高甘油三酯血症对大鼠急性胰腺炎模型中胰腺导管上皮细胞间紧密连接的影响研究

目的研究高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia,HTG)对大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型胰腺组织细胞间紧密连接(tight junctions,TJs)的影响。方法48只4周龄雄性SD大鼠随机分成普通饲养组(24只)和高脂饲养组(24只),4周后普通饲养组随机分为C组和AP组,高脂饲养组随机分为HTG组和高甘油三酯血症急性胰腺炎(HTGP)组。AP组和HTGP组经腹腔注射雨蛙肽建立AP模型,C组和HTG组经腹腔注射同等剂量的生理盐水,分别于造模24 h、48 h处置大鼠,采用HE染色法观察胰腺病理改变,免疫组织化学法检测胰腺组织中TJs蛋白脂解刺激脂蛋白受体(LSR)、Tricellulin蛋白(TRIC)、ZO-1、occludin、claudin-7定位及表达,透射电镜观察胰腺导管上皮细胞间TJs变化情况。结果高脂饲养组的大鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)较普通饲养组明显升高(P<0.05);HTG组胰腺组织病理评分高于C组(P<0.05),相同时点HTGP组胰腺组织病理评分高于AP组,但差异无统计学意义(P>0.05);HTG组LSR、TRIC表达显著低于C组(P<0.05),AP组和HTGP组的24 h时点LSR、TRIC、occludin、claudin-7表达均低于相应对照组(P<0.05),HTGP组24 h时点LSR和TRIC的表达显著低于AP组的对应时点(P<0.05);透射电镜观察AP组和HTGP组的24 h时点,发现主胰管上皮细胞TJs较C组和HTG组减少、细胞间隙增宽,且HTGP组比AP组的细胞间隙增宽更明显。结论TJs蛋白LSR、TRIC、ZO-1、occludin、claudin-7在HTG及HTGP大鼠胰腺组织中表达较非高脂模型下降,其中以三细胞间紧密连接(tricellular tight junctions,tTJs)蛋白LSR及TRIC下降明显,提示HTG可能减弱胰腺组织的tTJs,进而加重胰腺组织损伤。     

抑制线粒体钙单向转运体对大鼠急性胰腺炎氧化应激的作用研究

目的 探讨抑制线粒体钙单向转运体（MCU）减弱线粒体钙超载对雨蛙肽诱导的大鼠急性胰腺炎（AP）及胰腺氧化应激的影响。方法 将32只雄性SD大鼠分为对照组、急性胰腺炎组（AP组）、急性胰腺炎+钌红干预组（AP+RR组）、钌红组（RR组）,每组8只。模型复制24 h后处置大鼠,检测各组大鼠血清淀粉酶（Amy）、脂肪酶（Lipase）、白细胞介素6（IL-6）水平,HE染色观察胰腺组织病理改变;倒置荧光显微镜下观察腺泡细胞活性氧（ROS）、线粒体内Ca²⁺、胞内游离Ca²⁺荧光强度;检测胰腺组织还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量;Western blotting检测胰腺组织MCU、沉默信息调节因子3（SIRT3）、MnSOD蛋白的表达;透射电镜观察腺泡细胞超微结构。结果 各组大鼠胰腺HE评分和血清Amy、Lipase、IL-6水平比较,经方差分析,差异有统计学意义（P <0.05）,AP组较对照组高（P <0.05）。AP组MCU相对表达量,线粒体内Ca²⁺、胞内游离Ca²⁺浓度高于对照组、RR组（P <0.05）,AP+RR干预组低于AP组（P <0.05）。AP组MnSOD、SIRT3、GSH低于对照组（P <0.05）,ROS、MDA高于对照组（P <0.05）,与AP组比较,AP+RR干预组ROS、MDA低于AP组（P <0.05）,MnSOD、SIRT3、GSH高于AP组（P <0.05）。结论 抑制MCU可减弱腺泡钙超载,同时可能通过调节SIRT3/MnSOD途径改善雨蛙肽诱导的AP氧化应激,但对胰腺组织病理学和生化指标无明显改变。     

和厚朴酚减轻高甘油三酯血症急性胰腺炎大鼠模型的氧化应激：基于激活SIRT3-MnSOD2通路

目的 探讨和厚朴酚调控Sirtuin-3(SIRT3)-MnSOD2通路对高甘油三酯血症急性胰腺炎（HTGP）大鼠氧化应激的作用。方法 30只4周龄SD雄性大鼠随机分成普通饲养组和高脂饲养组,4周后普通饲养组随机设置为：对照(C)组和急性胰腺炎（AP）组;高脂饲养组随机设置为：高甘油三酯血症（HTG）对照组、HTGP组、和厚朴酚（HKL）治疗组,6只/组。AP组、HTGP组和HKL组经腹腔注射雨蛙肽建立AP模型,HKL组于造模后15 min腹腔注射HKL5 mg/kg。建立模型24 h后处置大鼠,检测大鼠血清甘油三酯（TG）、IL-6、TNF-α水平,HE染色观察胰腺组织病理学,试剂盒检测胰腺组织活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）水平,Western blot测定SIRT3、锰超氧化物歧化酶（MnSOD2）蛋白的表达水平,免疫组化法检测MnSOD2蛋白表达,透射电镜观察胰腺腺泡细胞及线粒体超微结构。结果 与普通组比较,高脂组TG水平显著增高（P<0.05）。与各对照组比较,模型组IL-6、TNF-α、MDA水平均显著增高（P<0.05）,GSH水平...