实验教学中尿液标本有形成分的保存

在医学实验教学中 ,形态学标本来源很特殊 ,它不能人工制造 ,病理性标本只能从病人处取得 ,然而所需病人不是经常有 ,因此 ,研究实验教学标本的收集与保存的方法 ,十分必要。本文即是对实验诊断学实验教学中 ,尿液标本中有形成分的保存方法 ,进行了一些探讨     

Mad1对膀胱肿瘤作用的体内实验研究

目的:在原位建立膀胱肿瘤的大鼠模型,观察转染Mad1表达质粒后对膀胱肿瘤增殖的抑制作用.方法:MNU对SD大鼠进行膀胱灌注诱发膀胱肿瘤,荷瘤动物随机分为3组:Mad1转染组(A组),空载体转染组(B组)和生理盐水转染组(C组).通过大鼠重量(RBW)、膀胱绝对重量(BAW)、膀胱相对重量(BRW)、Mad1和TERT mRNA表达水平等指标,用流式细胞仪等检测手段,比较转染前后Mad1和TERT的表达差异、观察Mad1对膀胱肿瘤增殖的抑制作用以及探讨相应的机理.结果:成功在原位建立膀胱肿瘤的大鼠模型.A组与B、C两组相比RBW无显著性差异(P＞0.05),但BAW和BRW分别有非常显著差异性(P＜0.01)及显著差异性(P＜0.05);Mad1mRNA相对表达量明显增加;TERT mRNA相对表达量明显降低;流式细胞仪显示G0/G期细胞显著增加(P＜0.01),S期细胞显著减少(P＜0.01).结论:高表达的Mad1能抑制膀胱肿瘤的增殖.     

中国汉族人群17个心血管疾病易感基因位点基因型和基因频率分析

目的:调查中国汉族人群中17个心血管疾病易感基因位点的基因型和基因频率.方法: 运用基因芯片技术同时检测138例来自中国大部分省市的汉族人的13个心血管易感基因的17个SNPs.结果: 国内未曾见报道的4个基因位点基因型频率分别为: ET-2985 AA∶AG∶GG为2.2% (3)∶22.2% (30)∶75.6% (102);NPRC(-55) AA∶AC∶CC为8.1% (11)∶23.0% (31)∶68.9% (93);KCNQ1140则只发现了SS基因型;CYP46rs754203 CC∶CT∶TT为55.0%(66)∶20.0%(24)∶25.0%(30).ApoBMsp1 ∶-为92%(232)∶8%(20),而Hapmap公布的则为100%(90)∶0%(0),两者比较,差异有统计学意义(χ2=7.587,P=0.000).MTHFR677 C∶T为70%(168)∶30%(72),与Hapmap中中国北京汉族人(CHB)公布的结果48.9%(44)∶51.1%(46),以及ALFRED中公布的中国香港汉族(SA0008510)77.8%(322)∶22.2%(92)比较,差异具有统计学意义(χ2和P分别为12.70,0.000;4.89, 0.027).其他位点的调查结果与Hapmap计划中CHB(ANP2238, ApoBXbaⅠ, NOS3298, ApoBEcorⅠ和ApoE112)和ALFRED网站的SA0008510的基因频率(AGT235, ACEAlu, ApoCⅢ3175, ApoCⅢ3206, ApoE158和SerpinA3rs4934)有较好的吻合.结论:SNPs频率分布具有种族和地区差异,中国汉族人群中ANP2238 C, ApoBEcorⅠ(-)和KCNQ1140 G, 是少见的等位基因(《5%),可能不是心血管疾病的主要原因.用基因芯片检测多个心血管疾病易感基因SNPs结果可靠.     

尿液血管内皮生长因子含量检测在诊断膀胱癌中的作用

目的　探讨尿液中血管内皮生长因子 (VEGF)含量测定诊断膀胱癌的价值。　方法　采用ELISA法测定 33例膀胱癌、10例泌尿系良性疾病患者和 10例健康志愿者尿液中VEGF含量。结果　 33例膀胱癌患者尿VEGF平均含量 (30 9.8± 86 .6 )ng/gCr ,2 0例非肿瘤对照组为 (10 7.6± 35 .4 )ng/gCr,两者差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。T2 、T3 患者尿VEGF平均含量显著高于T1(P <0 .0 5 ) ;G3组尿VEGF平均含量显著高于G1和G2 组 (P <0 .0 5 )。尿VEGF含量与肿瘤体积相关。以对照组尿液VEGF水平上限 (14 3ng/gCr)为阳性界值时 ,诊断膀胱癌的灵敏度为 90 .9% (30 / 33) ,特异性为 80 .0 % (16 / 2 0 )。　结论　尿VEGF含量检测方法简便 ,无创 ,具有较高的敏感性和特异性 ,可作为膀胱癌的诊断指标之一。     

HepaCAM基因转染对膀胱癌BIU-87细胞株生长及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨外源性肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)转染对人膀胱癌BIU-87细胞株生长及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors,VEGF)表达的影响。方法使用脂质体2000转染法将携带野生型hepaCAM基因的质粒(pEGFPN2-hepaCAM)及空载质粒(pEGFPN2)转染人膀胱癌BIU-87细胞,建立稳定过表达hepaCAM基因的BIU-87细胞株。以转染空载质粒及未转染的BIU-87细胞株作为对照,采用MTT法检测各组细胞生长能力,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测hepaCAM、VEGF mRNA水平的变化,Western blot检测VEGF蛋白水平的变化。结果MTT实验示:hepaCAM基因转染(实验组)BIU-87细胞生长与空载体组和未处理组细胞比较明显受到抑制(P<0.05);hepaCAM基因在膀胱癌BIU-87细胞不表达,转染后hepaCAM mRNA明显增强(P<0.05);实验组VEGF mRNA表达(0.527±0.031)与未处理组(0.803±0.042)、空...     

心血管疾病易感基因SNPs在中国汉族人原发性高血压患者中的分布

目的：了解中国人群中16个原发性高血压（Essen-tial hypertension,EHT）候选基因的基因型和单体型分布情况及与EHT的关系.方法：采用基因芯片技术和Phase v2.1单体型分析软件,检测和分析140例EHT患者和400例健康对照者16个心血管疾病易感基因的基因型和单体型.结果：EHT组和健康对照组间的AGT235,ApoBXalI和ACEAlu等位基因频率差异显著（P〈0.05）,且ACEAlu在不同等级的高血压中的分布亦具有显著差异（P〈0.05）.人群中共有918种单体型,单体型MIEG＋-C3CC在两组间分布差异分析,P=0.052.结论：AGT235M,ACEAluD和ApoBXalI＋可能与中国汉族人群原发性高血压有关.     

新基因hepaCAM对膀胱癌细胞体外生物学影响

目的:研究肝细胞粘附分子(Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)对人类膀胱癌T24细胞体外生物学影响.方法:脂质体法转染pEGFP-N2-hepaCAM质粒入T24细胞,激光共聚焦显微镜检测其蛋白定位;筛选稳定表达细胞株;Westernblot检测蛋白表达.细胞粘附、基质胶侵袭实验及MTT实验研究该基因对细胞粘附力、活动力及增殖力的影响.结果:hepaCAM在单个细胞中分布在细胞核周边区域;相互连接细胞中主要分布于细胞间相互接触区域.获得稳定表达hepaCAM基因的T24细胞.体外粘附实验、基质胶侵袭实验证明实验组细胞粘附力及活动力明显高于空白组及阴性对照组.MTT法检测转染hepaCAM基因细胞增殖力明显低于空白组及阴性对照组.结论:hepaCAM基因可显著抑制人类膀胱癌T24细胞恶性行为,可能是通过增强细胞-基质间粘附及抑制细胞增殖力从而影响肿瘤细胞的浸润和转移.     

磷脂酶Cε基因在膀胱移行细胞癌中表达及其临床意义

目的 探讨磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)基因在膀胱移行细胞癌表达及临床意义.方法 采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测27例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱对照组中PLCε mRNA表达,分析其与膀胱病理学特征的关系.结果 PLCεmRNA在膀胱移行细胞癌的表达显著高于正常膀胱组织(P＜0.01),PLCε的表达和膀胱移行细胞癌分期有关(P＜0.05)而与分级无关(P＞0.05).结论 PLCε基因在膀胱移行细胞癌组织中呈高表达,可能是未来检测膀胱移行细胞癌一种新的有价值的肿瘤标志物,同时也可能成为膀胱肿瘤生物学治疗中一个新靶点.     

红细胞及血小板分布宽度在预测心肌梗死中的价值分析

目的：探讨红细胞分布宽度（RDW ）和血小板分布宽度（PDW ）对心肌梗死的预测价值。方法收集2011年11月至2013年10月以心肌梗死收治入重庆医科大学北碚附属医院的85例患者,回归性分析在心肌梗死发作前1～3个月测定的RDW值和PDW值与同时期健康对照组27例体检者的差异。结果采用SPSS17．0进行统计分析。结果心肌梗死组患者RDW值为（47．92＆#177;7．56）％和PDW值为（15．75＆#177;3．55）％,明显高于对照组的RDW值[（42．65＆#177;2．40）％]和PDW值[（13．52＆#177;1．94）％],差异有统计学意义（P＜0．05）。心肌梗死组患者RDW值分别与PDW值和年龄存在明显的线性正相关（ P＜0．05）,且该组中女性 PDW值明显高于男性（ P＜0．01）。经多因素Logistic回归分析,RDW值和PDW值升高是发生心肌梗死的独立危险因素。RDW值预测发生心肌梗死的受试者工作特征曲线（ROC）下面积为0．767（95％ CI 0．692～0．842）,临界值为44．8％,对应的预测灵敏度为64．3％,特异度为88．9％。PDW值预测发生心肌梗死的 ROC下面积为0．675（95％ CI 0．583～0．766）,临界值为14．9％,对应预测灵敏度为61．2％,特异度为58．1％。结论 RDW值和PDW值能较好地预测心肌梗死的发病风险。     

膀胱移行细胞癌尿脱落细胞VEGF表达的研究

目的：研究尿脱落细胞ＶＥＧＦ表达与膀胱癌的关系，探讨其作为膀胱肿瘤诊断标记物的临床意义。方法：应用免疫组化技术检测４０例膀胱癌患者和２０例非肿瘤患者尿脱落细胞ＶＥＧＦ的表达。结果：ＶＥＧＦ在非肿瘤组尿脱落细胞无表达，而在肿瘤组尿脱落细胞表达率为４０％，联合常规ＨＥ染色检测可提高肿瘤检出率达８６．２％。复发组膀胱癌尿脱落细胞ＶＥＧＦ表达率７０％，明显高于初发组的３０％（Ｐ＜０．０５）。ＶＥＧＦ在膀胱癌的表达率与肿瘤分期有相关性，而与肿瘤分级程度无相关性。结论：检测尿脱落细胞ＶＥＧＦ表达，可作为膀胱肿瘤诊断、监测复发的良好指标，可提高尿脱落细胞检测膀胱癌的阳性率。