靶向寡肽溶栓剂

对靶向寡肽溶栓剂P6A(ARPAK)及其衍生物、RGD肽及含有自由基伪肽的靶向溶栓作用进行综述。P6A是纤溶酶原的降解产物之一,具有增加血管通透性和溶栓作用。P6A的衍生物及P6A代谢产物具有更强的溶栓作用。血栓形成中,RGD序列是纤维蛋白原与血小板结合的关键序列。将RGD序列与溶栓寡肽结合,构成了具有靶向溶栓作用的杂交寡肽。在溶栓治疗中,血流再灌注生成的大量自由基会对组织造成损伤,将自由基清除剂与溶栓寡肽结合可得到具有溶栓和自由基清除双向功能的溶栓伪肽。因为溶栓处是产生大量自由基的部位,所以含自由基清除剂的溶栓伪肽可将自由基清除剂带到自由基堆积部位,体现了靶向内涵。     

特异性磷酸二酯酶抑制剂sildenafil增加缓激肽对血-肿瘤屏障的通透性

目的 研究新的cGMP特异性磷酸二酯酶sildenfil抑制剂是否能增加颈动脉灌注缓激肽对脑肿瘤的血－肿瘤屏障的通透性。方法 用放射自显影方法检测单独应用sildenfil，缓激肽以及sildenfil与缓激肽伍用时血－肿瘤屏障通透性的变化。结果 sildenfil与缓激肽伍用与单独应用缓激肽相比较，能显著增加反映血－肿瘤屏障通透性的指标单向转运系数Ki值（P＜0.05）。经缓激肽灌流的肿瘤组织中cGMP含量显著增加（P＜0.05）。结论 特异性磷酸二酯酶抑制剂sildenafil与缓激肽伍用能显著增加血－肿瘤屏障的通透性，从而能够增加药物选择性地转运到脑肿瘤组织。cGMP可能是缓激肽选择性增加血－肿瘤屏障的重要因素之一。     

高表达缓激肽B2受体的大鼠胶质瘤模型的研究

目的建立高表达缓激肽受体(B2R)的大鼠胶质瘤模型,为研究缓激肽选择性开放血脑屏障的机制及解决目前临床应用中存在的问题提供必要的模型。方法①大鼠B2R的真核细胞的表达和其载体(prB2R)侵染C6胶质瘤细胞株;②Real-timeRT-PCR测定B2R的转录;③WesternBlot法测定B2R的表达水平。结果①大鼠胶质瘤细胞株C6高表达B2R;②Real-timeRT-PCR测定C6-B2R1和C6-B2R2克隆的B2R分别比C6对照高7.6和6.9倍;③C6-B2R1和C6-B2R2克隆的蛋白表达水平高于C6对照克隆的3.8和3.78倍。移植C6-B2R1肿瘤1周后的B2R表达水平高于C6对照肿瘤的3.6倍。结论高表达B2R的大鼠胶质瘤模型已被成功建立。     

电喷雾电离四极杆质谱直接进样定性检测化合物实验条件的研究

<正>质谱分析具有灵敏度高、样品用量少、分析速度快等优点[1]。对于表征有机化合物而言,第一步和最重要的步骤就是快速准确地确定相对分子质量,电喷雾电离四极杆质谱恰好满足了这样的要求,成为药物化学合成实验不可缺少的检测工具之一。本文中用到的质谱是Waters公司的型号为Quattro microTMAPI的电喷雾电离四极杆质谱,它的可测质荷比范围为2～2 000 m/z,适用于小分子化合物检测,所以可用于药物化学实验反应中间产物、目标化合物以及副产物的定性检测。     

缓激肽选择性增加局部脑缺血大鼠血脑屏障的通透性

目的　研究颈动脉灌注小剂量缓激肽对缺血后血脑屏障通透性的影响及机制。方法　免疫组化分析正常脑组织的缓激肽B2受体所在。大鼠大脑中动脉结扎 1h或 2h再灌流 1h。用放射自显影方法检测缓激肽对血脑屏障通透性的变化。WesternBlot方法检测bNOS ,iNOS和B2受体。NOS检测盒检测NOS的活性。结果　正常脑组织毛细血管内皮未见B2受体表达 ,在神经细胞上发现B2受体的表达。缺血 2h再灌流1h缓激肽灌注缺血区血脑屏障通透性显著增加。WesternBlot结果提示 ,在缓激肽灌注组和对照组间 ,缺血皮质区bNOS和B2受体没有明显变化 ,各组中均未检测出iNOS。缓激肽灌注组的NOS活性显著高于对照组。结论　正常脑组织毛细血管内皮未表达B2受体 ,神经细胞上可见B2受体的表达。灌注小剂量缓激肽能选择性增加局部脑缺血大鼠血脑屏障的通透性     

高效液相色谱仪的应用分析

目的:分析和解决高效液相色谱在使用过程中出现的多种技术问题。方法:总结高效液相色谱技术在使用过程常发生的柱压力不稳、基线噪音增大、色谱柱柱效下降以及化合物保留时间漂移等问题,提出了简单有效的解决方法。结果:通过分析判断,解决了高效液相色谱的技术问题,有效提高了仪器完好率和使用率,保证科学研究和教学工作的正常进行。结论:高效液相色谱仪的正确使用、保养和维护可以延长仪器的使用寿命,发挥仪器设备的最大效益。     

缓激肽B2受体在大鼠C6脑胶质瘤细胞上的表达

目的　研究缓激肽选择性开放脑肿瘤的血肿瘤屏障的机制。方法　通过双重免疫组化染色 ,确定缓激肽B2受体是存在于血管内皮细胞上还是存在于肿瘤细胞上。结果　在正常脑组织和肿瘤的血管内皮细胞上未见缓激肽B2受体的表达 ,而在肿瘤细胞上发现了高水平表达的缓激肽B2受体。结论　肿瘤细胞上B2受体的高水平表达可能是小剂量缓激肽灌注能够选择性开放恶性脑肿瘤的血 -肿瘤屏障而未影响正常血脑屏障通透性的重要原因之一。     

神经胶质瘤中缓激肽B2受体的表达水平与病理级别的相关性

目的　分析神经胶质瘤中缓激肽B2受体表达水平与病理分级的相关关系,为缓激肽及其类似物的临床应用提供实验依据。方法　采用神经胶质瘤患者术后标本,用H&E染色进行神经胶质瘤的病理诊断及分级,用免疫组化法和WesternBlot法测定不同病理分级的神经胶质瘤中缓激肽B2受体的表达水平。结果　H&E染色显示26例神经胶质瘤中I级为9例,II级为9例,III级为8例,IV级为0例。胶质瘤边缘水肿带不表达缓激肽B2受体,B2受体位于胶质瘤细胞。WesternBlot结果显示在三组不同病理分级的神经胶质瘤中,B2受体表达水平为Ⅰ级与Ⅱ级( 39480. 88±5119. 96对51354. 25±6168. 77, n=8, t=2. 447, P<0. 05 ),Ⅰ级与Ⅲ级( 39480. 88±5119. 96对73032. 13±8802. 71, n=8, t=7. 710, P<0. 001 ),Ⅱ级与Ⅲ级( 51354. 25±6168. 77对73032. 13±8802. 71, n=8, t=5. 704, P<0. 001);神经胶质瘤中缓激肽B2受体表达水平与其病理分级I级~III级呈显著正相关(r=0. 895,P<0. 001),呈I级相似文献   

高效液相色谱-质谱联用分析法测定血清全氟辛烷磺酸

目的全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)是全氟表面活性剂,被广泛用于纺织、皮革、涂料、农药等生产中,具有较高的生物蓄积性和多种毒性,是目前最难降解的持久性环境有机污染物之一,由其造成的污染已经逐渐成为全球性的环境问题。建立高效液相色谱-质谱联用分析方法对于检测环境和生物体内的PFOS具有实际意义。方法样品经固相萃取、液相色谱分离后进行电喷雾质谱分析,在多反应监控(multiple reaction monitoring,MRM)模式下使用内标法测定PFOS。结果PFOS在质量浓度为0μg/L～120μg/L时有良好的线性关系,线性相关系数r=0.991039。由标准曲线计算PFOS的回收率为76.88%。结论用高效液相色谱-质谱联用内标法定量分析血清中PFOS的浓度灵敏度高,分析速度快,适于血清PFOS含量的测定。