营养(PN);术后6~10天逐渐过渡到全肠内营养;术后12~18天完全经口进食。术后常规使用重组人生长激素rhGH4~7天。结果除2例病人分别死于脑出血、呼吸衰竭外,余9例恢复顺利。结论适当的营养治疗有利于肝移植病人的术后恢复。 相似文献
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三七总皂苷抑制肝细胞钙超载的机制 总被引:10,自引:1,他引:9
目的通过测定大鼠肝细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),观察三七总皂苷(PNGS)对肝细胞Ca2+浓度的影响,探讨其抑制肝细胞钙超载的机制。方法胶原酶分离大鼠肝细胞,Fura 2/AM技术测定[Ca2+]i,研究PNGS对静息和被激动状态下肝细胞[Ca2+]i的影响。结果10nmol·L-1血管加压素及10nmol·L-1血管紧张素分别使肝细胞[Ca2+]i增加200%和94%,verapamil、nifedipine和PNGS均能不同程度地抑制血管加压素、血管紧张素激动引起的肝细胞[Ca2+]i升高,PNGS的抑制作用显著强于verapamil、nifedipine且呈明显的剂量依赖性。PNGS还能轻度降低静息状态下肝细胞[Ca2+]i,而verapamil、nifedipine无此作用。结论PNGS能特异性阻断肝细胞膜上受体依赖性钙通道(ROC),抑制肝细胞的钙内流,阻断肝细胞内源性IP3途径,防止肝细胞内钙超载。PNGS抑制钙超载机制还可能与其本身轻度结合钙离子有关。 相似文献