小牛血去蛋白提取物注射液质量分析

目的：评价国内不同企业生产的小牛血去蛋白提取物注射液系列品种的质量现状及存在问题。方法：采用法定检验方法和探索性研究进行样品检验,探索性考察样品的活力测定,肽段分析、降压物质、钾、钠含量等。结果：按照法定检验,总合格率为81.6%,不合格项目主要为总固体、可见异物、呼吸活性等。结论：目前国内小牛血去蛋白提取物注射液系列产品的质量标准及产品质量均存在一定缺陷,需进一步完善。     

细胞损伤修复法和钙蛋白酶抑制法测定脑蛋白水解物注射液活性的比较研究

目的:为脑蛋白水解物注射液活性检测方法的建立提供依据。方法:采用PC12细胞过氧化氢损伤修复法和钙蛋白酶抑制法对脑蛋白水解物注射液的活性进行检测。结果:2种方法均可检测出样品的活性。结论:2种方法各有优缺点,尚需进一步验证。     

生长发育过程中血细胞流变学特性的研究进展(综述)

血液中红细胞、白细胞和血小板等在体内行使其生理功能的过程中经历了各自的分化发育过程，这些过程伴随有细胞流变学特性的变化。在此主要综述近年来国内外关于血液细胞在分化发育中的流变学研究，拓展了生物流变学和生物物理学的研究领域。     

腺苷酸琥珀酸合成酶2对肝癌细胞迁移作用的研究

目的 探讨腺苷酸琥珀酸合成酶2(adenylosuccinate synthetase isozyme 2,ADSS)在肝癌发生、发展中的作用。方法使用公共数据库及肝癌细胞对ADSS在肝癌中的表达及其对肝癌患者5年生存率的影响进行分析;在HepG₂及LM3细胞中沉默ADSS基因;使用细胞划痕实验及Transwell实验研究ADSS对肝癌细胞的迁移的影响;使用蛋白印迹法检测ADSS沉默细胞中上皮间质转化标志物的表达;检测LM3-Sh-ADSS2基因及代谢产物回补后上皮间质转化标志物及迁移能力改变。结果 ADSS在肝癌中表达上调且与患者5年生存率呈负相关;ADSS促进肝癌细胞的迁移;ADSS参与了肝癌细胞的上皮间质转化过程。结论 ADSS基因在肝癌中表达量增高并且可能通过参与上皮间质转化过程促进肝癌细胞的转移。     

颈动脉滤器脑保护装置的血液流变学研究

目的　研究一种新型颈动脉滤器脑保护装置对颈动脉血液流变学的影响。方法　选择与人颈动脉血流比较接近的中华小型猪为动物模型,在猪颈动脉内置入滤器后分别应用激光衍射仪测量滤器远端和近端血液的流变学参数,研究颈动脉滤器置入对血液流变学的影响。结果　发现颈动脉滤器置入后,远端和近端血液的流变学参数有显著性差异,说明此新型颈动脉滤器保护装置确实能起到对脑的保护作用。     

荧光定量PCR检测重组人干扰素α2b中宿主基因组的残留DNA

目的 采用荧光定量PCR法检测注射用重组人干扰素α2b半成品中宿主基因组的残留DNA.方法 选择重组人干扰素α2b工程菌的宿主菌23S核糖体RNA基因为模板设计扩增引物,建立基于SYBR Green Ⅰ荧光染料的荧光定量PCR检测法.结果 宿主基因组DNA的量与荧光定量反应的Ct(循环阈值)值呈良好的线性关系(r~2=0.9803).结论 所用方法操作简便、快速,可用于重组人干扰素α2b制备过程中的质量监控及半成品的检定.     

人Flt3配体基因的克隆及其在CHO细胞中的表达

目的 克隆人Flt3配体(Flt3 LIg and,FL),并在CHO细胞中进行表达.方法 从健康人外周血中提取总RNA,通过RT-PCR技术,扩增Flt3配体胞外区cDNA功能性片段,经DNA测序证实后,将得到的片段基因插入pcDNA3.0表达载体,构建了pcDNA3.0-FL真核表达载体;将重组质粒pcDNA3.0-FL转染CHO细胞,经G418筛选出阳性细胞克隆,扩大培养,提取细胞总蛋白,用SDS-PAGE分离并Western blotting检测到在相对分子质量约24 000处有一显色条带.结果 FL胞外区cDNA被正确克隆到真核表达载体pcDNA3.0中并在CHO细胞中成功表达.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-FL并在CHO细胞中成功表达,为FL的相关研究和应用开发奠定了基础.     

重组人CD40 L功能性片段在CHO细胞中的表达

克隆人CD40 L基因功能性片段(E107-L261),并在CHO细胞中进行表达.从健康人扁桃体组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术,扩增CD40 L胞外区cDNA功能性片段,经DNA测序证实后,将得到的片段基因插入pcDNA3.0表达载体,构建了pcDNA3.0-hCD40 L真核表达载体.将重组质粒pcDNA3.0-hCD40 L转染CHO细胞,经G418筛选出阳性细胞克隆,扩大培养,提取细胞总蛋白,用SDS-PAGE分离并western blot-ting鉴定其特异性,通过小鼠脾淋巴细胞增值实验检验其生物学活性.结果,CD40 L胞外区功能性片段(E107-L261)cDNA被正确克隆到真核表达载体pcDNA3.0中并在CHO中成功表达,具有免疫学和生物学活性.结论:真核表达载体peDNA3.0-CD40 L的成功构建并在CH0中成功表达.     

重组胶质细胞源性神经营养因子腺病毒保护小鼠中脑多巴胺能神经元

目的：观察携带大鼠来源的胶质细胞源性神经营养因子(rGDNF)的重组腺病毒在小鼠帕金森模型中有无保护中脑多巴胺(DA)能神经元对抗神经毒素甲基-苯基-四氢吡啶(MPTP)损伤的作用。方法：将LacZ重组腺病毒(Ad-LacZ)通过脑立体定位仪注入小鼠单侧纹状体，分别于注射后24h、72h、10d和30d灌流取脑做X-Gal染色，观察报告基因在小鼠脑内的表达情况；将rGDNF重组腺病毒(Ad-rGDNF)通过脑立体定位仪注入小鼠单侧纹状体。两者均于72h后给予MPTP损伤中脑DA能神经元，1周后用高压液相色谱分析纹状体中DA、3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量。结果：Ad-LacZ注射后24h表达较弱，72h逐渐增强，10d仍可见到较强表达，30d则逐渐减弱。LacZ基因的表达范围比较局限，胶质细胞和神经元都能被感染，并且未见明显的腺病毒载体引起的细胞毒性作用。注射Ad-rGDNF侧纹状体DA含量较MPTP损伤组和MPTP Ad-LacZ组显著升高，而未注射侧无明显升高。此外，DA主要代谢产物DOPAC和HVA的含量也明显升高，而DOPAC／DA、HVA／DA比值则明显降低。结论：Ad-rGDNF能显著保护中脑DA能神经元对抗MPTP的损伤。     

人凝血酶国家标准增订概况

目的:正确理解和使用2020年版《中国药典》新增各论品种“人凝血酶”,为本品种的国家标准的顺利实施提供应用指南。方法:从新增背景、国内外标准比较、关键质量属性制定过程几方面对人凝血酶各论增订情况进行简述。结果与结论:将人凝血酶企业注册标准上升为国家药典标准,有利于血液制品的科学监管。