鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体的构建

目的 构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体。方法 应用重组ＤＮＡ技 术,将人工合成的尿激酶原信号肽基因与鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合基因连接,并保 证在同一阅读框架,然后分别插科到pcＤＮＡ３和ＰＭＪＫ３两种真核表达载体中。结果构建成可以在真核细胞中分泌表 达鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的重组质粒pcＤＮＡ３－Ｄ１和ｐＭＪＫ３－Ｄ１。结论为建 立稳定分泌表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的细胞工程株奠定了基础。     

手术切口应用纳米银抗菌敷料的意义及机理探讨

目的探讨纳米银抗菌敷料应用于外科手术切口的临床效果及机理探讨。方法将96例外科手术后患者随机分为对照组48例(常规切口敷料)和观察组48例(纳米银抗菌敷料),观察组以生理盐水清洗切口后使用纳米银抗菌敷料覆盖,对照组以碘伏消毒切口后使用常规无菌敷料覆盖,对照两组患者切口甲级愈合时间、感染情况、切口换药频率、切口细菌培养数量、1年后随访两组患者疤痕发生率。结果对照组切口甲级愈合时间(10±0.8)d、感染率(5例;10.41%)、切口换药频率(2±0.5)、切口周围细菌浓度(18±2cfu/g);观察组切口甲级愈合时间(6±0.2)d、感染率(0例;0%)、切口换药频率(1±0.2)、切口周围细菌浓度(5±0.11cfu/g);及切口周围细菌培养率;术后1年回访对照组疤痕发生率(3例,6.25%);观察组疤痕发生率(1例,2.0%)两组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论纳米银抗菌敷料可以大大促进外科手术部位伤口甲级愈合时间、增加愈合程度,并减少切口感染及瘢痕化发生值得临床广泛应用。     

美国生防产品研发现状及启示

自2001年以来,美国在药品、疫苗和诊断试剂等生防产品研发方面做了较多工作,取得了一些经验,这对我国的生防产品研发具有一定借鉴意义。现分析报告如下。     

5-氟脲嘧啶、重组干扰素-α-2b与顺铂治疗晚期食管癌的Ⅱ期临床试验

重组α-干扰素(IFN)可增加5-氟脲嘧啶(5-FU)和顺铂的细胞毒作用。为进一步确定此方法对转移性或局部晚期食管癌的疗效与毒性,进行了三药联合(FIP)的Ⅱ期临床试验。 选择病理活检证实的Ⅲ期或Ⅳ期食管鳞状细胞癌或腺癌24例,其中1例病理复查后排除。中数年龄63岁(43～73岁),其中男性18例;鳞癌22例,腺癌1例;Ⅲ期10例,Ⅳ期13例。所有病人ECOG状态0或1,白细     

鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低分子量尿激酶融合蛋白在中国仓鼠卵巢细胞中的高效表达

目的：构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低分子量尿激酶融合基因,并在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中高效表达。方法：应用重组ＤＮＡ 技术,将编码尿激酶原信号肽的ＤＮＡ 片段,与鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低分子量尿激酶基因融合在一起,并插入真核表达载体ｐＭＪＫ３ 中,构建成重组质粒ｐＭＪＫ３Ｄ。通过细胞电击穿孔法,将该重组质粒转染到中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株（ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－ ）中,转染细胞经选择培养基筛选,并采用ＭＴＸ加压扩增培养。结果：得到了高效表达融合蛋白的细胞株,表达水平为３００ Ｕ／（１０６ 细胞·ｄ）。通过ＥＬＩＳＡ 和溶解圈方法鉴定,该融合蛋白可与Ｄ－二聚体结合,并具有激活纤溶酶原溶解纤维蛋白的活性。结论：成功构建并获得高效表达双功能融合蛋白的细胞株,为进一步研究这一双功能融合蛋白的体内外特异溶栓活性以及评价其作为新型导向溶栓制剂奠定了基础。     

新型粘膜免疫佐剂候选株LTAˉB+的构建

目的 :产肠毒素大肠杆菌产生的不耐热肠毒素 (LT)不仅是很强的口服免疫原 ,而且其粘膜免疫佐剂作用显著。LT的毒性限制了它的直接使用 ,希望通过体外定点诱变技术 ,获得具有粘膜免疫佐剂作用的LT减毒株。方法 :以人源LT基因为研究对象 ,首先构建了重组质粒 pUC19 LT ,然后用单引物PCR法和重叠延伸PCR法分别构建了LTQ7和K63基因突变体。结果 :CHO细胞体外试验和家兔肠结扎体内试验毒性测定的结果表明 ,LT突变体K63的毒性明显降低。结论 :K63有希望成为候选的高效粘膜免疫佐剂。     

复方丹参注射液引发高热1例

患者,女,70岁。1999年10月21日因糖尿病伴视网膜病变、冠心病入院治疗。入院检查:无慢性咳嗽咳痰、肺部无罗音,既往无低热盗汗史,淋巴结检查无肿大,体温37.9℃。入院当日静滴两组液体,①组:ＮＳ250ｍｌ、胰岛素4Ｕ、复方丹参16ｍｌ(北京第四制药厂批号990701,规格10ｍｌ支,品名:复方丹参注射液,成分:丹参、降香等);②组:ＮＳ500ｍｌ、ＣｏＡ100Ｕ、ＡＴＰ40ｍｇ、维生素Ｃ2ｇ、维生素Ｂ60.2ｇ、肌苷0.4ｇ。按先①后②顺序使用。滴至①组时,患者出现高热、寒战现象,体温39.8℃。经肌注非那根25ｍｇ及物理降温后,体温降至38℃以下。当时认为是…     

鼠抗人纤维蛋白单链抗体—低相对分子质量单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体的构建

目的：构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体。方法：应用重组DNA技术,将人工合成的尿激酶原信号肽基因与鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合基因连接,并保证在同一阅读框架,然后分别插入到pcDNA3和PMJK3两种真核表达载体中。结果：构建成可以在真核细胞中分泌表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的重组质粒pcDNA3-D1和pMJK3-D1。结论：为建立稳定分泌表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的细胞工程株奠定了基础。     

生物安全——中国公共卫生的严峻挑战

生物安全是防范和控制与生物有关的各种因素对国家经济、社会、公众健康及生态环境所产生的危害或潜在风险,核心是在国家层面上免受生物因子的攻击。致病性微生物所导致的生物危害,如传染病的巨大危害、生物武器扩散、生物恐怖威胁、非和平目的应用生物技术、病原微生物管理失控、微生物学实验室的安全隐患等等,无疑是最重要最现实的生物安全问题。正视和重视生物安全问题,完善国家安全管理机制;加强公共卫生基础设施建设,完善突发公共卫生事件应急机制;注重法制,完善法规,依法维护生物安全,强化科学研究,科学防控生物危害,切实加强致病性微生物全过程全系统安全管理。