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1.
CpG ODN增强乙肝疫苗在老年小鼠中的免疫应答 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨CpG ODN对老年小鼠的体液和细胞免疫应答的增强作用。方法:选用老年C57BL/6小鼠,将乙肝疫苗和10μg、20μg CpG ODN同时或单独肌注到小鼠体内,两周后以同样剂量加强免疫一次,再过3周后摘除眼球取血,用EILSA方法检测抗HBs16;抗体和IL-12;无菌取脾脏作HE染色,观察脾脏淋巴细胞变化。结果:10μg和20μg CpG ODN与疫苗同时注射组产生的抗体绝对量分别是单独注射疫苗组的3倍和4倍;产生的IL-12水平较对照组有明显升高,且20μg比10μCpG组产生的IL-12水平更高。光镜下各组的脾脏淋巴细胞的变化如下:正常老年鼠组脾脏淋巴细胞较正常青年鼠组明显稀少;老年鼠 10μgCpG组脾脏淋巴细胞较正常老年鼠组有了明显增加,且细胞核也明显增大;20μgCpG组增加的更加明显。结论:CpG ODN能增强乙肝疫苗在老年小鼠中的体液和细胞免疫应答。 相似文献
2.
目的:设计并筛选能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞、人结肠癌Caco2细胞、人胃癌SCG-7901细胞增殖的增殖细胞核抗原(PCNA) siRNA。方法:总结以往提出的siRNA 设计原则的基础上,设计4 条PCNA siRNA,体外转录合成PCNA siRNA;并作用于3 种肿瘤细胞,WST-8法检测细胞增殖活性,筛选能有效抑制肿瘤细胞增殖的siRNA序列;RT-PCR检测细胞PCNA mRNA水平;免疫细胞化学方法检测 PCNA 蛋白表达水平。结果:4 条PCNA siRNA中,有3 条序列(No.2、No.4、No.3)的siRNA能有效抑制3 种肿瘤细胞的增殖;其中No.2、No.4作用效果最优,以50 nmol/L浓度作用48 h,对3种肿瘤细胞的增殖抑制率均可达到62%以上,No.2、No.4 PCNA siRNA均能在mRNA和蛋白水平显著下调PCNA的表达。结论:PCNA siRNA能在体外有效抑制SMMC-7721细胞、Caco2细胞、SCG-7901细胞的增殖,其适宜作用浓度为50 nmol/L,适宜作用时间为48 h。 相似文献
3.
重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果。方法 采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU和洛铂对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;碘化丙锭单染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot法检测PP-22作用后细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 重楼单体PP-22能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组和DMSO组相比有显著差异;PP-22联合不同浓度的5-FU和洛铂作用于SW620细胞48 h,可提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性;不同浓度PP-22作用于SW620细胞后,细胞周期阻滞于S期;PP-22作用后存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加。结论 PP-22能显著抑制人结肠癌SW620细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性。 相似文献
4.
目的: 探讨沙利度胺(thalidomide, THD)对转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast, HELF)结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)基因启动子激活的影响。方法: 构建含有人类CTGF基因启动子的报告基因载体pGL3-CTGFP,将其瞬时转染HELF细胞,通过检测萤光素酶的活性,观察TGF-β1和THD对CTGF基因启动子活性的影响。结果: TGF-β1能以剂量依赖方式和时间依赖方式显著增加HELF细胞中报告基因的活性(P<0.05),最佳剌激浓度是5 μg/L,萤光素酶相对活性为对照组的2.16倍,最佳剌激时间为12 h,萤光素酶相对活性为对照组的2.52倍;THD对报告基因的基础活性无明显影响(P>0.05),但以剂量依赖方式显著抑制TGF-β1上调报告基因活性的效应(P<0.05)。结论: TGF-β1能以剂量依赖方式和时间依赖方式上调HELF细胞中CTGF基因启动子的活性,而THD能以剂量依赖方式抑制此过程。 相似文献
5.
6.
目的:研究聚乙烯亚胺(PEI)-PKC-α反义脱氧核寡酸(ASODN)对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:WST法和苔盼蓝基数法研究细胞增殖抑制作用;Hoechst33258染色观察凋亡细胞的形态学改变;流式细胞术(PI单染色和AnnexinⅤ+PI双染色)检测细胞凋亡。结果:PEI-ASODN 对SMMC-7721细胞的具有明显的增殖抑制作用;引起细胞核固缩、核碎裂;流式细胞术结果显示,PEI-ASODN组随药物浓度的增加,亚二倍体细胞阳性百分率亦增高,早期凋亡细胞百分率也明显增高。结论:PEI-ASODN能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,并有效诱导细胞出现早期凋亡。 相似文献
7.
目的:观察阿米卡星对肾小管上皮细胞的损伤及热休克蛋白70表达的影响。方法:常规培养人肾小管上皮细胞系HK-2细胞,给予阿米卡星(100μg·mL-1)损伤或MnCl2(2μg·mL-1)保护,于24,48,72,96 h时分光光度法测定细胞增殖,乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、N-乙酰-β氨基葡萄糖苷酶(NAG)含量,逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测HSP70 mRNA表达,Western-blot检测HSP70蛋白表达。结果:阿米卡星损伤HK-2细胞后,细胞增殖显著减少,LDH释放量、NAG含量、MDA含量增加显著,SOD活力明显下降,HSP70 mRNA及其蛋白的表达显著增加(与对照组比,P<0.01);给予MnCl2干预后,HK-2细胞的细胞增殖明显有所恢复,LDH释放量、NAG含量、MDA含量有所下降,SOD活力有所增加,HSP70 mRNA及其蛋白的表达有所下降(与损伤组比,P<0.01)。结论:阿米卡星的肾脏毒性与HSP70的表达存在密切的联系。 相似文献
8.
9.
目的 观察增殖细胞核抗原(PCNA)小干扰RNA(siRNA)对人结肠癌CaCO2细胞抑制作用。方法 WST-8法和克隆形成抑制研究No.2和No.4PCNAsiRNA对CaC02细胞的作用;碘化丙锭(PI)单染检测细胞周期,Hochest33258染色观察凋亡形态,膜联蛋白(Annexin)V和PI双染测定捅亡百分率。结果 No.2和No.4PCNA siRNA与CaCO2细胞作用,增殖抑制率分别为(72.24±1.01)%和(74.67±3.35)%;克隆形成抑制率均达90%;两种药物转染细胞均出现明显亚二倍体峰,Sub-G1+Go/G1期减少,S+G2/M期增多;siRNA处理组细胞有较多凋亡形态变化;凋亡率随浓度增加而增加,且早期凋亡率持续高于晚期捅亡/坏死率。结论 PCNAsiRNA显著抑制人结肠癌CaCO2细胞增殖及克隆形成;细胞停留于G2/M期,明显诱导细胞凋亡。 相似文献
10.
三氯化二砷联合Gal-PEI-ASODN对Bel-7402细胞增殖的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨以半乳糖受体为靶向的投递系统对肝癌化疗药物敏感性的影响。方法 用半乳糖 (Gal)-聚乙烯亚胺 (PEI)交联物与c -myc反义核酸 (ASODN)形成Gal-PEI-c -mycASODN复合物 ,与三氧化二砷(As2 O3 )联合应用 ,观察其对人肝癌Bel- 74 0 2细胞增殖的作用。结果 As2 O3 联合Gal-PEI-c -mycASODN复合物对Bel- 74 0 2细胞增殖的IC50 比单用As2 O3 或As2 O3 联合单纯c-mycASODN的IC50 明显下降。结论 半乳糖受体为靶向的投递系统可提高肝癌对化疗药物的敏感性。 相似文献