红景天苷类似物合成及抗二苯基苦基苯肼自由基活性研究

目的:合成红景天苷类似物,并初步分析评价对2,2-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH)的清除能力。方法:以O-乙酰基溴代葡萄糖、O-乙酰基溴代半乳糖为供体,以苯甲醇、苯乙醇取代物为糖配体合成红景天苷类似物。采用微孔板定量法分析测定其对DPPH的清除能力。结果:合成了9个目标化合物,确定其在清除DPPH·反应达到50%时的IC50(μgDPPH·/ml)。结论:所合成类似物皆具有一定的清除DPPH·的能力,尤其是化合物1-(4-羟基苯基)甲基-β-D-葡萄糖苷和1-(4-羟基苯基)甲基-β-D-半乳糖苷,其IC50分别为4.57μg/ml,5.15μg/ml,优于阳性对照维生素C(IC50:12.32μg/ml),显示有很好抗氧化能力。     

基于互穿网络凝胶构建小鼠胰岛仿生微环境的研究

目的制备甲基丙烯酰化明胶/丝胶(GelMA/SS)互穿网络水凝胶支架,构建胰岛(Islets)仿生微环境。方法从6周龄美国癌症研究所(ICR)小鼠提取胰岛并经双硫腙染色鉴定。设置组织培养板(TCP)培养为对照组,单独GelMA以及不同质量比GelMA/SS(1∶1、1∶2、1∶4、1∶8)培养为实验组,分别记为G1S1、G1S2、G1S4和G1S8。扫描电镜下观察微观形态,流变学评价支架黏弹性,支架浸提液培养L929细胞评估生物相容性。钙黄绿素-乙酰甲氧基甲酯(AM)/碘化丙锭染色评价胰岛存活,活性氧(ROS)试剂盒评价拮抗ROS产生情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测葡萄糖刺激胰岛素释放量。两组数据间比较采用t检验,多组数据组间比较采用方差分析。结果分离胰岛呈类圆形;水凝胶弹性随丝胶含量增加而下降,至GelMA/SS=1∶8时已不能成胶(G">G’);噻唑蓝(MTT)结果显示实验组均具有良好的生物相容性,且G1S4组显示出最高的细胞活力[(120.67±3.33)%]和显著拮抗ROS产生能力(5.18±0.48);活/死细胞染色显示实验组能够促进胰岛存活;葡萄糖刺激胰岛素释放(GSIS)结果显示在低糖刺激下G1S4具有最高的胰岛素分泌量[(7.73±0.52)μg/L],而高糖刺激下实验组与对照组差异无统计学意义(F=0.395,P>0.05)。结论GelMA/SS水凝胶具有良好的生物相容性和葡萄糖刺激响应能力,是构建仿生微环境,用于胰岛培养及移植的理想载体。     

红景天苷类似物对低糖低血清诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:评价红景天苷类似物对低糖低血清培养基诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法 :体外培养PC12细胞,采用低糖低血清培养基制备损伤模型。给予60μmol/L、300μmol/L、1 000μmol/L不同浓度类似物预保护24 h。经低糖低血清损伤24 h后,观察其对细胞形态和活力的影响。结果:部分红景天苷类似物能拮抗低糖低血清培养基损伤PC12细胞活力下降。结论:部分红景天苷类似物对低糖低血清诱导PC12细胞损伤具有保护作用。     

Src抑制的蛋白激酶C底物在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓中的表达及其意义

目的 研究Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C kinase substrate,SSeCKS)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)进程中的表达情况,探讨其在EAE病理过程中可能的功能及意义,为多发性硬化(mul...     

外科综合实验室开放运行下面临的问题及解决途径

本院外科综合实验室成立于2009年8月,旨在为临床相关科室的研究生度临床医生提供较好的科研平台.自成立以来,利用该科研平台从事科研的人员逐步增多,目前已达到近40人,并有持续增多的趋势.面对日益增多的科研人员进入该平台,存在的问题也日益突出,如何较好的发挥该平台的功能,完善管理,已然呈现面前.本文将就实验室在开放运行下所面临的问题进行简单介绍,并针对所存在的问题提出一些切实有效的解决办法.     

红景天苷类似物合成及微孔板定量法评估其抗氧化能力

目的:合成红景天苷类似物,并初步分析评价其抗氧化能力。方法:以O-乙酰基溴代葡萄糖、O-乙酰基溴代半乳糖为糖基供体,芳环不同取代的苯甲醇、苯乙醇为糖基配体通过Koenigs-Knorr法制备红景天苷类似物,并采用微孔板定量法分析测定其对2,2-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH.)的清除能力。结果:合成了10个类似物糖苷,确定了其在清除DPPH.反应达到50%时的IC50(μmol/L)。结论:所合成类似物3-(3,4,5-三羟基苯基)丙基-β-D-葡萄糖苷和3-(3,4,5-三羟基苯基)丙基-β-D-半乳糖苷具有较好的抗氧化能力,其IC50分别为36.7μmol/L和39.7μmol/L,优于阳性对照维生素CIC50(54.6μmol/L)。     

基于互穿网络凝胶构建小鼠胰岛仿生微环境的研究

目的制备甲基丙烯酰化明胶/丝胶(GelMA/SS)互穿网络水凝胶支架,构建胰岛(Islets)仿生微环境。方法从6周龄美国癌症研究所(ICR)小鼠提取胰岛并经双硫腙染色鉴定。设置组织培养板(TCP)培养为对照组,单独GelMA以及不同质量比GelMA/SS(1∶1、1∶2、1∶4、1∶8)培养为实验组,分别记为G1S1、G1S2、G1S4和G1S8。扫描电镜下观察微观形态,流变学评价支架黏弹性,支架浸提液培养L929细胞评估生物相容性。钙黄绿素-乙酰甲氧基甲酯(AM)/碘化丙锭染色评价胰岛存活,活性氧(ROS)试剂盒评价拮抗ROS产生情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测葡萄糖刺激胰岛素释放量。两组数据间比较采用t检验,多组数据组间比较采用方差分析。结果分离胰岛呈类圆形;水凝胶弹性随丝胶含量增加而下降,至GelMA/SS=1∶8时已不能成胶(G">G’);噻唑蓝(MTT)结果显示实验组均具有良好的生物相容性,且G1S4组显示出最高的细胞活力[(120.67±3.33)%]和显著拮抗ROS产生能力(5.18±0.48);活/死细胞染色显示实验组能够促进胰岛存活;葡萄糖刺激胰岛素释放(GSIS)结果显示在低糖刺激下G1S4具有最高的胰岛素分泌量[(7.73±0.52)μg/L],而高糖刺激下实验组与对照组差异无统计学意义(F=0.395,P>0.05)。结论GelMA/SS水凝胶具有良好的生物相容性和葡萄糖刺激响应能力,是构建仿生微环境,用于胰岛培养及移植的理想载体。     

正交分析法优选半乳糖化羧甲基壳聚糖磁性纳米载体的制备条件

目的:优选半乳糖化羧甲基壳聚糖磁性纳米载体(galactosylated-carboxymethyl chitosan-magnetic iron ox-ide nanoparticles,Gal-CMCS-Fe3O4NP)的制备条件。方法 :采用正交分析试验方法 ,以Fe3O4NP与羧甲基壳聚糖(car-boxymethyl chitosan,CMCS)质量比、pH值和搅拌时间为考察因素,纳米载体的粒径和磁响应性为考察指标。结果 :Fe3O4NP与CMCS的质量比为1∶2、pH值为7、搅拌时间为1 h时为最佳制备条件,最终所制备的Gal-CMCS-Fe3O4NP的平均粒径为20 nm,具有较好的磁响应性。结论:获得较满意的Gal-CMCS-Fe3O4NP的制备条件,纳米载体性状符合要求。     

顶空气相色谱法测定甲壳素生物材料中甲醇残留量

目的：建立一种简便、准确、快速测定生物材料甲壳素中甲醇含量的顶空气相色谱法。方法：运用内标法,选择异丙醇作为内标物,顶空进样量为1.0ml。结果：顶空气相色谱法测甲醇回收率为96.79%～104.21%,相对标准偏差（RSD）为3.4%～4.2%,线性回归方程为：赞Y=8.24×10-2＋6.36×10-3X,相关系数：r=0.9946,有良好的线形关系。结论：本法操作简便、快速,灵敏度高,结果准确可靠,可用于相关生物材料及制品中甲醇含量的测定。     

过氧化氢在中性条件下氧化降解壳聚糖的研究

目的:研究制备不同分子量壳聚糖的方法。方法:壳聚糖的水溶液加入一定量的双氧水,加热搅拌一段时间进行降解。结果:分子量为103万的壳聚糖降解得到分子量5万到94万不等壳聚糖,反应时间、舣氧水的质量百分比、反应温度等因素均可对其产生一定影响。结论:中性条件下双氧水降解壳聚糖成本低,反应条件温和,易处理,产量高,可得到预期分子量的壳聚糖。在降解过程中对降解结果产生影响的因素依次为:双氧水的质量百分比>反应温度>反应时间。