阿尔茨海默病研究的若干热点及挑战

阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）是导致老年人痴呆的最常见原因，备受研究者们的关注。近20年来，对AD的研究涉及其流行病学、病因学、发病机制、病理学、诊断及早期诊断、治疗等各个方面，形成了多个研究热点。虽然我们对该病的认识有长足进步，但仍存在很多挑战和困惑。限于篇幅，本文仅涉及若干热点问题。     

脑出血患者血氧化修饰低密度脂蛋自浓度变化及相关因素分析

用ＥＬＩＳＡ法检测了５３例胞出血（ＣＨ）患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＭＬＤＬ）浓度，以４５例非脑血管病患者为对照。结果：ＣＨ患者血ＯＭＬＤＬ浓度较对照组显著增高，浓度＞７４６，２ｕｇ／Ｌ时的患者阳性率亦明显增高，脑叶出血及血肿量大者改变更明显；ＯＭＬＤＬ可能存在急性时相性降低；增高的ＯＭＬＤＬ浓度分别与血中载脂蛋白Ｂ１００、Ａ－Ｉ呈等级正、负性相关，而与低密度脂蛋白浓度及患者年龄、性别、有否高血压史、血肿是否破入脑室、伴否消化道出血、发病时的意识状态无显著相关性。提示ＯＭＬＤＬ升高可能是ＣＨ发病的危险因素，对ＣＨ患者病因的确定有重要意义。     

血瘀证与血管内皮细胞内游离钙浓度关系的实验研究

目的：研究血瘀证与血管内皮细胞内游离钙浓度的关系,观察不同复方（活血化瘀复方、益气活血复方、理气活血复方）对血内皮细胞内游离钙浓度的影响。方法：以大鼠为研究对象,给予高胆固醇和高脂饲料喂养建立血瘀证动物模型,分为6组,观察组分别给予硝苯地平、活血化瘀复方、益气活血复方、理气活血复方。下腔静脉取血,测血清钙、血清总胆固醇和三酰甘油,Fura-2/Am标记,荧光测定血管内皮细胞内游离钙浓度。结果：①造模组与对照比较,血清钙明显升高（P＜0．05）。②所有复方均具有钙通道阻断剂样作用,能增加细胞外钙浓度,与造模组比较差异显著（P＜0．05）。③造模组与对照组比较,胞内游离钙浓度明显升高（P＜0．05）,益气活血复方能使造模运动血管内皮细胞内游离钙浓度降低,与造模组比较差异显著（P＜0．05）。结论：①血瘀证血管内皮细胞内游离钙浓度升高,血瘀证的形成可能与血管内皮细胞的屏障功能下降有关。②益气活血复方能降低胞内游离钙浓度,具有血管内皮保护作用。     

胚胎期炎症暴露对中老年海马脑源性神经营养因子基因表达和认知功能的影响

目的探讨胚胎期炎症暴露对中老年期小鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白和mRNA表达水平与认知功能的影响。方法母鼠怀孕第15~17天腹腔注射脂多糖(LPS, 50 μg/kg)或等量的0.9%氯化钠溶液, 对应子鼠分别为LPS组和CON组(雌雄各半), 分别于3月龄、15月龄时完成Morris水迷宫任务, 用Western blotting和实时定量PCR检测海马BDNF表达水平。结果与3月龄CON组相比, 15月龄CON组游泳路程明显延长(P < 0.01), 靶象限游泳路程百分比和海马BDNF基因表达水平均下降(P < 0.01)。在两个年龄段, LPS组Morris水迷宫成绩及BDNF基因表达水平均比CON组差。Pearson相关分析显示, 仅15月龄CON组和LPS组BDNF基因表达水平与游泳路程呈负相关关系(P < 0.05), 与靶象限游泳路程百分比呈正相关关系(P < 0.05)。结论胚胎期炎症暴露可加重中老年小鼠空间学习记忆能力损害, 且可能与海马BDNF基因表达水平下降有关。     

人巨细胞病毒先天性感染胎鼠大脑皮质钙调素基因mRNA表达的研究

目的 研究先天性人巨细胞病毒（HCMV）感染致脑损害后钙调素（calmodulin,CaM)基因mRNA表达的改变,以探讨先天性HCMV感染所致脑损害的机制。方法 选用10周龄Balb/c小鼠,雌雄小鼠腹腔内分别注射1.0ml、0.5ml、0.25ml HCMV后合笼交配以建立先天性HCMV中枢神经系统（CNS）感染小鼠模型,并以腹腔注射1.0ml 1640液鼠为对照。剖腹取21天胎龄小鼠大脑皮质,以自行设计的CaM cDNA编码区的一对引物与一条CaM特异性探针,分别用逆转录聚合酶链反应（RP－PCR）技术CaM mRNA相对含量,用原位杂交检测大脑皮质细胞内相应mRNA的表达及定位。结果 母鼠腹腔内接种HCMV量为1.0ml与0.5ml的临产胎鼠大脑皮质分离出相应病毒,病理学检查等确诊发现了侵袭性脑膜脑炎性病理改变,证实HCMV可以小鼠宫内传播至CNS。1.0ml组与0.5ml组胎鼠RT－PCR产物浓度明显高于0.25ml组及对照组,而1.0ml组与0.5ml组间亦有明显差异。电泳结果显示对照组与0.25ml组胎鼠未见阳性条带,而1.0ml组胎鼠特异性条带信号强于0.5ml胎鼠,仅略低于同组母鼠。原位杂交显示CaM mRNA不但出现在1.0ml组胎鼠大脑皮质大神经元胞核及胞浆内,在中小神经元及胶质细胞的胞核及胞浆亦有高密度表达,阳性细胞的突起中亦有弱信号存在。结论 本研究结果揭示先天性感染HCMV胎鼠大脑皮质内CaM mRNA表达量明显增加,且神经元及胶质细胞均有表达,并与感染剂量有依赖关系。提示CaM mRNA表达增高可直能直接参与了HCMV先天性感染脑损害的过程。     

不同月龄大鼠血清IL-2、IL-4、IL-6含量比较

目的：比较不同月龄大鼠免疫功能及抗氧化能力的差异。方法：选择15、25月龄健康雄性SD大鼠各10只，以3月龄青年鼠10只为对照组。采用放免法测定血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)含量，并计算大鼠胸腺体重指数；采用化学法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力，丙二醛(MDA)含量。结果：衰老大鼠胸腺体重指数及IL-2、IL-4明显下降，IL-6水平升高SOD、GSH-PX活力下降，MDA含量增高，并且变化与月龄有关。结论：不同月龄大鼠衰老状况各有特点，不同年龄阶段应采用不同方法延缓衰老。     

化浊清脑合剂对血管性痴呆模型大鼠海马CA1区bcl-2、Bax基因表达的影响

以高脂饮食＋缺血再灌注诱发血管性痴呆大鼠模型，运用免疫组织化学方法观察海马CA1区bcl-2、Bax基因表达情况，并以化浊清脑合剂进行干预。结果发现模型大鼠海马CA1区bcl-2、Bax基因表达增强，Bax尤为明显，bcl-2／Bax比值变小，化浊清脑合剂可以逆转这种改变。表明化浊清脑合剂可以抑制模型大鼠海马神经细胞凋亡基因Bax的表达，从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。     

成年期甲状腺功能减退对雄性小鼠海马神经颗粒素表达的影响

成年雄性昆明种小鼠分为对照组、丙基硫氧嘧啶(PTU)组、PTU+T4组,造模8周后,免疫组化和Western印迹法检测神经颗粒素(Ng)表达,发现甲状腺功能减退(甲减)小鼠海马区Ng表达降低,用T4治疗可使之恢复,提示海马内Ng减少可能是成年期甲减雄性小鼠认知功能受损的机制之一.     

高血压和Ⅱ型糖尿病患者血清瘦素水平分析

目的研究中老年高血压和Ⅱ型糖尿病患者的血清瘦素(Leptin)水平,以及内皮素(ET)、胰岛素(Ins)对血清瘦素水平的影响.方法采用放射免疫法测定201例高血压病与166例Ⅱ型糖尿病患者的血清瘦素水平,观察其与性别、年龄、体重指数(BMI)、脂肪百分比(%Fat)、空腹血糖(FBS)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三脂(TG)、内皮素(ET)、血浆胰岛素(Ins)等指标的关系.结果高血压和Ⅱ型糖尿病患者BMI、Fat、FBS、HDL-C和TG等五项指标差异显著;多元线性相关结果显示,瘦素与ET呈负相关,与BMI、Fat呈正相关;在逐步回归分析中,HDL-C和ET最后进入方程.结论高血压和Ⅱ型糖尿病患者的血清瘦素水平无显著差异,影响血清瘦素水平的因素,除BMI和Fat外,主要为血浆内皮素,与血浆胰岛水平无关.     

成年期甲状腺功能异常对患者空间记忆和物体记忆的影响

目的 探索成年期甲状腺功能异常对患者空间记忆和物体记忆的影响。方法 选择2013年3至11月在安徽医科大学第一附属医院内分泌科门诊就诊的甲状腺功能异常的患者,按甲状腺素水平将患者分为甲状腺功能亢进组（甲亢组,42例）和甲状腺功能减退组（甲减组,16例）,并按是否存在甲状腺相关抗体分为抗体阳性和抗体阴性亚组,收集患者背景资料,采用九盒迷宫实验检测空间记忆和物体记忆,以27例健康体检者为对照。采用SPSS 17.0进行统计学分析,组间差异比较采用t检验、单因素方差分析、秩和检验或χ2检验。结果 与对照组相比,甲亢患者的空间参考（z=2.407,P=0.016）和物体再认（z=7.553,P〈0.001）错误分值和甲减患者的物体再认（z=6.221,P〈0.001）错误分值显著增高;甲亢抗体阳性者的空间参考（z=3.695,P〈0.001）、空间工作（z=2.693,P=0.007）和物体再认（z=6.415,P〈0.001）及甲减抗体阳性者的空间工作（z=2.574,P=0.010）、物体再认（z=5.655,P〈0.001）错误分值显著增加,甲亢和甲减抗体阴性者的物体再认错误分值也显著增加（z=6.699、5.422,均P〈0.001）。结论 甲状腺功能障碍患者（尤其是甲状腺相关抗体阳性者）存在一定程度的认知功能损害,自身免疫因素可能参与其中。