PTEN-Long通过PI3K-AKT途径对HepG2肝癌细胞的影响

摘 要：［目的］ 探讨PTEN-Long对肝细胞癌HepG2细胞的影响及其脂质磷酸酶活性与PI3K-AKT信号通路之间的关系。［方法］ 细胞转染法转染PTEN-Long、PTEN-LongG302R和Vector于HepG2细胞。转染48h后,检测各组细胞增殖数,Western blot法检测各组细胞PTEN-Long、pAkt、pS6K表达变化,流式细胞法检测各组细胞细胞凋亡水平变化,细胞划痕法检测各组细胞迁移情况。［结果］ 细胞转染后,PTEN-Long组、PTEN-LongG320R组表达PTEN-Long蛋白量无显著性差异;与Vector、PTEN-LongG320R组相比,PTEN-Long组pAkt (Ser473)、pS6K (Thr389)表达量明显下降。从转染后48h开始,PTEN-Long组细胞增殖数较Vector 组、PTEN-LongG320R组明显减少,差异有统计学意义（P<0.05）;PTEN-Long组较Vector 组、PPTEN-LongG320R组凋亡明显增强（P<0.05）;划痕14h后,PTEN-Long组、PTEN-LongG320R组较Vector组的迁移细胞数明显减少（P<0.05）。［结论］ PTEN-long依赖于其脂质磷酸酶活性,通过PI3K-AKT通路调控肝癌HepG2细胞的增殖与凋亡。     

腹腔镜胰十二指肠切除术的发展历程与未来展望

自1994年首例腹腔镜胰十二指肠切除术开展以来,该手术经过20多年的探索、发展,在争议和疑惑中取得了突破性进展。腹腔镜胰十二指肠切除术在国内外一些大的医疗中心已成为治疗壶腹部周围肿瘤的常规治疗手术方式,并出现单中心100例以上的报道,以及与开腹胰十二指肠切除术大宗病例疗效的对比研究报道。研究者及时更新腹腔镜胰十二指肠切除术的理念,总结经验和进展并进行展望,有助于该手术推广和普及,造福患者,现对胰十二指肠的发展历程和临床前景作一综述。     

老年自发性乙状结肠穿孔14例诊治分析

目的探讨老年自发性乙状结肠穿孔的病因及诊治方法。方法回顾性分析14例老年乙状结肠自发性穿孔患者的临床资料。结果 14例均经手术探查证实诊断,术前误诊为急性阑尾炎合并穿孔6例,胃十二指肠溃疡穿孔5例,仅3例术前考虑自发性乙状结肠穿孔。11例治愈,3例死亡。结论便秘和腹内压增高是该病的主要诱因,一经确诊须及早手术,术式以病变肠段切除Hartmann术为首选。     

长链非编码RNARPLP0P2在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖的影响研究

目的探讨长链非编码RNARPLP0P2在胃癌组织中的表达,及其对胃癌细胞增殖的影响。方法选取行手术切除治疗的胃癌患者56例,留取术中切除的胃癌组织与配对的癌旁正常组织,采用qRT-PCR法检测胃癌组织与癌旁正常组织RPLP0P2表达水平,并比较不同临床病理特征的胃癌患者胃癌组织RPLP0P2表达水平。采用转染小干扰RNARPLP0P2（si-RPLP0P2）的方法敲除RPLP0P2,比较转染si-RPLP0P2与转染si-NC的胃癌BGC-823、SGC-7901细胞与正常胃上皮GES-1细胞增殖情况。结果除Borrmann分型、肿瘤大小以及是否有神经侵犯外,不同临床病理特征的胃癌患者胃癌组织RPLP0P2表达水平比较均无统计学差异（均P＞0.05）。即胃癌患者胃癌组织RPLP0P2表达水平不受患者性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤直径、肿瘤分化程度、TNM分期、Lauren分型、癌胚抗原、糖类抗原19-9等影响。与转染si-NC相比,转染si-RPLP0P2的胃癌BGC-823、SGC-7901细胞与正常胃上皮GES-1细胞增殖受抑制,即下调RPLP0P2会抑制细胞增殖。结论RPLP0P2在胃癌组织中表达上调,下调RPLP0P2可抑制胃癌细胞增殖。RPLP0P2或可成为胃癌的生物标志物与潜在的治疗靶点。     

PTEN-Long对肝癌细胞的抑制作用研究

目的探讨第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白（PTEN）基因编码PTEN的一种变形体PTEN-Long对肝癌细胞的抑制作用。方法细胞质粒转染法转染PTEN-Long于人肾上皮293T细胞，其溶解产物通过疏水作用和离子交换作用分离纯化PTEN-Long蛋白；采用Westernblot法检测分离纯化的PTEN-Long蛋白；以不同浓度PTEN-Long蛋白干预肝癌HepG2、HUH6、FOCUS细胞，并采用MTS法检测细胞存活情况。将40只129S1/SvImJ小鼠按随机数字表法分为PTEN-Long组（腹腔注射0.2mlPTEN-Long，剂量4mg/kg体重，1次/d）和对照组（腹腔注射0.2ml0.9%氯化钠注射液，1次/d），每组20只。小鼠大腿根部接种肝癌HepG2（两组分别各10只）或HUH6（两组分别各10只）细胞混合液，游标卡尺测量计算肿瘤体积。结果分离纯化后PTEN-Long蛋白纯度较高，约80%。与空白对照组比较，5nmol/L浓度以上的PTEN-Long对肝癌HepG2、HUH6细胞有明显的抑制作用，差异均有统计学意义（均P＜0.05），而PTEN-Long对肝癌FOCUS细胞无明显抑制作用，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。异种移植试验显示，与对照组相比，PTEN-Long组小鼠肿瘤体积明显较小（P＜0.05）。结论分离纯化提取的PTEN-Long对肝癌细胞起抑制作用，这或为肝癌分子靶向治疗提供新思路。     

关于中药剂型和给药途径的一些设想

中药剂型和给药途径的改革,是在实现中医现代化,甚至是中医药在“适者生存”这条自然法则面前进退存亡的关键之一。所以研制中药剂型和改革给药途径,是当前振兴中医药的一个重要环节。近几年这方面做了大量的工作,除了继承发掘传统剂型丸、散、膏、丹、汤、锭、煎等外,还运用现代先进技术工艺,将中药制成具有时代特点的新剂型片、膜、胶囊、合剂、冲剂、栓剂、霜剂、针剂、大输液剂、气雾剂等,加上多途径给药,特别是静脉给药,弥补了传统剂型的部分不足,使疗效及给药速度有所提高。     

痰瘀互结致病的临床特点探讨

痰饮、瘀血致病各有特点 ,临床多见痰瘀互结致病者。夫痰饮之成也 ,源于津液 ;瘀血之生也 ,源于血液。血和津液既是人体脏腑功能活动的物质基础 ,也是脏腑功能活动的产物 ,二者具有“津血同源”、“津血互化”的关系。《灵枢·邪客》指出 :“营气者 ,泌其津液 ,注之于脉 ,化以为血。”《灵枢·营卫生会》又说 :“夺血者无汗 ,夺汗者无血。”说明血和津液旺则俱旺 ,伤则均伤。在生理条件下 ,津液与血在“气化”作用下可相互资生转化。故在病理条件下 ,气化失常 ,痰饮和瘀血亦能相互影响 ,终致痰瘀互结。如气不化津 ,则津液停聚 ,凝结而形成痰…