AEP大鼠外周血淋巴细胞的分离及其影响因素的探讨

目的 研究分离急性水肿型胰腺炎（AEP）大鼠外周血淋巴细胞的方法和技巧。方法 采用皮下注射蛙皮素缩胆囊肽（caenllein）的方法诱发AEP大鼠模型，以1％EDTA处理过的采血空针和离心管采集和储存血液，PBS液稀释血样，离心机转速2500r／min，18-20℃离心30min，收集淋巴细胞。结果 通过上述改良方法，能提高淋巴细胞的纯度、获得率和细胞活力，满足实验要求。结论 我们探索出成熟而有效的提取大鼠外周血淋巴细胞的试验步骤和技巧。为各项基础和临床研究奠定较为坚实的试验基础。     

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(PPAR8)是APC/β-catenin/Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一,其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生.本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法(TUNEL)观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响.     

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(PPAR8)是APC/β-catenin/Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一,其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生.本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法(TUNEL)观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响.     

糖原合酶激酶3β在轻型/重症急性胰腺炎细胞模型中的表达

目的 探讨糖原合酶激酶3β(GSK3β)在轻型/重症急性胰腺炎发病中的表达及作用方法 采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别构建轻型急性胰腺炎(MAP)和重症急性胰腺炎(SAP)的细胞模型,分别在2、4、8、12、24 h收集细胞培养基上清,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测淀粉酶、脂肪酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的表达变化,流式细胞术检测细胞凋亡率及坏死率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测GSK3β及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、-8、-9 mRNA表达变化.结果 雨蛙素组和雨蛙素+脂多糖组各时间点淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6较对照组均增高,且在大多数时间点,雨蛙素+脂多糖组组比雨蛙素组水平更高,开始上调时间相同或更早(P＜0.05).刺激24 h后,雨蛙素组凋亡率[(19.2±0.9)％]显著高于雨蛙素+脂多糖组[(10.2±0.5)％,P ＜0.05].雨蛙素组坏死率[(5.8±0.3)％]显著低于雨蛙素+脂多糖组[(13.6±0.7)％,P＜0.05].SAP组的坏死/凋亡比值是MAP组的5倍.GSK3β的mRNA水平在雨蛙素组中是2h短暂下调[相对表达量为(0.5±0.1)倍]后于8h显著上升[相对表达量为(3.0±1.1)倍,P ＜0.05],然后又逐步下降;而在雨蛙素+脂多糖组中则是是8h才缓慢上调[相对表达量为(1.8±0.6)倍,P＜0.05],至24 h达到高峰[相对表达量为(3.6±0.3)倍,P＜0.05].GSK3β和Caspase-3 mRNA水平均有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别建立MAP和SAP细胞模型可行;GSK3β在MAP和SAP中可能通过促进腺泡细胞凋亡来起作用.     

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(PPAR8)是APC/β-catenin/Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一,其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生.本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法(TUNEL)观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响.     

低位直肠癌直肠系膜、盆腔侧方淋巴结转移规律分析

目的研究低位直肠癌直肠系膜、盆腔侧方淋巴结转移和微转移规律。方法联合运用大组织切片与组织芯片技术,研究67例全直肠系膜切除（total mesorectal excision,TME）、盆腔侧方淋巴结清扫手术标本。结果直肠系膜淋巴结癌转移30例,微转移10例,29.6%转移淋巴结位于直肠系膜外带。肿瘤远端、肿瘤旁和肿瘤近端直肠系膜内淋巴结转移的检出例数分别为4、32和19例,与肿瘤分化程度相关。9例标本存在环周切缘癌浸润（circumferential resection margin involvement,CRMI）,2例见微转移。盆腔侧方淋巴结癌转移、微转移分别为12例和10例,与肿瘤分化程度、浸润深度相关。结论按照TME原则手术,完整切除包裹在盆腔筋膜内的直肠系膜,可提高局部肿瘤廓清率,降低CRMI发生率。低位直肠癌盆腔侧方淋巴结转移较常见,应合理制定手术范围。     

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(PPAR8)是APC/β-catenin/Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一,其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生.本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法(TUNEL)观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响.     

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(PPAR8)是APC/β-catenin/Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一,其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生.本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法(TUNEL)观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响.     

人结直肠癌细胞株研究及使用现状

结直肠癌细胞株是研究结直肠肿瘤癌变、浸润转移机制、探寻新的治疗药物及策略的理想模型。然而,目前存在结直肠癌细胞株数目众多、质量参差不齐以及研究者对其生物学特性重视不足等众多问题,导致结直肠癌研究中对细胞株的选择及使用不规范,影响实验结果的准确性,甚至可能得出错误结论。本文对迄今已建立的人结直肠癌细胞株进行整理分类,从其建立和应用、分类与选择、使用现状与存在问题3方面进行总结。     

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(PPAR8)是APC/β-catenin/Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一,其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生.本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法(TUNEL)观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响.