禽流感H5N1亚型病毒感染BALB/c小鼠的免疫应答

目的 研究禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠后对宿主细胞免疫功能和细胞因子水平变化的影响,探讨禽流感H5N1病毒感染哺乳动物的免疫发病机制.方法 选用鹅源禽流感H5N1病毒感染BALB/c小鼠,采用流式细胞仪检测血液和脾脏T淋巴细胞及其亚群的变化,采用ELISA检测血液中细胞岗子(IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-18、IL-10、IL-2)及禽流感H5N1病毒特异性抗体的变化.结果 禽流感H5N1病毒感染可引起对宿主短暂的、可恢复的细胞免疫功能损伤:血液CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞数量于染毒后第2～4天下降(第4天为最低值),脾脏T淋巴细胞数最于染毒后第5～8天下降(第6天为最低值),然后均逐渐恢复到正常水平.染毒后血液细胞因子变化表现为:血清IFN-γ、TNF-α水平下降,IL-4、IL-18、IL-10水平上升,IL-2水平无明显变化.从感染第7天开始检测H5N1禽流感特异性抗体为阳性,抗体水平逐渐升高至实验结束的感染第14天.结论 H5N1禽流感病毒感染可引起宿主T细胞免疫功能低下是其主要的免疫病理改变之一,细胞因子表达失平衡或过多的表达都可能对宿主产生免疫病理损伤.

Abstract：

Objective To study the cell immunity and eytokines responses to avian influenza A H5N1 virus infections in a BALB/c model to better understand the pathogenesis of H5N1 avian influenza disease. Methods Two hundred and twenty BALB/c mice of the infected group were inoculated with 0.1 ml (10-4.875 TCID50) of A/Goose/Guangdong/NH/2003 ( H5N1 ) virus intra-nasally. Fifty control mice received noninfectious allantoic fluid and another fifty control mice received normal sodium. Blood and spleen samples were collected from the live mice every 24 h during the 14 d post-infection. The changes of CD3 + T cells , CD4 + T cells, CD8 + T cells for cell immunity in blood circulation and spleen were detected by flow cytometry. And the cytokines and antibody responses in blood circulation were detected by ELISA. Necropsy was performed on mice that died during the experiment and those euthanized at end of study. Results Avian influenza A( H5N1) virus infections can make damages to the cell immune system transiently. The CD3 + T cells, CD4 + T cells, CDS + T cells declined at 24 days post infection in blood circulation and declined at 5-8 days in spleen, then recovered to the normal level gradually. The eytokines responses to the infections can be detected: the level of IFN-γ,TNF-α declined, IL-4, IL-18, IL-10 increased, and IL-2 changed little. The antibody increased rapidly from day 7 post infection until the end of the study (day 14 post infection). Conclusion Collectively, avian influenza A(H5N1) virus can cause cell immunity deficiency and an imbalance in the level of eytokines, which may contribute to the unusual severity of disease caused by the H5N1 avian influenza virus.     

禽流感的哺乳类动物模型研究进展

N1禽流感为新的人畜共患性疾病,建立良好的哺乳动物模型是进一步深入研究人禽流感防治的重要基础。本文报道了禽流感哺乳动物模型研究进展,对病原株、造模方法、模型的临床特征、病理变化、病毒复制等方面进行归纳,比较了小鼠模型、雪貂模型和非人灵长类动物模型特点。各种禽流感动物模型有各自的优点和缺点,应根据不同的实验目的和实验条件选择合适的病毒株和实验动物进行造模。     

硫酸乙酰肝素蛋白聚糖与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD),是一种中枢神经退行性疾病,主要临床表现为学习记忆、认知和分析能力的进行性减退。目前,AD确切的发病机制尚未清楚,还没有特异有效的治疗方法。1987年,Snow等首次报道了AD病人大脑中硫酸化葡萄糖胺聚糖存在于老年斑、神经原纤维缠结和脑血管淀粉样沉积中。1991年,Celesia等[1]提出了有关AD病因的蛋白聚糖假说。在过去的十多年中,人们对蛋白聚糖在AD发病机制中的作用做了大量的研究,本文将主要对硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparansulphateproteoglycansHSPG)与AD的关系进行综述,讨论HSPG在AD发生…     

剖宫产围手术期合理选用抗生素的临床研究

目的:对剖宫产围手术期应用抗生素预防术后感染的优选抗生素进行探讨.方法:将符合纳入标准的产妇673例随机分为3组:氨苄西林组232例,头孢唑啉钠组223例,头孢曲松钠组218例.氨苄西林组与头孢唑啉钠组于术前半小时、术后立即及术后6小时静脉用药,头孢曲松钠组于术前半小时、术后6小时静脉用药,并评价术后预防感染的效果.结果:3组间的发热率、血象异常升高率差异无统计学意义(P>0.05);氨苄西林组腹部切口感染率分别与头孢唑啉钠组、头孢曲松钠组比较,差异有统计学意义(P<0.05),头孢唑啉钠组腹部切口感染率与头孢曲松组比较,差异无统计学意义(P>0.05);3组患者术后均未出现宫腔感染、盆腹腔感染及泌尿系统感染.结论:围手术期应用氨苄西林预防剖宫产术后感染,具有预防感染效果肯定、安全及价廉等优点,是具有广泛临床推广价值的用药方案.     

敷脐疗法结合耳穴压豆治疗人工流产后腹痛疗效观察

目的:观察敷脐疗法结合耳穴压豆治疗人工流产后腹痛的临床疗效。方法:将203例患者随机分为4组。对照组56例给予常规治疗及护理。中药敷脐组41例在对照组治疗基础上予中药(主要由当归尾、三七组成)敷脐治疗。耳穴压豆组49例在对照组治疗基础上予王不留行籽贴在耳穴肾、子宫、卵巢、内分泌、肝、交感治疗。综合治疗组57例在对照组治疗基础上同时给予中药敷脐及耳穴压豆治疗。观察4组人工流产后腹痛的情况。结果:①术后1小时疼痛减轻程度4组比较,差异有显著性意义(P0.05);其中疼痛分级为0级(无痛)的比例:综合疗法组耳穴压豆组中药敷脐组对照组。②术后1天疼痛减轻程度4组比较,差异有非常显著性意义(P0.01);其中疼痛分级为0级(无痛)的比例:综合疗法组耳穴压豆组中药敷脐组对照组。③术后7天疼痛减轻程度4组比较,差异有显著性意义(P0.05);其中疼痛分级为0级(无痛)的比例:综合疗法组与中药敷脐组耳穴压豆组对照组。结论:敷脐疗法结合耳穴压豆对降低人工流产后腹痛等症状的发生有明显效果,可减轻患者痛苦。     

禽流感H5N1亚型病毒对五个不同品系小鼠致病性的比较

目的 比较了不同遗传背景小鼠对禽流感H5N1亚型病毒的致病敏感性,为H5N1禽流感模型制作和机理研究提供依据.方法 近交系BALB/c、C57BL/6和封闭群ICR、NIH Swiss和KM Swiss共五个不同品系小鼠.每个品系实验动物30只,分接毒组20只,空白对照组10只,每组雌雄各半.病毒株为A/Goose/Guangdong/NH/2003(H5N1),经测定TCID50为10-4.875/mL.接毒组通过鼻腔接种0.1 mL病毒液,对照组接种正常鸡胚尿囊液.小鼠接毒后连续观察14 d,观察记录临床症状、体温、体重变化,对在实验期间死亡和实验14 d结束后仍然存活的小鼠均进行组织器官病理取材,进行RT-PCR病毒分离检测、HE染色及H5N1抗原特异性免疫组化染色.结果 ①临床症状:H5N1禽流感病毒能感染五个品系的小鼠,引起呼吸急促等症状和一过性体重、体温下降.②死亡情况:小鼠在接毒后第1天即出现死亡,死亡的高峰期集中在接毒后第3～6天.五个品系小鼠死亡率存在差异,BALB/c为70%,ICR为50%,NIH Swiss为40%,C57BL/6为25%,KM Swiss为10%;③病毒分离:各组接毒小鼠在死亡后均进行了病毒分离,死亡小鼠的肺脏均分离到病毒,其他脏器未分离到病毒.④病理变化:实验期间五个品系死亡小鼠肺脏病理改变相近.大体观:死亡小鼠肺部淤血,呈暗红色,体积增大,局部肺组织实变.镜下观:死亡小鼠的共同病理改变为间质性肺炎,具体表现为肺泡腔及间质出血、炎性细胞浸润;间质增生,肺泡隔增宽;肺泡腔中见纤维素性渗出,透明膜形成.⑤免疫组化结果:在死亡小鼠的气管上皮细胞和肺巨噬细胞可观察到H5N1禽流感病毒阳性表达.结论 小鼠作为H5N1禽流感病毒模型具有普适性,不同品系小鼠感染鹅源H5N1禽流感病毒的临床症状、病程和病理变化与人禽流感病例相似.不同品系小鼠的死亡比例有明显差别,可以根据不同的实验目的,选择不同品系的小鼠制作H5N1禽流感动物模型.不同品系的遗传特性对禽流感易感性产生明显的影响,遗传背景可能与H5N1禽流感病毒感染应答机理存在联系:BALB/c和C57BL/6均为近交系,其中BALB/c小鼠的品系特征之一表现为干扰素产量低,接种H5N1病毒后表现为高死亡率(70%),而C57BL/6小鼠的干扰素产量高,接种H5N1病毒后表现为低死亡率(25%),提示不同遗传背景小鼠的干扰素水平与H5N1感染致死具相关性.为进一步研究H5N1禽流感病毒易感性相关基因以及其与宿主免疫反应的关系提供了一个研究基础.     

益气活血生肌方配合王不留行穴位贴敷预防剖宫产术后感染临床观察

目的：观察益气活血生肌方配合王不留行穴位贴敷预防剖宫产术后感染的临床疗效,探讨采用中西医结合用药以减少剖宫产术围手术期应用抗菌药物用量及疗程的方法。方法：将300例产妇随机分为2组,对照组146例,单用头孢唑林预防术后感染,术中、术后6h共用药2次;研究组154例,头孢唑林只在术中用药1次,术后运用益气活血生肌方配合王不留行粉贴敷血海穴的中医疗法。观察2组术后体温、血象、腹部切口愈合情况、宫腔感染、盆腹腔感染及泌尿系感染情况。结果：2组在术后发热、血象异常、腹部切口愈合不良发生率方面比较,差异均无显著性意义（P〉0.05）;2组产妇剖宫产术后均无出现宫腔感染、盆腹腔感染及泌尿系感染病例。结论：益气活血生肌方配合王不留行穴位贴敷应用于预防剖宫产术后感染,可有助减少剖宫产术围手术期应用抗菌药物的用量和疗程。     

生、炒麦芽联用治疗产后回乳34例

目的:观察生、炒麦芽联用治疗产后回乳的临床疗效.方法:将100例本院中医妇科门诊就诊的产后妇女按照门诊号随机分为3组,治疗A组33例给予生麦芽120 g/d,治疗B组33例给予炒麦芽120 g/d,治疗C组34例给予生麦芽60 g/d、炒麦芽60 g/d,3组药物均预先用水浸泡20 min,第1次煎煮30 min,第2次煎煮25 min,取2次煎煮药汁共300 mL,分2次空腹服用.3组均以3 d为1个疗程,治疗1个疗程,服药期间停用其他药物.结果:治疗A组治愈13例,有效12例,无效8例,有效率占75.76%.治疗B组治愈17例,有效10例,无效6例,有效率占81.82%.治疗C组治愈27例,有效6例,无效1例,有效率占97.06%.治疗A组与治疗B组对比,差别无统计学意义(P＞0.05).治疗A组与治疗C组对比,差别有统计学意义(P＜0.01).治疗B组与治疗C组对比,差别有统计学意义(P＜0.05).结论:生、炒麦芽联用治疗产后回乳疗效显著,值得推广.     

血清miR-210和miR-375在非小细胞肺癌患者中的表达变化情况

目的探讨血清miR-210和miR-375在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达变化情况。方法以25例NSCLC患者(NSCLC组)和14例健康志愿者(对照组)为研究对象,随机抽取6例NSCLC组和6例对照组的血液标本组成筛选实验,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测9种miRNA (miR-182、miR-126、miR-31、miR-21、miR-221、miR-200b、miR-183、miR-210、miR-375)的表达水平,筛选出表达异常的miRNA为目标miRNA后,继续检测其在剩余标本中的表达水平,并采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价其诊断效能。结果筛选实验发现,miR-210和miR-375在NSCLC组血清中的相对表达均升高,差异有统计学意义(P0.05),其他7种miRNA表达量趋势与已报道文献不符,选择miR-210和miR-375继续验证剩余标本,发现NSCLC患者中的肺腺癌组miR-210相对表达量较对照组升高,差异有统计学意义(P0.05),肺鳞癌组与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);miR-375在肺鳞癌和肺腺癌组中的相对表达量与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。根据血清miR-210表达水平绘制ROC曲线,曲线下面积为0.737 5(95%CI:0.498 3～0.976 7,P=0.091 4),诊断准确性中等。结论 miR-210在肺腺癌组高表达,可能成为诊断肺腺癌的新型肿瘤标志物;miR-375在辅助诊断肺癌的价值仍待进一步探讨。     

择期剖宫产术围术期抗生素应用方案

目的:探讨择期剖宫产术围术期抗生素应用的方案.方法:将择期剖宫产术围术期应用氨苄西林预防术后感染的产妇178例随机分为三组:A组50例术中断脐后立即静脉用药一次;B组70例术后立即及术后6h各静脉用药一次,2次;C组58例术后0.5h内首次给药,一天两次,术后48h内停药,4次.观察两组患者术后医学指标(术后发热率、术后血象异常升高率及CRP升高率、产褥病率、腹壁切口良好愈合情况)和经济学指标(住院费用及术后平均住院天数).结果:三组患者术后医学指标及术后平均住院天数无统计学差异(P>0.05),但住院费用的差异具有统计学意义(P<0.05).结论:择期剖宫产围术期应用氨苄西林在术中断脐后单次给药的短疗程预防术后感染临床效果好,是最佳给药时机及方案,可降低患者经济负担,操作简单,具有广泛临床推广价值的用药方案.