结缔组织生长因子单链抗体对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(ScFv)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化模型各阶段的支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数及纤维化程度的影响.方法:昆明小鼠36只,随机分为对照组、模型组和ScFv组,每组12只;后2组麻醉后气管内滴入博莱霉素制备模型,滴药后第2天开始尾静脉分别注入生理盐水或ScFv(4 mg·kg-1),3次·周-1,对照组给予等量的生理盐水;气管内滴药后第7、14、28天分3批处死小鼠,收集左肺BALF,进行炎症细胞计数和分类;肺组织HE染色后观察肺纤维化程度.结果:(1) 第7天模型组有明显的肺泡炎,ScFv组小鼠肺泡炎症病变轻微;第28天模型组出现肺纤维化,ScFv组纤维化程度明显低于模型组(P<0.05);(2) 第7、14天模型组小鼠BALF中细胞总数及巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞均明显高于对照组(P<0.05),ScFv组明显低于模型组(P<0.05).结论:CTGF ScFv可减少肺纤维化模型BALF中的炎症细胞,减缓肺纤维化的发生发展.     

一种新型结缔组织生长因子人源单链抗体的可溶性表达以及分离纯化

目的：研究单链抗体（scFv）在不同载体和菌株中的表达以及表达产物的免疫学活性评价。方法：将人源化单链抗体的基因通过酶切、连接等生物技术的方法克隆到pET28a、pET32a和pET-EI：X3种不同的载体中,并选用不同的表达菌株进行表达,观察单链抗体的表达情况并对抗体的可溶性表达进行优化,采用亲和层析和分子筛层析对目的蛋白进行纯化,并在体外研究目的蛋白的生物学活性。结果：抗结缔组织生长因子单链抗体在pET28a/BL21（DE3）中不能表达,在pET32a/BL21（DE3）和pET-EI：X/BLR（DE3）中均成功表达,但是在pET-EI：X/BLR（DE3）中scFv抗体无法从内含肽（intein）上裂解。scFv在pET32a/BL21（DE3）中表达量占总蛋白的30%左右,经过两步层析纯化后纯度达到85%以上。体外免疫试验显示,目的蛋白具有良好的免疫学活性。结论：人源化抗结缔组织生长因子单链抗体scFv在大肠杆菌中的表达需要分子伴侣,通过低温表达策略在pET32a/BL21（DE3）中成功得到表达。     

结缔组织生长因子单链抗体对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化程度及羟脯氨酸含量的影响

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(ScFv)对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠的治疗作用.方法:昆明小鼠36只,随机分为对照组、模型组和治疗组,每组12只;对照组气管内滴入生理盐水,模型组和治疗组气管内滴入博莱霉素(5 mg·kg-1)制备肺纤维化模型.第2天开始治疗组尾静脉注射ScFv(4 mg·kg-1),对照组和模型组给予等量的生理盐水(约100 μl·次-1),3次·周-1.第14、28天分两批处理动物,用HE染色行病理组织学检查并进行纤维化分级,用酸水解法测定肺组织羟脯氨酸的含量.结果:对照组小鼠肺组织无纤维化形成;模型组肺组织可见肺泡破坏,肺泡间隔大量纤维化,肺组织中羟脯氨酸含量及纤维化程度较对照组明显增高(P<0.01).治疗组肺组织纤维化程度较模型组明显减轻,且羟脯氨酸含量较模型组显著降低(P＜0.01).结论:ScFv作为CTGF单链抗体可明显减轻纤维化程度,有可能成为治疗肺纤维化一种新的药物.     

微生物源抗菌除臭剂——万洁芬在禽畜养殖中的应用研究

采用新型微生物制剂万洁芬对鸡粪及鸡舍的处理试验,结果表明:其在短期内能有效去除禽粪臭味。用万洁芬处理鸡舍后,舍内NH3和H2S浓度分别下降73.2%和81.6%。且对鸡舍微生物有较好的杀灭效果,15d内对鸡舍空气中葡萄球菌和大肠杆菌的灭菌率均达到90%以上;产蛋率平均提高6%。