临床药师对骨质疏松症患者的药学服务及其效果评价

目的:探讨临床药师为骨质疏松症患者提供药学服务效果。方法:将我院收治的60例骨质疏松症患者随机分为对照组与研究组,各30例。对照组进行常规治疗,临床药师参与研究组药物治疗方案的制定,指导合理用药,观察两组住院时间、药物不良反应发生率、用药知识及准确服药、日常生活能力。结果:研究组住院时间显著短于对照组(P<0.05),药物不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05),用药知识水平、遵医用药率及治疗后的日常生活能力(ADL)评分均显著高于对照组(P<0.05)。结论:临床药师在骨质疏松症治疗过程中提供具有专业、全面、个性化的药物服务指导用药治疗,可缩短住院时间、降低药物不良反应发生风险,提高日常活动能力。     

甲状旁腺激素通过非依赖PLC的PKC途径抑制成骨细胞的凋亡

目的观察甲状旁腺激素的非依赖PLC的PKC转导通路（PTH/nonPLC/PKC）是否会对成骨细胞（MC3T3-E1）的凋亡以及 细胞数量具有影响。方法培养MC3T3-E1细胞,以1.5×104密度接种到96孔板,然后置于培养箱培养3 d直到细胞达到汇合状 态,随机分为5 组：按100 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH（1-28）;100 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）;100 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH （1-34）+1 μmol/L Go6983,1 μmol/L Go6983;空白对照组加入等体积的去离子水,分别刺激细胞1、24、48 h,然后使用细胞计数 试剂盒（CCK-8）和Caspase-Glo® 3/7试剂盒（caspase-3）检测细胞的细胞数量与凋亡。结果CCK-8检测结果显示,［Gly1, Arg19］ hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）+Go6983组相比,在1 h和24 h具有提高细胞数量的趋势,但结果并没有统计学差异, 48 h［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-28）组相比,可以明显提高细胞的数量（P<0.05）。进一步的研究发现在 ［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组添加抑制剂Go6983 后,细胞数量增多的效应消失（P<0.05）。Caspase-3 检测凋亡结果显示,［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）+Go6983组相比,在1 h和24 h具有抑制细胞凋亡（细胞凋亡受到抑制）,但是差 异无统计学意义。48 h检测细胞凋亡显示,［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）组与［Gly1, Arg19］hPTH（1-28）组相比,前者可以明显抑制细 胞凋亡（P<0.05）,给予PKC抑制剂Go6983后,其抑制凋亡现象消失。结论PTH的nonPLC/PKC信号转导通路可能在长时间 （48 h）作用于MC3T3-E1细胞时,可抑制细胞凋亡,提高细胞的数量。     

甲状旁腺素非PLC依赖PKC通路激活增强成骨细胞CITED1表达

目的通过相关信号通路屏蔽和基因表达分析,探讨甲状旁腺素（PTH）非PLC依赖PKC信号转导途径（PTH/nonPLC/
PKC）的功能,分析其对骨代谢的影响。方法取2~3 d C57BL乳鼠颅盖骨分离培养成骨细胞,取贴壁生长的第1代细胞,随机分
为4 组：100 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH（1-28）（简称GR（1-28））+10 nmol/L RP-cAMP;10 nmol/L［Gly1, Arg19］hPTH（1-34）
（简称GR（1-34））+10 nmol/L RP-cAMP;10 nmol/L PTH（1-34）及空白对照组加入等体积的0.1%三氟乙酸（trifluoroacetic acid,
TFA）,作用4 h后,提取各组总RNA,行小鼠全基因组表达谱芯片分析,筛选出可能与nonPLC/PKC信号转导通路相关的差异表
达基因,并进行相关通路分析。RT-PCR 筛选及验证上述差异表达基因。培养MC3T3-E1 细胞,分为4 组：GR（1-28）+
RP-cAMP;GR（1-34）+RP-cAMP;GR（1-34）+RP-cAMP+100 nmol/L Go6983 及空白对照组,RT-PCR 法验证比较GR（1-28）和
GR（1-34）引起的基因表达变化情况。结果倒置相差显微镜观察示,培养7 d见细胞排列紧密,为三角形或多边形,呈铺路石样;
细胞培养14 d ALP染色可见胞质中出现蓝染颗粒,成骨诱导培养28 d茜素红染色可见红色矿化结节形成。基因芯片分析结果
中筛选出与PTH的nonPLC/PKC 信号转导通路相关性最大的56 个基因,进行RT-PCR 验证后发现CITED1 的表达量在GR
（1-34）+RP-cAMP组显著高于GR（1-28）+RP-cAMP组及空白对照组,但小于PTH（1-34）组（P<0.05）。MC3T3-E1细胞RT-PCR
验证的结果与其一致,在阻断cAMP/PKA信号通路后,仅CITED1基因表达量在GR（1-28）和GR（1-34）刺激时存在显著不同,
且加入PKC抑制剂（Go6983）后,表达差异消失。结论PTH的nonPLC/PKC信号转导通路的激活能够使得成骨细胞CITED1
的表达量明显升高,介导PTH对成骨代谢的作用。该途径不依赖PLC和PKA信号的激活。