抗角蛋白14单克隆抗体对无血清培养角质形成细胞增殖的影响

目的：建立一种无血清传代培养人角质形成细胞（KC）的方法,并观察角蛋白14单克隆抗体（anti-K14 mAb）对无血清培养人角质形成细胞体外增殖的影响。方法：应用角质形成细胞无血清培养基（KC-SFM）添加重组表皮生长因子（EGF）和牛垂体浸出液（BPE）传代培养角质形成细胞,培养均至第3代时于培养基中加人不同浓度的anti-K14 mAb,用MTT法观察对角质形成细胞增殖的影响。结果：应用无血清培养基成功地传代培养了角质形成细胞,MTT法结果显示各浓度组对培养的角质形成细胞的增殖有显著抑制作用并有浓度依赖性。结论：建立了一种无血清培养人角质形成细胞的方法a,nti-K14mAb对人角质形成细胞体外的增殖有显著抑制作用。     

药物性皮炎临床分析

我院自1990-10～1994-10,收治药疹人院患129例,现分析报告如下。     

莳萝精油及提取物的化学成分和药理活性的研究进展

莳萝为伞形科植物莳萝Anethum graveolens的全草,是一种典型的维吾尔族药物,在我国各地均有栽培或野生资源。莳萝精油是从莳萝全草中提取的植物挥发油,文献报道莳萝精油的主要成分为α-水芹烯、柠檬烯和香芹酮,莳萝提取物的主要成分为酚类及黄酮类化合物,其药理活性主要包括镇痛、抗炎、抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病、降胆固醇、杀虫和肝保护等。综述了莳萝精油及提取物的化学成分和药理活性的相关研究,以期为莳萝的深入研究与应用提供参考,推动民族医药产业的现代化进程。     

结节性红斑的诊疗进展

结节性红斑是以皮下脂肪炎症反应为特征的炎症性疾病,临床表现为双下肢疼痛性红斑。病因主要包括特发性、感染、自身免疫性疾病、妊娠、药物、肿瘤等。相关检查包括皮损活检、血沉、抗“O”、结核试验、胸片、血常规等。应该对症对因治疗。如非甾体抗炎药、糖皮质激素、碘化钾、沙利度胺等免疫抑制剂可以用于严重难治性病例。中医中药治疗及物理治疗也有较好疗效。     

血清AFU活性测定在原发性肝癌诊断上的价值

血清甲胎蛋白（AFP）的测定在原发性肝癌（PHC）的诊断上已广泛应用，但AFP对PHC的阳性检出率仅有60％—70％左右，尤其是低滴度AFP的PHC患者易被误诊和漏诊。因此有必要寻找一种更为敏感，特异的肿瘤标志物来提高PHC的诊断率。1984年法国学者Deugnier等报道α－L－岩藻糖甘酶（AFU）可做为PHC的血清标志物，以后又被学者所证实。现报道如下。1材料与方法1．1正常对照组60例，系健康献血员。1．2病人组160例，其中PHC56例．肝硬化38例，慢性肝炎30例，其它恶性肿瘤36例，所有患者均经临床化验．CT及B超、病理检查明确诊断。1…     

人角质形成细胞中K14基因及蛋白表达与角蛋白14反义寡核苷酸的抑制效应

背景:反义药物的研究仍然是当前生物医学领域较为活跃的热点之一,其具有高效特异的优势,作为基因治疗的途径已受到许多研究者的关注。目的:观察脂质体介导角蛋白14反义寡核苷酸对人角质形成细胞K14基因和蛋白表达及体外增殖活性的影响。设计:单一样本观察。单位:解放军第四军医大学西京医院皮肤科。材料:人表皮角质形成细胞、K14寡核苷酸基因片段(全硫代修饰,以上序列均由上海生工生物工程公司合成)。反转录酶、TaqDNA聚合酶均购自Invitrogen公司,K14单抗购自Antibody公司,SABC试剂盒购自博士德。EPlCS-PRO-FILEⅡ流式细胞仪(美国Coulter)。方法:人表皮角质形成细胞原代培养,3～10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导入角质形成细胞,并设空白组作对照。应用流式细胞仪、反转录聚合酶链式反应和免疫组化方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响。主要观察指标:寡核苷酸转染人角质形成细胞后对角质形成细胞增殖和K14表达的影响。结果:①反转录聚合酶链反应产物电泳显示:各组均出现特异的K14基因条带,反义组基因表达明显低于正义组、错义组和空白组。正义组、错义组和空白组K14/β-actin比值相近(P>0.05);而反义组明显低于前述3组(F=47.554,P<0.01)。②免疫组化法检测K14蛋白表达:培养的角质形成细胞均表达一定水平的K14,加入反义寡核苷酸(ASODN)后,K14表达明显减少,20μmol/L浓度的反义寡核苷酸即可显著抑制K14的表达;而对照细胞组K14的表达没有明显变化。③流式细胞仪检测DNA含量变化:经K14反义寡核苷酸处理细胞48h,可见细胞处于G1期细胞比例明显上升(74.6%),S期细胞比例明显下降(19.4%),而正义组,错义组及空白组均无此变化。结论:反义寡核苷酸可特异地抑制K14的合成,从而抑制人角质形成细胞的增殖。     

反义寡核苷酸阻遏角蛋白14的表达

目的 研究脂质体介导角蛋白K14反义寡核苷酸(ASODN)阻遏人角质形成细胞K14基因和蛋白的表达及抑制体外增殖活性的效果.方法 人表皮角质形成细胞原代培养,3~10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导入角质形成细胞,应用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化(SABC)方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响.结果 脂质体介导的K14反义寡核苷酸转染角质形成细胞后,能有效地抑制角质形成细胞中K14基因的表达;48h后可阻遏K14蛋白表达;流式细胞仪检测见反义寡核苷酸处理组细胞周期发生明显改变,G₁期细胞百分率上升,S期细胞百分率下降.而正义寡核苷酸1组、错义寡核苷酸组及空白对照组均无此变化.结论 应用反义技术封闭K14基因,可以阻遏角蛋白K14基因和蛋白的表达,并可以抑制体外培养的角质形成细胞的增殖.     

毛诃子化学成分及药理作用研究进展

毛诃子是使君子科植物毗黎勒的干燥成熟果实,主要分布在我国西藏、云南等地区,是藏族医学体系中广泛应用的药物之一。毛诃子化学成分复杂,包括鞣质、甾体、萜类、黄酮、木脂素等类。毛诃子在藏族医学体系中用于治疗各种隆型、赤巴型及培根型疾病;在中医体系中,可用于治疗热症、泻痢及病后虚弱。现代药理学研究表明,毛诃子有抗氧化、抗炎、抑菌、降血糖、抗肿瘤等活性,可以用于神经退行性疾病、肝肾损伤、癌症等的治疗。对毛诃子的化学成分及药理作用进行总结归纳,以期为其在疾病治疗中的深入研究及开发应用提供参考。     

角蛋白K14反义寡核苷酸对角质形成细胞增殖的影响

目的：研究角蛋白K14反义寡核苷酸(ASODN)对人角质形成细胞(KC)体外增殖活性的影响。方法：利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导人体外培养的角质形成细胞，应用细胞生长抑制实验、透射电镜(TEM)和流式细胞仪(FCM)检测ASODN对角质形成细胞的增生、超微结构改变和细胞增殖周期的影响。结果：脂质体介导的K14反义寡核苷酸组KC增殖活性受到明显抑制；电镜下可见KC增殖活性受到抑制的改变，角蛋白合成明显减少；流式细胞仪检测见细胞周期发生明显改变，G1期细胞百分率上升，S期细胞百分率下降。而正义寡核苷酸组、错义寡核苷酸组及空白对照组均无此改变。结论：K14反义寡核苷酸可抑制KC体外增殖活性，应用反义寡核苷酸技术封闭K14基因，有望为银屑病的基因治疗提供新的思路。     

斯皮仁诺短程疗法治疗花斑癣

斯皮仁诺(sporanox)是伊曲康唑的商品名称，是比利时杨森公司研制出来的一种新型口服高效广谱抗真菌药物，对真菌有明显的抗菌作用，我们于1998-07～1998-11采用短程疗法治疗花斑癣病人30例，取得了满意疗效，报告如下。