黄连解毒汤对高脂血症小鼠血脂及炎症因子的影响

【目的】探讨黄连解毒汤对高脂血症小鼠血脂及血清炎症因子水平的调控作用。【方法】选用48只雄性C57BL/6小鼠,随机平均分为6组,即常规饲料组、高脂饲料组、常规饲料加抗生素组、高脂饲料加抗生素组、中药低剂量组(剂量为3.9g·kg-1·d-1)、中药高剂量组(剂量为7.8 g·kg-1·d-1)。常规饲料组和高脂饲料组分别进食常规饲料和高脂饲料8周;中药高、低剂量组进食高脂饲料6周后分别给予高、低剂量中药,连续灌胃2周;抗生素组分别进食常规饲料和高脂饲料6周后给予抗生素自由饮用2周。8周末处死各组小鼠,测定各组小鼠体质量、血脂(TC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、内毒素水平。【结果】黄连解毒汤低剂量组能显著降低TNF-α、IL-6、内毒素的水平(均P0.01);但对血清总胆固醇无明显改善作用。【结论】黄连解毒汤改善高脂血症炎症状态的作用与其能降低血中炎症因子水平有关。     

黄芩苷对巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β的影响

【目的】观察黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。【方法】体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,取生长良好的细胞进行接种。模型组加入LPS(终浓度为0.1μg/mL或5μg/mL)或重组抵抗素(终浓度为100 ng/mL);中药组加入不同浓度黄芩苷(终浓度为50、100μmol/L),预处理1 h,后加入LPS或抵抗素。24 h后吸取上清,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组IL-1β和抵抗素浓度,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测抵抗素mRNA表达。【结果】与正常组比较,LPS组促进了巨噬细胞分泌抵抗素,抵抗素mRNA表达上调,LPS和重组抵抗素均促进了巨噬细胞产生IL-1β(P<0.05或P<0.01)。黄芩苷高、低剂量组均可显著抑制IL-1β和抵抗素的浓度,且抑制抵抗素mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】黄芩苷可明显降低促炎因子产生的炎症反应,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

补中益气汤对小鼠肺mBD-2表达的影响

目的探讨补中益气汤对小鼠肺天然免疫效应分子β防御素-2(mouseβ-defensin 2,mBD-2)的诱导作用。方法取C57BL/6小鼠,随机分为对照组和补中益气汤高、中、低剂量组,给予PBS和不同质量浓度的补中益气汤(2.0 g/mL、1.0 g/mL和0.5 g/mL)灌胃,7 d后取小鼠肺组织,分别用RT-PCR法和免疫组化法检测小鼠肺上皮细胞mBD-2 mRNA和蛋白表达情况。结果在基因水平和蛋白水平都发现对照组小鼠肺组织不表达mBD-2,而补中益气汤刺激后实验组小鼠肺上皮细胞表达mBD-2,且高剂量组作用效果强于低剂量组。结论补中益气汤可以诱导小鼠肺上皮细胞天然免疫效应分子mBD-2的表达,这可能与其防治肺部感染作用密切相关。     

DNA提取方法对桑树内生菌多样性研究的影响

【目的】基于聚合酶链式反应—变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）对桑树根、茎、叶组织内生菌多样性的分析,结合浓度、纯度、 PCR扩增性等指标,比较4种DNA提取方法之优劣。【方法】采用常见的DNA提取方法十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法、缓冲液振荡（SPBS）法、液氮研磨（LNG）法和试剂盒（KIT）法提取桑树各组织DNA,从PCR-DGGE多样性等多方面对4种方法进行比较。【结果】对于桑树根和茎, DNA提取浓度最高的方法是LNG法,最低的是SPBS法;桑树叶情况则完全相反。桑树各组织, KIT法获得的DNA纯度均最高。桑树各组织通过16S rDNA PCR-DGGE比较内生细菌多样性,适宜的DNA提取方法是LNG法或CTAB法,不宜采用KIT法提取DNA。内生真菌ITS PCR-DGGE分析结果完全不同,最佳提取方法是KIT法,最不适宜的DNA提取方法因组织不同而异。【结论】对于桑树内生菌研究,最佳的DNA提取方法因组织不同而异,还与研究的内生菌种类有关系。     

黄芩苷对小鼠巨噬细胞CD36表达及肿瘤坏死因子-α分泌的影响

[目的]观察黄芩苷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞CD36表达及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌的影响.[方法]分别用LPS(终浓度0.1μg/mL)或LPS加黄芩苷(终浓度分别为50、100 μmol/L)处理生长良好的小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用实时荧光定量PCR法和流式细胞术检测黄芩苷对巨噬细胞CD36分子表达的影响,然后采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中TNF-α含量变化.[结果]LPS刺激可以诱导巨噬细胞CD36表达升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);不同浓度黄芩苷预处理组可显著抑制LPS诱导的CD36基因转录和蛋白表达,与LPS组比较差异有统计学意义(P＜0.01);黄芩苷还可显著减少巨噬细胞炎症因子TNF-α的分泌(P＜0.05).[结论]黄芩苷可通过抑制CD36表达,下调LPS诱导的巨噬细胞炎症因子TNF-α的生成从而发挥抗炎作用.     

补中益气汤对小鼠肺mBD-2表达的影响

目的 探讨补中益气汤对小鼠肺天然免疫效应分子β防御素-2（mouse β-defensin 2, mBD-2）的诱导作用。方法 取C57BL/6小鼠，随机分为对照组和补中益气汤高、中、低剂量组，给予PBS和不同质量浓度的补中益气汤（2.0 g/mL、1.0 g/mL和0.5 g/mL）灌胃，7 d后取小鼠肺组织，分别用RT-PCR法和免疫组化法检测小鼠肺上皮细胞mBD-2 mRNA和蛋白表达情况。结果 在基因水平和蛋白水平都发现对照组小鼠肺组织不表达mBD-2，而补中益气汤刺激后实验组小鼠肺上皮细胞表达mBD-2，且高剂量组作用效果强于低剂量组。结论 补中益气汤可以诱导小鼠肺上皮细胞天然免疫效应分子mBD-2的表达，这可能与其防治肺部感染作用密切相关。     

补中益气汤对小鼠肠道mBD-2表达的影响

目的 研究补中益气汤对小鼠肠道上皮细胞天然免疫效应分子β防御素-2(mouse β-defensin 2,mBD-2)表达的影响.方法 取SPF级C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组和补中益气汤高、中、低剂量组,给予生理盐水和不同剂量补中益气汤(50,25,12.5 g·kg-1)灌胃,7d后取小鼠肠道组织,分别用RT-PCR法和免疫组化法检测小鼠肠道上皮细胞mBD-2 mRNA和蛋白表达.结果 正常对照组小鼠肠道组织不表达mBD-2.经补中益气汤刺激后,在mRNA水平和蛋白水平均检测到肠道上皮细胞mBD-2的表达,补中益气汤高剂量组作用效果明显,与中、低剂量组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 补中益气汤在体内可以诱导小鼠肠道上皮细胞天然免疫效应分子mBD-2的表达,这可能是其抗炎抑菌的作用机理之一.     

PBL在病原生物与免疫学教学中的实践

目的:探讨病原生物与免疫学教学中开展PBL教学的效果.方法:对照组采用传统的教学方法,实验组采用PBL教学方法,通过问卷调查、考试成绩综合分析教学改革效果.结果:实验班绝大多数学生接受并欢迎PBL教学模式,并在自学能力、理解能力、分析解决问题能力等方面得到明显的提高.结论:PBL教学方法优于传统的教学方法,能有效提高病原生物与免疫学教学质量.     

大肠埃希菌耐药机制的研究进展

大肠埃希菌是感染性腹泻常见的病原菌,由于抗生素的滥用,使大肠埃希菌的耐药性越来越严重,其耐药谱也不断发生变化,对临床合理使用抗生素提出了更高和更为迫切的要求。本文就大肠埃希菌耐药状况及耐药机制等方面的研究作一综述。     

黄连解毒汤对高脂血症形成过程中小鼠肠道微生态的影响

目的分析黄连解毒汤对高脂血症小鼠肠道微生态的影响。方法 60只雄性C57BL/6小鼠,随机平均分为6组,即常规饲料组、高脂饲料组、常规饲料加抗生素组、高脂饲料加抗生素组、低剂量黄连解毒汤组(195mg/mL)、高剂量黄连解毒汤组(390mg/mL)。每组小鼠相应灌胃28d后,对各小鼠肠道粪便的细菌群落进行PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析。结果高脂饲料组的多样性指数、物种丰度都高于其他各组;中药高、低剂量组次之;高脂饲料加抗生素组两指标均为最低。两个抗生素组和中药高剂量组都建立了新的较固定的细菌群落结构。结论高脂饮食能促进某些细菌的生长,这些细菌可能与高脂血症发生相关,黄连解毒汤可能能抑制这些细菌的生长,调节肠道形成新的、稳定的细菌群落结构。