Rip1-Tag2;P-sel-/-小鼠模型的构建

目的构建Rip1-Tag2;P-sel-/-小鼠模型。方法将Rip1-Tag2小鼠与P-选择素敲除(PKO)小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基因型。结果 Rip1-Tag2小鼠与PKO小鼠杂交三代后,Rip1-Tag2;P-sel-/-小鼠模型构建成功。结论将Rip1-Tag2小鼠与PKO小鼠杂交三代后成功建立了Rip1-Tag2;P-sel-/-小鼠模型,并进行繁育。     

Rip1-Tag2;PSGL-1^-/-小鼠模型的构建

目的构建Rip1-Tag2;PSGL^-1-/-小鼠模型。方法将Rip1-Tag2小鼠与P-选择素糖蛋白配体敲除（PSGL-1 KO）小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基因型。结果 Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交3代后,Rip1-Tag2;PSGL-1-/-小鼠模型构建成功。结论将Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交3代后成功建立了Rip1-Tag2;PSGL-1-/-小鼠模型,并进行繁育。     

Slit2-Robo1信号阻断抗体及对照抗体的制备、纯化和鉴定

目的纯化Slit2-Robo1信号阻断抗体(R5抗体)及对照抗体。方法给小鼠腹腔注射杂交瘤3B2.3和CRL-1608细胞,产生的腹水应用凝胶过滤层析法和Protein A亲和层析法纯化R5抗体及对照抗体,并用SDS-PAGE和BCA法检测纯化后单克隆抗体的纯度及浓度。结果单抗纯化后电泳重链和轻链都呈一条带,R5抗体及对照抗体的质量浓度分别为0.986 mg/mL和3.57 mg/mL。结论应用层析法和Protein A亲和层析法纯化抗体,能够得到纯度较高的单克隆抗体。     

血小板上表达的P-选择素对B16细胞分泌肿瘤坏死因子和血管内皮生长因子的影响

目的探讨血小板上表达的P-选择素对B16细胞分泌肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法将B16细胞分别与C57小鼠和P-选择素敲除小鼠的血小板共培养,用ELISA法检测上清中的肿瘤坏死因子和血管内皮生长因子的浓度。结果 B16细胞与C57小鼠的血小板共培养的血清中血管内皮生长因子的浓度明显高于与P-选择素敲除小鼠的血小板共培养的血清中的浓度,差异有统计学意义(P<0.05),而肿瘤坏死因子的浓度差异无统计学意义。结论血小板上表达的P-选择素促进了B16细胞分泌血管内皮生长因子,但对肿瘤坏死因子的分泌则没有影响。     

Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型的构建

目的 构建Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型.方法 将Rip1-Tag2小鼠与P-选择素糖蛋白配体敲除(PSGL-1 KO)小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基冈型.结果 Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交3代后,Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型构建成功.结论 将Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交3代后成功建立了Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型,并进行繁育.     

DMPP对于鸡胚血管形成的抑制作用

目的研究1,1-二甲基-4-苯基哌嗪(1,1-dimethyl-4-phenyl piperazinium,DMPP)对于鸡胚发育期血管新生的作用。方法采用质量浓度为50μg/mL的DMPP溶液局部处理鸡胚绒毛尿囊膜(chickenchorioallantoic membrane,CAM)和鸡胚卵黄囊膜(yolk sac membrane,YSM)表面,分别用肉眼和显微镜观察与被测物作用后CAM膜上血管生成情况和YSM膜血管密度和生长率的变化。结果 DMPP能明显抑制CAM模型血管的生成和YSM模型的血管面积和密度的增长。结论 DMPP可抑制鸡胚血管的形成。     

P-选择素对ApcMin/+小鼠肠道肿瘤的作用

目的: 研究P-选择素(P-selectin)在Apc^Min/+小鼠肠道肿瘤中的作用。方法: 采用P-selectin 基因缺失的基因工程小鼠和肠道肿瘤模型Apc^Min/+小鼠杂交,计数Apc^Min/+小鼠与Apc^Min/+ P-selectin ^-/-杂交小鼠小肠及大肠肿瘤的数目,并测量其肿瘤体积,研究P-selectin对Apc^Min/+小鼠肠道肿瘤的作用。结果: 与Apc^Min/+小鼠相比,Apc^Min/+P-selectin^-/-杂交小鼠在9周龄时肠道肿瘤数目与总负荷明显减少。结论: P-selectin 缺失能够显著抑制Apc^Min/+小鼠肠道肿瘤的生长。     

组织因子单克隆抗体及对照抗体的制备、纯化和鉴定

目的纯化组织因子(TF)单克隆抗体及对照抗体。方法给小鼠腹腔注射杂交瘤8A3和9E10细胞,产生的腹水应用凝胶过滤层析法和Protein A亲和层析法纯化组织因子抗体及对照抗体,并用SDS-PAGE和BCA法检测纯化后单克隆抗体的纯度及蛋白浓度。结果单抗纯化后电泳重链和轻链都呈一条带,TF抗体和对照抗体的最终浓度分别为0.7726mg/ml和0.8592mg/ml。结论应用层析法和凝胶过滤和Protein A亲和分离层析法纯化抗体,能够得到纯度较高的单克隆抗体。