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目的:探究槟榔多酚对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)低氧损伤的保护作用。 方法:采用氧化应激指标丙二醛和超氧化物歧化酶筛选肺部缺氧损伤细胞模型最适条件;采用细胞计数试剂盒法筛选槟榔多酚最适给药剂量。将PMVEC分为常氧对照组、模型对照组和槟榔多酚组,采用BCA法检测蛋白浓度并测定PMVEC中的氧化应激水平,蛋白质印迹法检测炎症和凋亡相关蛋白的表达,免疫荧光染色法检测闭合蛋白和闭锁小带1等紧密连接蛋白的表达,Transwell小室实验检测跨内皮细胞膜电阻,罗丹明荧光染料检测PMVEC屏障的通透性。 结果:1%氧浓度培养PMVEC细胞 48?h后成功构建肺部缺氧损伤细胞模型 ;20?μg/mL的槟榔多酚可以显著逆转缺氧损伤细胞模型中PMVEC的存活率下降以及氧化应激水平的升高(均 P<0.05);槟榔多酚对于低氧诱导下PMVEC中炎症相关蛋白核因子κB(NF-κB)和核因子E2相关因子(Nrf)2的上调有显著抑制作用(均P<0.05);槟榔多酚可以下调低氧诱导下PMVEC中凋亡相关蛋白胱天蛋白酶(caspase)3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达(均P<0.05),从而减轻低氧诱导下细胞的凋亡;槟榔多酚显著上调低氧诱导下PMVEC闭合蛋白和闭锁小带1的表达(均P<0.05),提高跨膜电阻值并降低罗丹明透过量,改善肺微血管内皮屏障的通透性。结论:槟榔多酚可以通过减轻PMVEC的氧化应激损伤、降低炎症相关蛋白表达、减少细胞凋亡及提高细胞屏障的通透性,改善PMVEC的低氧损伤。 相似文献
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目的探究高原低氧环境下HDAC5在大鼠体内P-gp表达中的关键作用及对苯妥英钠药代的影响。方法Wistar大鼠运至海拔4010 m的青海玉树巴塘,每组6只。不同组分别给予苯妥英钠、苯妥英钠联用金丝桃素、苯妥英钠联用维拉帕米。在高原地区收集服药后不同时间的血浆和肝组织。采用UFLC-MS法测定血浆中苯妥英钠的浓度,计算药代动力学参数。Western blot检测肝组织中HDAC5、P-gp蛋白表达的变化。结果UFLC-MS结果表明,给予P-gp激动剂后,AUC(0-t)、AUC(0-∞)、MRT(0-t)、MRT(0-∞)、T_(1/2z)、CL_(z)/F、V_(z)/F增加;给予P-gp抑制剂后,AUC(0-t)、AUC(0-∞)、MRT(0-t)、MRT(0-∞)、T_(1/2z)降低。同时,高原低氧环境下,HDAC5参与P-gp表达的调控。当给予P-gp激动剂和抑制剂时,HDAC5与P-gp表达呈现相同变化趋势。结论高原低氧环境下,肝中转运体P-gp的表达影响了P-gp底物苯妥英钠的药代动力学,P-gp的变化水平与HDAC5有关。 相似文献
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