体外导入外源IL-10基因对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌的影响

目的利用重组复制缺陷型腺病毒AdIL-10将外源IL-10基因导入肝星状细胞并观察其对肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ胶原分泌的影响.方法用传至1～2代的大鼠肝星状细胞以2×105/孔接种于24孔板,按每组6复孔分为三组(1)单纯肝星状细胞培养组;(2)AdGFP对照组肝星状细胞培养24 h后取病毒AdGFP以感染复数50感染肝星状细胞;(3)AdIL-10组肝星状细胞培养24 h后取病毒AdIL-10以感染复数50感染肝星状细胞.3 d后分别收集各组肝星状细胞, .提取总RNA.结果与单纯肝星状细胞培养组相比,AdIL-10组的IL-10mRNA表达明显增强(P＜0.01),而AdGFP对照组的IL-10 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);AdIL-10组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达明显降低(P＜0.01),而AdFP对照组的Ⅰ型胶原和置型胶原mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论重组腺病毒AdIL-10感染肝星状细胞后可抑制肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ胶原分泌.     

腹主动脉十二指肠瘘致上消化道出血一例

患者男,62岁.因2 d内解柏油样便3次、呕血1次入院.患者2 d前无明显诱因下解柏油样便2次,每次约200 g,伴乏力,纳差,当天中午12点呕鲜红色液体1次,约300 ml,伴血凝块,有心慌、头晕.     

甲硝唑注射液治疗后出现精神症状一例

患者男,75岁。因慢性胆囊炎急性发作于2009年1月17日入院。入院检查：体温36.5℃,脉搏70次／min,呼吸20次／min,血压160／90mm Hg（1mm Hg=0.133kPa）。神志清楚,自主体位,查体合作,对答切题。2年前患脑梗死,无明显后遗症,既往无药物过敏史。入院后查肝、肾功能正常。     

大鼠白细胞介素-10基因全长cDNA的克隆和鉴定

背景：肝纤维化病程迁延且药物治疗效果不理想．基因治疗将成为这一领域研究的热点。研究显示白细胞介素(IL)-10对肝脏具有保护作用，可阻止肝纤维化的发生、发展。目的：克隆并鉴定Sprague-Dawley(SD)大鼠IL-10基因的全长cDNA，为进一步构建大鼠IL-10腺病毒重组子和肝纤维化基因治疗的研究奠定基础。方法：自行设计IL-10上下游引物，以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从SD大鼠脾脏单核细胞中扩增编码大鼠成熟IL-10肽链的cDNA片断。扩增产物与连接载体pMD-18T连接后转化感受态菌DH5α，构建重组载体pMD-18T-IL-10。结果：以SD大鼠脾脏单核细胞总RNA为模板，RT—PCR扩增出大小为540bp的大鼠IL-10 cDNA片断。所构建的重组质粒经HindⅢ KvnⅠ双酶切显示含有目的基因片段，测序结果证实扩增出的DNA片断与大鼠IL-10基因序列相符，表明编码区无基因突变。结论：成功地克隆了大鼠IL-10基因的全长cDNA，并构建了重组载体pMD-18T-IL-10。     

腹水超滤浓缩腹腔回输治疗顽固性腹水疗效观察

目的 观察腹水超滤浓缩腹腔回输治疗顽固性腹水的疗效.方法对37例顽固性腹水患者进行76次腹水浓缩回输治疗,观察治疗前后尿量、腹围、心率、血压、血电解质、血浆白蛋白、血总胆红素指标变化.结果治疗后较治疗前尿量明显增加[(1038.00±391.38) ml比(632.63±300.80) ml,P＜0.01],腹围明显减小[(86.49±10.61)cm比(96.71±10.16)cm,P＜0.01],治疗前后心率、血压、血电解质、血浆白蛋白、血总胆红素比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论腹水超滤浓缩腹腔回输治疗顽固性腹水有一定疗效.     

体外导入外源IL-10基因对HSC增殖的影响

目的利用重组复制缺陷型腺病毒AdIL 10将外源IL 10基因导入肝星状细胞 (HSC) ,并观察其对HSC增殖的影响。方法将本实验室自行构建的重组腺病毒质粒pAdIL 10用Lipofectamin包装转染HEK 2 93细胞 ,即可获得重组腺病毒AdIL 10。应用胶原酶原位灌注和密度梯度离心法分离大鼠HSC ,当HSC生长至 80 %密度时 ,以 5× 10 4细胞 /孔接种于 96孔板 ;HSC培养 2 4h后 ,取病毒AdIL 10以感染复数 (MOI) 5 0感染HSC ;用MTT法检测HSC增殖率。结果pAdIL 10经 2 93细胞包装 ,3d后可观察到绿色荧光蛋白 (GFP)表达 ;AdIL 10感染HSC 3d后可观察到GFP表达 ,且HSC增殖受到抑制。结论重组腺病毒AdIL 10感染HSC后可抑制其增殖     

冠心病伴代谢综合征患者冠状动脉病变特点及与相关危险因子相关性的分析

目的探讨冠心病（CHD）伴代谢综合征（Ms）患者冠状动脉病变特点及与相关危险因子[肿瘤坏死因子α（TNF—q）和高敏C反应蛋白（hs—CRP）]的相关性。方法检测211例CHD患者空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（2hPBG）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、TNF-α、hs-CRP,并常规检查体重指数、腹围、血压。其中135例CHD患者行冠状动脉造影检查,根据病变损害程度评分。结果211例CHD患者中有76例（36％）伴MS,其冠状动脉病变分数高于不伴MS者。FBG、2hPBG、TC、TG、LDL—C、HDL—C、血压、TNF—α、hs—CRP水平增高与冠状动脉造影病变分数相关。伴MS者TNF-α、hs—CRP水平增高者多于不伴MS者。结论CHD伴MS患者的冠状动脉病变严重程度高于不伴MS患者,且多数伴MS患者的TNF—α、hs—CRP水平增高。MS可作为预测冠状动脉狭窄严重程度的指标之一。     

冠心病伴代谢综合征患者冠状动脉病变特点及与相关危险因子相关性的分析

目的探讨冠心病(CHD)伴代谢综合征(MS)患者冠状动脉病变特点及与相关危险因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)]的相关性。方法检测211例CHD患者空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、TNF-α、hs-CRP,并常规检查体重指数、腹围、血压。其中135例CHD患者行冠状动脉造影检查,根据病变损害程度评分。结果211例CHD患者中有76例(36%)伴MS,其冠状动脉病变分数高于不伴MS者。FBG、2hPBG、TC、TG、LDL-C、HDL-C、血压、TNF-α、hs-CRP水平增高与冠状动脉造影病变分数相关。伴MS者TNFα-、hs-CRP水平增高者多于不伴MS者。结论CHD伴MS患者的冠状动脉病变严重程度高于不伴MS患者,且多数伴MS患者的TNF-α、hs-CRP水平增高。MS可作为预测冠状动脉狭窄严重程度的指标之一。     

普萘洛尔联合5-单硝酸异山梨酯对肝硬化患者门静脉血流量影响的研究

目的:观察普萘洛尔联合5-单硝酸异山梨酯对肝硬化患者门静脉血流的影响。方法:42例肝硬化门静脉高压患者,随机分为普萘洛尔组14例,5-单硝酸异山梨酯组14例,普萘洛尔与5-单硝酸异山梨酯联合组14例。分别给上述3组普萘洛尔10 mg/次,3次/d,口服;5-单硝酸异山梨酯40 mg/次,1次/d,口服;普萘洛尔10 mg/次,3次/d,5-单硝酸异山梨酯40 mg/次,1次/d,口服;疗程均为12周。于治疗前后观察门静脉系统血流动力学参数。结果:普萘洛尔组,联合组2组治疗前后门静脉血流量,脾静脉血流量均显著下降(P<0.05),5-单硝酸异山梨酯组门静脉血流量,脾静脉血流量治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。联合组门静脉血流量,脾静脉血流量下降幅度优于普萘洛尔组(P<0.05)。结论:普萘洛尔联合5-单硝酸异山梨酯更有效降低门静脉血流量,具有预防上消化道出血的作用。     

新型Smad7 重组腺病毒载体的构建

目的构建鼠Smad7重组复制缺陷型腺病毒载体(AdSmad7)。方法采用常规分子生物学方法，抽提SD大鼠肝脏总RNA，RT-PCR获得鼠Smad7 cDNA片段，插入腺病毒穿梭载体质粒pAdDTrack CMV启动子下游，构建重组穿梭载体pAdTrackCMV-Smad7，线性化后与腺病毒骨架载体质粒AdEasy-l在细菌BJ5l83内同源重组，鉴定后在HEK293细胞包装成重组腺病毒AdSmad7。RT-PCR检测AdSmad7在HEK293中的表达情况，结果该重组缺陷型腺病毒载体经测序、限制性内切酶酶切分析、PCR等鉴定，与预期结果一致；重组腺病毒质粒转染HEK293细胞后3d可观察GFP明显表达；RT-PCR检测证实Smad7表达增强。结论利用新型腺病毒载体AdEasy系统可快速构建同时表达GFP和Smad7的重组复制缺陷型腺病毒AdSmad7，为进一步研究TGFl3信号转导和肝纤维化的基因治疗奠定基础。