卵巢上皮性癌相关抗原cDNA表达文库的构建

目的:构建人卵巢上皮性癌cDNA表达文库.方法:提取卵巢上皮性癌患者腹腔积液肿瘤细胞mRNA,反转录合成双链 cDNA,末端补平后连接EcoRI接头,末端磷酸化,XhoI消化,将双末端黏性化的双链cDNA经过凝胶层析柱,收集大于500 bp的cDNA片段,加工后与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌XL1-blue MRF′,构建cDNA文库,检测文库容量和质量.结果:cDNA表达文库原始库容为1.82×106,扩增后文库的库容为7.5×109,重组效率约为90%,插入片段大小主要集中在1.0～2.0 kb.结论:成功构建了一个卵巢上皮性癌cDNA表达文库,为下一步筛选、鉴定卵巢上皮性癌相关抗原奠定了基础.     

宫颈癌前哨淋巴结活检的假阴性原因分析

目的探讨染料法识别宫颈癌前哨淋巴结（SLN）活检时出现假阴性的原因。方法选择49例早期宫颈癌患者,术前宫颈瘤周注射亚甲蓝,行广泛子宫切除＋盆腔淋巴结清扫术;进行前哨淋巴结定位及病理学检查。结果SLN识别率为87．8％（43／49）,灵敏度为81．8％,准确率为92％,假阴性率为18．2％。结论本组假阴性与肿瘤大小、淋巴转移的途径、术前放疗、病理检测方法有关。     

宫颈环形电切术对阴道镜下活检为轻度宫颈上皮内瘤样变的再评估

目的:通过宫颈环形电切术(LEEP)对阴道镜活检诊断为轻度宫颈上皮内瘤样变(C INⅠ)进行重新评估,比较不同病理类型的高危型人乳头瘤病毒感染及TCT(液基细胞学检查)检测结果,评估阴道镜活检诊断C INⅠ的准确性和全面性。方法:选取2007年1月~2009年11月就诊于柳州市人民医院妇科的宫颈疾病患者,行TCT、HPV16及18 DNA及阴道镜检查,同时选取阴道镜下宫颈活检确诊为C INⅠ的患者90例,短期内行LEEP术,并采取自身对照法,对比阴道镜下活检和LEEP术病理结果。结果:阴道镜下活检与宫颈LEEP术后病理结果的符合率为81.11%(73/90),宫颈LEEP术后有49例降级为炎症,占54.44%(49/90),24例仍为C INⅠ,占26.67%(24/90),LEEP术后病理级别未升级的73例患者中,有16例HPV16、18阳性,占21.92%(16/73);宫颈LEEP术后病理升级的有17例,占18.89%(17/90),C INⅡ10例,C INⅢ7例(其中4例患者因年龄大,无生育要求,自愿要求行全子宫切除术,2例术后病检为C INⅡ,1例为C INⅠ,1例LEEP术后累及腺体最后诊断为中分化鳞癌),其中HPV16、18阳性13例(C INⅡ组中有6例,C INⅢ组中有7例),占76.47%(13/17)。高危型HPV(HR-HPV)阳性率及病毒负荷量在低级别宫颈病变及高级别宫颈病变中差异有统计学意义(P<0.01),并随着宫颈病变程度的加重而逐渐升高。TCT检测结果与LEEP术后病理结果存在相关性,TCT检测结果级别偏高,LEEP术后病理结果也趋向于偏高;两种方法的检测结果存在统计学差异(P=0.000),TCT检测结果级别偏低的,LEEP术后病检结果级别可能会偏高。结论:阴道镜直视下活检对确诊C INⅠ尚不够准确,存在着高级别病变漏诊的可能;阴道镜下活检诊断为C INⅠ而细胞学检查结果为HSIL或HR-HPV病毒负荷量较高时要警惕漏诊宫颈高级别病变的可能,LEEP术在明确诊断宫颈上皮内瘤样变中优于活检,是诊断和治疗C IN的一种有效地方法。     

宫颈癌前哨淋巴结活检的假阴性原因分析

目的探讨染料法识别宫颈癌前哨淋巴结(SLN)活检时出现假阴性的原因。方法选择49例早期宫颈癌患者,术前宫颈瘤周注射亚甲蓝,行广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术;进行前哨淋巴结定位及病理学检查。结果SLN识别率为87.8%(43/49),灵敏度为81.8%,准确率为92%,假阴性率为18.2%。结论本组假阴性与肿瘤大小、淋巴转移的途径、术前放疗、病理检测方法有关。     

卵巢癌相关抗原cDNA表达文库的筛选

目的：从卵巢癌腹腔积液肿瘤细胞cDNA表达文库中筛选卵巢癌相关抗原。方法：采用SEREX方法从卵巢癌腹腔积液肿瘤细胞构建的cDNA表达文库中筛选阳性克隆。血清学筛选出的阳性克隆与SSH所得的差异表达基因探针进行杂交,最终得到特异性较高的阳性克隆。对这些克隆进行酶切鉴定、测序分析。结果：经二轮血清学筛选和DotBlot杂交,最终得到55个在血清中有相应IgG和（或）IgM自身抗体的卵巢癌差异表达的候选肿瘤抗原克隆。经核苷酸测序、序列分析和相似性比对,结果表明这55个EST片段代表45个基因,可分为6类：①3个与已知卵巢癌相关基因相似的基因,如BARD1等;②15个与其它肿瘤相关基因相似的基因,如TM4SF1等;③6个在一些特殊组织中表达的基因,如FXR1（fragileX-relatedgene1,脆性X染色体相关基因1）等;④8个与一些特殊功能蛋白基因相似的基因,如TIZ;⑤5个与胚胎来源的基因相似的基因,如PKHD1等;⑥8个在GenBank中无相似序列的新基因,如OV-189等。结论：SEREX方法与SSH方法相结合筛选肿瘤抗原的技术路线是一种行之有效的、能筛选具有较高特异性肿瘤抗原的策略。本研究为进一步研究这些抗原在卵巢癌的发生、发展及诊断方面的应用奠定了基础。     

处女膜闭锁大量阴道积血误诊为卵巢囊肿1例分析

对处女膜闭锁大量阴道积血误诊为卵巢囊肿1例分析如下。 1 病历摘要 女，12岁。因发现中下腹部肿物1a余入外科。患者起初无腹痛、腹胀，肿物逐渐增大，近2个月偶有脐周阵发性隐胀，无明显规律。查体：T37．4℃，P94次／min，R22次／min，BP96／61mmHg。自动体位，心肺听诊未闻及异常。腹膨隆，中下腹部触及约15cm×20cm大小肿物，上界达剑突下3指，质地韧，边界欠清，无压痛，无波动感，肝脾未触及，无移动性浊音，肠鸣音正常。     

一种新型多拷贝毕赤酵母表达载体的构建

目的：构建合适的载体用于外源基因在巴斯德毕赤酵母中的正确分泌表达。方法：利用基因重组技术,对已有载体pPIC9K进行改造：除去信号肽末端的XhoI酶切位点,在多克隆位点处添加此切点;添加一个多聚组氨酸纯化标签;重建了阅读框架。结果：成功构建了一个多拷贝毕赤酵母表达载体。结论：可以利用这个表达载体对外源基因进行分泌表达。     

诺舒子宫内膜去除术与宫腔镜下子宫内膜电切术治疗异常子宫出血的疗效比较

目的比较诺舒子宫内膜去除术与宫腔镜下子宫内膜电切术治疗异常子宫出血(AUB)的有效性和安全性。方法选取2015-01~2017-01药物治疗无效的AUB患者60例,随机分为研究组和对照组各30例。研究组采用诺舒子宫内膜去除术治疗。对照组采用宫腔镜下子宫内膜电切术治疗。分别于术后1、3、6、12个月随访,比较两组的疗效及术后并发症发生率。结果两组术后月经量均明显减少或闭经,有效率和闭经率差异无统计学意义(P0.05)。研究组手术时间明显短于对照组(P0.05),术中出血量少于对照组(P0.05)。对于术中及术后并发症的发生情况,研究组均优于对照组,但只有电解质紊乱和术后1个月、3个月的腹痛发生情况差异有统计学意义(P0.05)。结论在治疗AUB中,诺舒子宫内膜去除术和传统的宫腔镜下子宫内膜电切术均有较好的疗效,但诺舒子宫内膜去除术的安全性优于子宫内膜电切术。     

外阴paget病1例

患者女性,79岁,外阴干涩变白4月余,加重2个月,无外阴瘙痒,无阴道异常流血。因病灶进行性扩大,于2008年7月23日到我科就诊,在右侧白色病变处取活检提示:外阴paget病。镜下见表皮内有散在的大细胞,胞浆空,Her-2阳性,CK7阴性,HMB45散在阳性,可排除恶性色素瘤侵犯。     

输卵管癌误诊原因分析

目的：探讨原发性输卵管癌的临床特点,分析原发性输卵管癌的误诊原因。方法：对1980年1月-2007年12月于我院住院治疗的原发性输卵管癌患者7例临床资料进行回顾性分析。结果：本组病例无典型的输卵管癌三联征,术前确诊率为14.3％（1／7）,误诊率85．7％（6／7）。结论：重视不正常的阴道流血、排液,盆腔包块、腹痛等临床表现,提高对输卵管癌的警惕性,并借助辅助检查努力降低误诊率。