不明原因复发性流产患者外周血及蜕膜组织中Th17细胞相关效应细胞因子的表达及意义

目的探讨不明原因复发性自然流产(URSA)患者外周血及蜕膜组织中Th17细胞相关效应细胞因子白细胞介素(IL)-6、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-17、IL-23的表达及意义。方法 20例URSA患者,设为URSA组;20例同期正常早孕要求行人工流产手术孕妇,设为NP组。2组受试者均采集静脉血5 m L及自行排出或人工流产术刮取的蜕膜组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清及蜕膜组织中IL-6、TGF-β、IL-17、IL-23水平。结果 URSA组患者血清及蜕膜组织中IL-6、IL-17、IL-23水平显著高于NP组(P0.01),TGF-β水平显著低于NP组(P0.01)。结论 Th17细胞相关细胞因子IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β可能参与了URSA患者母胎免疫,IL-23有望成为URSA新的治疗靶标。     

异位妊娠期待治疗66例临床分析

目的:评价血HCG值及其动态变化对未破裂型异位妊娠期待治疗结果的预测作用.方法:对符合条件的66例未破裂型异位妊娠患者进行期待治疗.治疗期间动态监测血HCG及B超,至血HCG降至正常,B超监测至宫外孕包块消失.结果:血HCG＜1 000 IU/L组期待治疗成功率比血HCG＞1 000 IU/L组高(P＜0.05).隔日...     

自然杀伤细胞在反复种植失败中的研究进展

反复种植失败(RIF)是影响体外受精-胚胎移植(IVF-ET)成功率的重要因素,胚胎种植成功与否与胚胎质量和子宫内膜容受性相关。在月经周期增殖期,子宫内膜细胞功能层有少量自然杀伤(NK)细胞,排卵后NK细胞显著增加,胚胎着床后NK细胞将维持高水平至妊娠早期。蜕膜NK细胞是母-胎界面含量最多的免疫细胞,对胚胎种植、蜕膜血管重铸、胎盘形成、滋养细胞侵袭和妊娠结局都有非常重要的作用。本文就蜕膜NK细胞在胚胎种植过程中发挥作用的研究进展作一综述。     

举宫器配合经阴道注水腹腔镜在不孕症诊治中的应用研究

目的探讨举宫器配合经阴道注水腹腔镜(transvaginal hydrolaparoscopy,THL)联合宫腔镜在不孕症诊治中的应用价值。方法对64例子宫输卵管造影(HSG)提示至少有一侧输卵管通畅而不孕症的患者施行举宫器配合THL联合宫腔镜检查。结果 62例成功行THL,术前HSG双侧输卵管通畅50例,THL联合宫腔镜下输卵管口插管通液术后双侧输卵管通畅57例。62例中存在盆腔粘连29例,因粘连而需转为标准腹腔镜(hydrolaparoscopy,LAP)21例占33.8%(21/62)。在THL下完成手术41例,THL手术时间(9.5±6.7)min、总手术时间(18.5±5.3)min,穿刺成功率为96.9%(62/64);2例水注入直肠系膜,无直肠穿孔、出血、盆腔感染等并发症发生。盆腔完全评价率为93.5%(58/62)。留院观察时间6～12 h、在THL下完成手术41例中,妊娠18例,妊娠率43.9%(18/41),改LAP者妊娠7例,妊娠率为33.3%(7/21),P0.05,差异无统计学意义。结论 THL具有操作简单、准确、微创、安全、经济、留院观察时间短等优点,举宫器配合THL与宫腔镜联合检查可作为临床或超声检查均无明显盆腔疾病证据的不明原因不孕症患者检查的首选方法,可避免盲目行经腹腹腔镜手术。     

慢病毒介导β-珠蛋白基因添加在β-地中海贫血基因治疗中的应用

目的:构建全长人β-珠蛋白基因慢病毒载体,稳定转染K562细胞使得β-珠蛋白高效表达,为β-珠蛋白基因添加治疗奠定基础。方法:采用PCR扩增人正常β-珠蛋白基因,加上Sph I和Not I两个酶切位点进行T载体克隆,获得重组质粒p UC57-β-globin。用限制性内切酶连接目的基因片段和慢病毒载体,筛选获得慢病毒表达载体LV-β-globin,测序。将慢病毒载体转染293T细胞,包装病毒。用LV-β-globin感染K562细胞。采用流式细胞仪检测荧光效率,运用实时PCR及Western Blotting检测K562细胞中β-珠蛋白mRNA及蛋白表达情况。结果:通过PCR获得长度为2 128 bp的目的基因。连接p UC57载体和慢病毒表达载体,慢病毒表达载体LV-β-globin构建成功,序列正确。LV-β-globin转染K562细胞72 h后,显示大量绿色荧光表达,荧光效率为94.8%。β-珠蛋白mRNA 2-ΔΔCt值为4.080±0.078,高于对照组;β-珠蛋白灰度值为1.063±0.082,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建并包装含人β-珠蛋白基因的慢病毒载体并高效稳定表达。     

泼尼松对白细胞介素-17/白细胞介素-23炎症轴调节作用的分子机制

目的 探讨泼尼松对IL-23/IL-17炎症轴的影响.方法 分离昆明小鼠脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,MTT法检测不同浓度(0、0.001、0.01、0.1、1、10、100、1 000 μm)泼尼松对小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响.另取小鼠脾淋巴细胞分为4组,A组用空白完全培养液培养、B组用含0.001 μm泼尼松的培养液培养24 h后用含有转化生长因子-β1 (TGF-β1)、白介素-6(IL-6)、白介素-23(IL-23)培养液继续培养48 h;C、D组用含TGF-β1、IL-6、IL-23培养液培养48 h后,C组改用含0.001 μm泼尼松的培养液、D组改用空白培养液继续培养24h.收集各组细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法检测IL-17a含量;采用实时荧光定量反转录PCR检测IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达水平.结果 0.001 μm泼尼松对小鼠脾淋巴细胞的增殖即有抑制作用(P＜0.05).B组IL-17含量低于A、C、D组(P＜0.05),C组IL-17含量低于A组、D组(P＜0.05).A、B两组IL-23 mRNA表达量比较,差异无统计学差异意义(P＞0.05),C组IL-23 mRNA表达量低于D组(P＜0.05).结论 泼尼松能够抑制淋巴细胞的增殖,当机体免疫系统失衡促炎因子高表达时,泼尼松能够抑制IL-17分泌,抑制IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达而发挥免疫抑制作用.     

反复种植失败患者黄体中期自然杀伤细胞的表达研究

目的 比较反复种植失败(RIF)患者和经产妇黄体中期外周血和子宫内膜组织CD56⁺自然杀伤(NK)细胞和CD16⁺NK细胞的差异,探讨RIF患者全身和局部免疫的特点。方法 选取2018年1月至12月在广西壮族自治区妇幼保健院行体外受精(IVF)助孕的RIF患者作为RIF组(20例),经IVF助孕成功分娩1年以上的患者作为对照组(20例),取两组患者黄体中期的外周血和子宫内膜组织,使用流式细胞术测定两组外周血CD56⁺NK细胞的比率,并使用免疫组织化学方法检测两组子宫内膜CD56⁺NK细胞和CD16⁺NK细胞的表达。比较两组患者的外周血CD56⁺NK细胞的比率和子宫内膜CD56⁺NK细胞和CD16⁺NK细胞的表达。结果 RIF患者黄体中期外周血CD56⁺NK细胞比率高于正常组,子宫内膜CD56⁺NK细胞比率低于正常组,CD16⁺NK细胞比率高于正常组...