基于代谢组学的水杨酸钠对HEI-OC1细胞损伤作用机制

基于LC-Q-TOF/MS技术探究水杨酸钠对小鼠HEI-OC1毛细胞样细胞中内源性代谢的影响。首先采用不同浓度的水杨酸钠处理HEI-OC1细胞,使用CCK-8法检测细胞存活率的变化。然后观察不同干预时间下水杨酸钠对细胞形态的影响,并利用代谢组学技术进行研究,筛选组间差异代谢产物,分析相关的代谢通路。结果表明,水杨酸钠能够显著抑制HEI-OC1细胞的存活率,且随着浓度的增加,抑制作用增强。同时水杨酸钠能够使细胞形态拉长,并在停止给药后恢复正常。水杨酸钠处理HEI-OC1细胞后共筛选出乳清酸、尿苷、天冬氨酸等18种差异代谢物,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢及嘧啶代谢这两条可能的代谢通路。综上所述,本研究通过代谢组学技术评价了水杨酸钠对HEI-OC1细胞的作用,可为水杨酸钠耳毒性及耳鸣的发生发展研究提供新思路。     

~3H—木犀草素的药代动力学研究

大鼠静脉注射(1185μci/kg)~3H-木犀草素后测定不同时间的血中放射性。采用微型计算机推算其体内各动力学数据,其衰变符合二室模型,α相T_(1/2)α为0.0359小时,β相T_(1/2β)为2.9157小时。     

耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学

建立大鼠血浆中耳聋左慈丸中成分毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的共检测LC-MS/MS定量方法，并运用此方法评价耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学行为。采用甲醇作为蛋白沉淀剂，用蛋白沉淀法处理血浆样本，以甲醇为有机相，0.1%甲酸水溶液为水相，在负离子模式下对毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷进行定量分析方法的建立，并且对所建方法进行方法学考证。选取健康SD大鼠，单次灌胃20 mL/kg（相当于原药10 g/kg剂量）的耳聋左慈丸提取液，运用建立的方法测定在给药后不同时间间隔的待测物质血浆浓度，并利用Phoenix WinNonlin8.3软件经非房室模型拟合计算药代动力学参数。方法学验证结果表明，毛蕊花糖苷（r = 0.993 7）、氧化芍药苷（r = 0.994 6）在0.5 ~ 50 ng/mL范围内线性良好， 松果菊苷（r = 0.993 6）、苯甲酰芍药苷（r = 0.992 6）在1 ~ 100 ng/mL范围内线性良好，4种物质的批间及批内精密度的RSD均小于15%，批间及批内准确度均在85% ~ 115%之间。提取回收率、基质效应和稳定性均满足相关要求。在大鼠单次灌胃耳聋左慈丸提取液后，4种待测物质都发生了较快的吸收和消除，氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的血药浓度-时间曲线中都出现双峰现象；与其他3种物质相比，氧化芍药苷在大鼠血浆中浓度较高，c_max1为（24.40 ± 4.78） ng/mL，c_max2为（22.50 ± 2.70） ng/mL。结果表明，该方法的验证结果符合生物样本分析方法指导原则，可用于评价耳聋左慈丸提取液在大鼠体内的药代动力学行为。     

木犀草素对大鼠腹腔巨噬细胞释放H_20_2的影响

用荧光法研究木犀草素对大鼠腹腔巨噬细胞释放H_2O_2的影响。结果表明,木犀草素在不同浓度(4×10(-7)～10~(-5)mol/L)时,对酵母多糖诱导的大鼠腹腔巨噬细胞H_2O_2释放呈浓度依赖性的抑制,且以木犀草素与巨噬细胞共同培养4h抑制作用最明显。其作用机制有待进一步研究。     

木犀草素的药动学

本文研究了木犀草素(Lut)溶液在兔和大鼠体内的药动学。用荧光光谱法测定兔血浆和尿液中Lut与原儿茶酸(PCA,Lut的一种代谢物)的浓度,以及大鼠胆汁中Lut的含量。根据Lut的多峰药一时曲线建立了一种可定量描述肠肝循环的三室开放模型,并在该模型中增添了振荡项,据此,用自编的非线性算法程序在IBM-PC型微机上拟合和绘制Lut的C-T曲线。求得的主要药动学参数(均值±SD)为:t 1/2(α)和t1/2(β)分别为0.181(±0.1)h和1.66(±0.24)h。转运、重吸收和消除速率常数(k_(12),k_0和k_(10))分别为1.495±0.45h~(-1),0.465±0.08h~(-1)和1.124±0.35 h~(-1)。重吸收率为6.9±2.1％。Vd为1.432±0.45L·kg~(-1)。清除率为588±113μg·kg~(-1)·h~(-1)。家兔12h尿中Lut的累积排泄量约为静注量的37.7％。大鼠6h胆汁中Lut的累积排泄量为给药量的11.2％。比较PCA与Lut的C—T曲线,提示PCA为Lut的一种代谢物。PCA亦经肾排泄。大鼠ig~3H—Lut后迅速吸收,且广泛分布于多种组织,其中以肝和肾组织的放射性同位素含量为最高。