光生物素DNA探针的制备及其检测恶性疟原虫DNA的研究

本研究使用光生物素(PHOTOPROBE~(TM) Biotin)标记恶性疟原虫(P.f.)全基因组DNA,含P.f.cDNA片段的重组质粒DNA(C7)及克隆的P.f.cDNA片段(P9-25)等作为探针,并以斑点杂交试验检测靶DNA。实验结果显示,光生物素标记法简单、快速和安全;标记的探针活性较高,于-20℃贮存10个月无明显降低。用生物素化的P.f.全基因组DNA及C7探针分别可检出低至125pg和250pg的纯化的P.f.DNA。     

输液监护系统装置的研制及临床应用

输液是临床治疗最基本的方法之一。通过多年的临床护理工作实践,我们深深体会到:加强输液病人的监护急需解决的问题,一是预知输液完毕的确切时间;二是及时掌握正在输液病人的人数;三是连续输液时确定换输液瓶与加药时间;四是出现意外时可     

日本血吸虫病人群同种型抗体应答的特征及其流行病学意义

80年代中期以来,世界防治血吸虫病的中心措施已由控制中间宿主(灭螺)过渡为实施化疗,但影响人群化疗、限制和控制传播效果的主要因素是化疗后发生再感染。在日本血吸虫病,化疗后的再感染率很高。从防治决策的角度,研究可能指示人群易感状态的血清学指标具有重要的重论和实际意义,为构建预测性诊断试验,以指示人群感染和/或免疫状态提供理论依据。     

日本血吸虫中国大陆株基因重组抗原Sj22.6kDa的核苷酸序列分析

目的：对ｐＧＳｊ２４克隆化基因进行核苷酸序列分析,了解其编码蛋白的属性。方法：常规制备ｐＧＳｊ２４克隆化基因并重组入测序载体Ｍ１３ｍｐ１９,以ＤＹＥＰＲＩＭＥＲ荧光测序试剂盒进行核苷酸序列测定。分别以ＤＮＡＳＩＳ和ＧＯＬＤＫＥＹ软件对序列资料进行分析。结果：ｐＧＳｊ２４克隆化基因长８４０ｂｐ,含一开放阅读框,可编码一分子量为２２．６ｋＤａ的蛋白质。开读框上游和下游均有终止密码子。该基因与已发表的日本血吸虫２２．６ｋＤａ蛋白的编码基因同源性达９５％,编码区同源性达９９．７％。在该基因内有一段典型的ＥＦ－Ｈａｎｄ钙结合区序列,并有内质网导肽、微体导向信号等功能位点。预测该蛋白质内可能的抗原决定簇位置为第２９～３２、６３～６８和８７～１０１等氨基酸片段。结论：ｐＧＳｊ２４克隆化基因为日本血吸虫２２．６ｋＤａ抗原编码基因     

提高矿泉水中偏硅酸检测质量的探讨

目的：提高矿泉水中偏硅酸的检测质量，使硅钼黄分光光度法得到更好的应用。方法：于2004年2月～2005年9月试验改进了外加适量浓氨水配制的7种钼酸铵溶液，于不同时期进行H2SiO3检测，每次与新配原法比较；分析了草酸影响显色稳定性的原因，同时考察了磷酸盐的干扰程度和消除效果。结果：钼酸铵溶液含氨可有效提高溶液的稳定性，浓氨水≤50mL／L加入量不影响H2SiO3测定结果；经实验5mg／LPO4^3-会产生2．7mg／LH2SiO3正向干扰误差，2ml 70g／L草酸溶液、1ml 70g／L草酸溶液和2ml 150g／L酒石酸溶液最多可掩蔽PO4^3-分别为100、50、50mg／L的干扰量；2ml70g／L草酸溶液依法加入量是引起显色稳定时间限制在15min内测完的主要原因。结论：草酸会缓慢分解硅钼黄，不利于大批量定量分析。减半使用现量草酸溶液或使用酒石酸溶液，可较大提高该法显色稳定性，若无磷酸盐干扰，不加草酸更好。外加50mL／L浓氨水配制钼酸铵溶液可提高试剂溶液的稳定性，至少可稳定510d以上，在实际工作中应用既节省了试剂又保障了检验质量，建议推广使用。     

日本血吸虫中国大陆株基因重组抗原Sj 22.6kDa的核苷酸序列分析

目的：对ｐＧＳｊ２４克隆化基因进行核苷酸序列分析，了解其编码蛋白的属性。方法：常规制备ｐＧＳｊ２４克隆化基因并重组入测序载体Ｍ１３ｍｐ１９，以ＤＹＥＰＲＩＭＥＲ荧光测序试剂盒进行核苷酸序列测定。分别以ＤＮＡＳＩＳ和ＧＯＬＤＫＥＹ软件对序列资料进行分析。结果：ｐＧＳｊ２４克隆化基因长８４０ｂｐ，含一开放阅读框，可编码一分子量为２２．６ｋＤａ的蛋白质。开读框上游和下游均有终止密码子。该基因与已发表的日本血吸虫２２．６ｋＤａ蛋白的编码基因同源性达９５％，编码区同源性达９９．７％。在该基因内有一段典型的ＥＦ－Ｈａｎｄ钙结合区序列，并有内质网导肽、微体导向信号等功能位点。预测该蛋白质内可能的抗原决定簇位置为第２９－３２、６３－６８和８７－１０１等氨基酸片段。结论：ｐＧＳｊ２４克隆化基因为日本血吸虫２２．６ｋＤａ抗原编码基因。     

光生物素化重组DNA探针对恶性疟病人的检测研究

本研究采用光生物素(PHOTOPROBE~(TM)BIOTIN)标记重组质粒pPF14作为探针,以斑点杂文试验检测恶性疟病人血样。共检测恶性疟病人35例,阳性29例;恶性疟原虫和间日疟原虫混合感染者1例为阳性。总计检测36例,阳性30例,阳性符合率为83.3％;正常人血样33例,阴性30例,阴性符合率为91％。此外,阳性检出率与原虫密度之间基本呈正相关,检出最低的虫血症水平为0.005％。     

日本血吸虫病血清流行病学研究——Ⅰ.三个不同流行区人群抗体反应的年龄分布调查

本文报道了应用日本血吸虫肠相关抗原的间接血凝试验(IHA),对一个现存的和两个已经基本控制传播的血吸虫病流行区人群进行血清流行病学的调查结果。发现现存的流行区的人群抗体水平较其他两个地区明显为高。而且三个地区人群抗体阳性者的抗体滴度平均水平(GMRT)的年龄分布曲线也具不同的特征,现存流行区的低年龄组GMRT较高年龄组为高,而已经控制传播的地区低年龄组抗体水平则为0。认为分析当地低年龄组人群抗体水平,似可作为评价传播是否阻断的依据,并可作为监测流行趋势的工具。     

日本血吸虫(中国大陆株)22.6kDa重组抗原对小鼠免疫保护性的初步研究

目的：为研究日本血吸虫（中国大陆株）22．6kDa抗原的免疫保护性。方法：将其编码cDNA经PCR扩增后亚克隆入载体质粒PGEX—1λt进行表达，并用重组抗原免疫了一批昆明鼠。结果：与对照组相比，重组抗原免疫小鼠获得了38．93％的减虫率。结论：证明重组的日本血吸虫22．6kDa抗原可诱导宿主抗血吸虫感染的部分保护力。     

桂枝茯苓丸加减治疗卵巢囊肿验案

患者陈××,39岁,92年6月因患于宫肌瘤而行子宫全切术。术后2个月复查,发现左侧卵巢可触及。术后8个月,开始出现腹痛,妇科检查发现左侧附件触到如鹅蛋大肿块。囊性感,触痛不明显。B超检查显示“左侧有压之变形的7.3×6.1cm囊性占位性病变”。鉴于手术后出现如此大包块,经会诊初步诊断为卵巢囊肿。为排除炎性包块之可能,首先给予抗炎治疗,每日给青霉素800万单位,甲硝唑500ml静滴。6