当归红芪超滤膜提取物抑制过氧化氢诱导的大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达

目的 探讨当归红芪超滤膜提取物对心肌细胞凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白表达的影响.方法 用高浓度的过氧化氢(400 μmol/L)在Wistar乳鼠原代培养的心肌细胞上建立细胞凋亡模型,用不同浓度的当归红芪超滤物(3.75、7.5、15 g/L)进行治疗.光镜下观察细胞形态;逆转录-多聚酶链反应和蛋白印迹法检测bcl-2、bax蛋白在心肌细胞中的表达情况.结果 与正常对照组相比,高浓度过氧化氢损伤组bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);bax mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05);bcl-2/bax比值显著降低(P<0.01),差异具有统计学意义.与损伤组比较,高浓度和中浓度药物治疗组bcl-2 mRNA及其蛋白表达显著增加(P<0.05);bax mRNA及其蛋白表达显著降低(P<0.05);bcl-2/bax比值显著增加(P<0.01),差异具有统计学意义.低浓度药物治疗组则对bcl-2、bax表达无显著改变.结论 当归红芪超滤膜提取物可通过上调bcl-2/bax的比值抑制心肌细胞的凋亡,对心肌细胞具有抗凋亡的保护作用.     

慈菇消脂丸对NF-κB介导的非酒精性脂肪肝病大鼠肝细胞凋亡的干预作用

目的通过观察慈菇消脂丸对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝细胞凋亡相关调控基因核转录因子κB(NF-κB)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,探讨解毒化痰法治疗NAFLD的作用机制。方法 60只SPF级健康雄性Wistar大鼠,随机分为6组:正常对照组,模型组,慈菇消脂丸高、中、低剂量组,盐酸吡格列酮组,每组10只。采用高脂饮食喂饲大鼠建立NAFLD模型后,连续药物治疗6周。给药结束后,处死全部动物,取肝脏和血清。全自动生化分析仪检测各组大鼠肝功、血脂;HE染色观察肝脏的组织形态学特点;透射电子显微镜观察肝细胞的超微结构;Western Blot技术检测肝组织NF-κB、Bcl-2、Bax的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平升高(P0.01);肝组织呈中重度脂肪变性并同时伴有肝细胞凋亡;肝组织中NF-κB、Bax蛋白表达增强(P0.01),Bcl-2蛋白表达减低(P0.01),Bcl-2/Bax比值降低(P0.01)。与模型组比较,慈菇消脂丸各剂量组大鼠血清ALT、AST、TG、TC水平降低(P0.01);肝组织NF-κB、Bax蛋白表达减低(P0.01),Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值升高(P0.05)。与盐酸吡格列酮组比较,慈菇消脂丸高剂量下调NF-κB蛋白、上调Bcl-2蛋白表达的作用更显著(P0.01)。结论慈菇消脂丸能够明显改善NAFLD大鼠肝功及血脂;上调Bcl-2蛋白表达,降低NF-κB、Bax蛋白表达,使Bcl-2/Bax比值升高,从而抑制肝细胞凋亡,起到防治NAFLD的作用。     

慈菇消脂方含药血清对HSC-T6细胞miR-149-5P及Hh信号通路相关蛋白表达的影响

目的 探讨miR-149-5p与Hh信号通路对肝星状细胞活化及纤维化的作用和慈菇消脂方对肝纤维化的干预机制。方法 实验细胞分为7组：正常对照组、TGF-β1诱导组、TGF-β1+2%慈菇消脂方含药血清组、TGF-β1+4%慈菇消脂方含药血清组、TGF-β1+6%慈菇消脂方含药血清组、TGF-β1+miR-149-5p inhibitor转染+6%含药血清组、TGF-β1+miR inhibitor NC转染+6%含药血清组。对慈菇消脂方含药血清进行非靶标代谢组学检测,CCK-8检测各组细胞活力。Q-PCR检测各组细胞miR-149-5p表达,Q-PCR和Western-Blot检测各组细胞中α-SMA、Col-I、Shh、Gli1、Gli2基因和蛋白表达。结果 慈菇消脂方含药血清中含有慈菇消脂方治疗肝纤维化的核心成分。与正常对照组比较,TGF-β1诱导组细胞活力及Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA表达升高(P<0.05)。与TGF-β1诱导组相比,6%慈菇消脂方含药血清组细胞活力及Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA表达降低(P<0.05),m...     

标准化病人在中医专业临床技能考核中的应用

病史采集与病历书写是临床医生的两大基本功,为了使中医学专业大学五年级的学生在进入临床实习前掌握临床医生的基本技能,更好地胜任临床实习医生工作,迅速成长为符合临床需求的中医人才,我们采用标准化病人(SP)对中医本科生进行临床技能实训和考核。招募我校低年级医学生(大一、大二)作为志愿者,选择内科常见病、多发病建立病例题库,对标准化病人进行培训,应用到中医本科生的临床技能实训和考核中。这种实训及考核方式,更好地培养和检验了学生的基本临床技能,使理论与实践能够很好的结合,获得了学生及教师的高度认可和好评。标准化病人应用在中医本科生临床技能实训和考核中,不仅提高了医学生的临床技能,还培养了医学生的沟通能力和人文素养,增强了自信心。     

慈菇消脂胶囊对NAFLD大鼠肝组织病理变化及肝功能、血脂、FFA的影响

目的:通过观察慈菇消脂胶囊对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝组织病理变化、肝功能及血脂、FFA(游离脂肪酸)的影响,探讨慈菇消脂胶囊防治该病的作用机理。方法:喂饲高脂饲料复制非酒精性脂肪肝模型,70只大鼠随机分为正常组,模型组,慈菇消脂胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组和吡格列酮阳性药物对照组,各组大鼠连续给药6周,观察各组大鼠肝组织病理形态学变化;检测肝功能、血脂水平和肝组织FFA含量。结果:与正常组比较,模型组肝脏病理学变化、血脂代谢、肝功能指标和肝组织FFA变化均具有统计学意义(P 0. 05);慈菇消脂胶囊各剂量组肝脏脂肪变性和炎症均有不同程度的减轻,TC、TG、LDL水平及FFA含量较模型组降低(P 0. 05),差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论:慈菇消脂胶囊能够改善肝功能,减轻肝细胞脂肪变性,对非酒精性脂肪性肝病的治疗作用确切。     

慈菇消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠JNK1、p-c-Jun和Caspase-8表达的影响

目的观察慈菇消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠JNK1、p-c-Jun、Caspase-8表达的影响,探讨其相关作用机制。方法实验大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和慈菇消脂丸高、中、低剂量组,每组10只。采用高脂饲料喂养大鼠制作非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠,造模同时给予相应药物干预。造模12周后处死全部大鼠,取出肝脏。电镜观察肝细胞超微结构,TUNEL法检测肝细胞凋亡,qRT-PCR和Western blot分别检测肝组织JNK1、p-c-Jun、Caspase-8 mRNA和蛋白的表达。结果电镜观察显示,模型组大鼠肝细胞肿胀呈气球样变,胞浆中布满众多大小不一的脂滴。与正常组比较,模型组大鼠肝细胞凋亡显著增加,JNK1、p-c-Jun、Caspase-8m RNA和蛋白表达显著升高;与模型组比较,慈菇消脂丸各剂量组和阳性对照组大鼠肝细胞脂肪样变显著减少,细胞凋亡显著下降,JNK1、p-c-Jun、Caspase-8m RNA和蛋白表达显著降低。结论慈菇消脂丸通过调节JNK信号通路抑制肝细胞凋亡,对非酒精性脂肪性肝炎模型大鼠有一定的治疗作用。     

HLA-Ⅱ等位基因多态性及其与食管癌的相关性

人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)是人类的主要组织相容性复合体,于1958年首先由Jean Dausset发现,它由一组具有高度多态性和连锁不均衡性的基因群体构成,     

慈菇消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂毒性及氧化应激的影响

目的观察慈菇消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏脂质代谢及抗氧化能力的影响,探讨其相关作用机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和中药高、中、低剂量组。采用高脂饲料饲喂大鼠建立NASH模型,造模同时给予相应药物干预。造模12周,实验大鼠全部处死,取大鼠肝脏和血清。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、游离脂肪酸(FFA)及肝组织匀浆T-SOD、MDA、GSH-Px、FFA,HE染色观察肝组织病理形态,透射电镜观察肝细胞超微结构,油红O染色观察肝细胞脂肪变性。结果造模大鼠肝组织呈中重度脂肪变性并伴有炎症细胞浸润。与正常组比较,模型组大鼠肝湿重、肝指数和血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C、MDA、FFA及肝组织匀浆MDA、FFA均明显升高(P0.05,P0.01),血清及肝组织匀浆T-SOD、GSH-Px明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,中药高剂量组血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C、MDA、FFA明显降低,肝组织匀浆MDA、FFA明显降低(P0.05,P0.01),血清及肝组织匀浆T-SOD、GSH-Px明显升高(P0.01)。病理观察显示,与模型组比较,中药各剂量组大鼠肝小叶内空泡样变、脂肪样变减少,炎性细胞浸润明显改善。结论慈菇消脂丸能明显改善模型大鼠肝功能及血脂水平,提高肝脏抗氧化能力,减轻脂质过氧化损伤,达到防治NASH的目的。     

慈菇消脂丸对脂肪肝大鼠脂代谢和超氧化物歧化酶的影响

目的:探讨慈菇消脂丸治疗脂肪肝的作用机理。方法:按大鼠体重0.2mL/100g40%四氯化碳豆油溶液合并高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型7周后,模型组灌胃(ig)给予等体积豆油溶液,阳性对照组给予东宝肝泰片0.32mg.kg-1.d-1,慈菇消脂治疗低、中、高剂量组(ig)给予慈菇消脂丸0.4、0.8、1.6mg.kg-1.d-1,连续8周,正常大鼠作为空白对照组。测定肝脂数、血清血脂,观察脂质过氧化作用结果。结果:慈菇消脂丸各组超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)含量显著降低,组织学检查显示肝内脂变减轻。结论:慈菇消脂丸使实验性脂肪肝的肝脂数和血清血脂含量降低,即抑制肝脂合成、促进肝脂代谢,升高SOD活性而有抗氧化作用,从而对实验性脂肪肝有显著抑制作用。