离体大白鼠心脏钙反常时超氧阴离子歧化酶、脂质过氧化物及乳酸脱氢酶的变化

近年关于心脏再灌流综合征的研究引起了国内外的重视,利用钙反常(CP)的模型来研究其机理也是常用的一种模型,所谓钙反常即心脏经短时无钙灌注后再复钙灌注时大量Ca~(2+)进入心脏细胞引起心肌严重损伤。本室利用Wistar大白鼠离体心脏作钙反常模型,观察超氧阴离子歧化酶(SOD),脂质过氧化物(LPO)和乳酸脱氢酶(LDH)在钙反常务期的变化以及它们之间的关系,目的是了解钙反常时心肌受损是否与氧自由基(OFR)损伤有关。     

重组Akt腺病毒的构建及其在肝硬化大鼠肝脏中的表达

目的:探讨持续活化Akt且带有HA标签(myr-HA-Akt)基因的重组腺病毒在肝硬化大鼠肝脏中的表达特性。方法:酶切正向插入目的基因的真核表达载体pcDNA3.1-myr-HA-Akt,获得myr-HA-Akt cDNA后，将其定向克隆到穿梭质粒pDC316中,然后将重组质粒与病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染293 细胞,获得复制缺陷型重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt,并进行扩增、纯化。通过观察腺病毒感染293细胞后是否出现细胞病变效应;PCR和基因测序方法对所构建病毒进行鉴定，并采用TCID50法检测病毒滴度。自尾静脉注射重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt感染肝硬化模型大鼠。免疫印迹法检测大鼠肝组织内Akt 和p-Akt蛋白的表达。结果:感染的293 细胞出现明显的细胞病变效应，PCR产物电泳证实重组腺病毒的存在，基因测序证实myr-HA-Akt的cDNA正确插入穿梭质粒且与pBHGloxΔE1,3Cre正确同源重组;病毒滴度为5.5×1011 vp/mL。从蛋白水平证实感染病毒的肝硬化模型大鼠有外源性Akt基因的表达。结论:构建的重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt能有效地感染肝硬化模型大鼠,并可在模型大鼠中正确转录和翻译，为进一步研究腺病毒介导的Akt基因对肝硬化的治疗奠定了实验基础。     

大鼠心钙反常灌流液中丙二醛等物质含量变化

用Langendorff方法复制大白鼠离体心钙反常模型,收集冠脉流出液并测定其中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果表明,钙反常组与对照组比较,复钙期SOD与LDH显著增多(P<0.01),而MDA未见改变,故不支持氧自由基参与无钙灌注5min后复钙灌注引起的钙反常损伤的说法。     

钨对内毒素血症小鼠肝,肺损伤的保护作用

本文以内毒素血症为基本模型，实验前在食物和饮水中渗入钨酸钠饲养小鼠３周，以证实钨对内毒素血症小鼠肝、肺损伤的保护作用。实验发现，钨处理组动物肝组织钨／钼比值明显升高，ＭＤＡ产生减少，ＳＯＤ活性下降较少；肺组织ＭＤＡ产生亦减少。结果表明钨对内毒素血症小鼠的肝、肺损伤有保护作用。提示来自嘌呤氧化酶的氧自由基参与了内毒素血症肝、肺损伤的发生、发展。     

内毒素休克狗肺解聚功能受损机制探讨

麻醉狗注内毒素前左心血TXB_2/6-keto-PGF_(1α)及PAR均明显低于右心血;内毒素休克时,左、右心血TXB_2/6-keto—PGF_(1α)及PAR明显上升,且左、右心血之间的浓度梯度差消失;消炎痛明显减轻内毒素休克时的前述改变。注内毒素前及内毒素休克早期TXB_2/6-keto-PGF_(1α)与PAR之间呈显著正相关。结果提示:肺解聚功能与肺代谢TXA_2、PGI_2有关;内毒素休克早期,肺代谢TXA_2,PGI_2的失调是肺解聚功能受损原因之一。     

钨对内毒素血症小鼠肝、肺损伤的保护作用

本文以内毒素血症为基本模型，实验前在食物和饮水中渗入钨酸钠饲养小鼠３周，以证实钨对内毒素血症小鼠肝、肺损伤的保护作用。实验发现，钨处理组动物肝组织钨／钼比值明显升高，ＭＤＡ产生减少，ＳＯＤ活性下降较少；肺组织ＭＤＡ产生亦减少。结果表明钨对内毒素血症小鼠的肝、肺损伤有保护作用。提示来自嘌呤氧化酶的氧自由基参与了内毒素血症肝、肺损伤的发生、发展。