通过生物信息分析筛选肾上腺皮质癌的关键生物标志物和治疗靶点

目的基于生物信息学分析的方法寻找肾上腺皮质癌(ACC)的分子标志物及其相关治疗靶点。方法通过基因表达综合数据库寻找并下载关于ACC的基因表达芯片GSE19776和GSE143383,采用在线分析工具(GEO2R)对两组芯片数据进行分析,筛选出肿瘤与正常组织的差异基因,并对差异基因进行Gene Ontology基因富集分析及KEGG信号通路富集分析。再对差异基因String网站进行PPI网络构建,然后通过Cytoscape软件进行可视化分析,筛选出相关的核心基因。结果筛选出的上调差异核心基因分别为RACGAP1、CCNB1、TYMS、MAD2L1、NCAPG、CDK1,下调差异基因的核心基因为IGF1、CXCL12、TLR4、TGFBR2、HGF,它们与患者的病理分期及总体生存率存在相关性。结论筛选出的核心基因为将来ACC的诊断以及相关靶向治疗提供了相关依据。     

CH25H调控细胞自噬和凋亡对喉鳞状细胞癌进展影响

目的探讨胆固醇25-羟化酶（CH25H）通过调控细胞自噬和凋亡对喉鳞状细胞癌（LSCC）进展的影响。方法通过转染CH25H过表达质粒,构建CH25H稳定过表达的人LSCC细胞系AMC-HN-8细胞（AMC-HN-8/CH25H）,转染空白质粒为转染对照（AMC-HN-8/Mock）,同时设置未转染空白对照（AMC-HN-8）。采用实时荧光定量PCR检测各组细胞CH25HmRNA表达水平,Westernbolt检测CH25H、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bax）、裂解的半胱氨酸蛋白酶-3（C-caspase-3）]、自噬相关蛋白[微管相关蛋白1A/1B-轻链3（LC3）Ⅱ、Beclin-1、p62]以及磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路蛋白[PI3K、磷酸化PI3K（p-PI3K）、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）]的表达水平。流式细胞术检测各组细胞凋亡率,免疫荧光检测各组细胞LC3Ⅱ表达。构建裸鼠LSCC移植瘤动物模型,采用随机数字表法将裸鼠分为AMC-HN-8组、AMC-HN-8/Mock组、AMC-HN-8/CH25H组,每组8只,分别接种对应细胞,检测CH25H对LSCC细胞生长以及凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的影响。结果相比AMC-HN-8和AMC-HN-8/Mock组细胞,AMC-HN-8/CH25H组细胞CH25H表达上调（P＜0.05）,凋亡率显著增加（P＜0.05）,CH25H表达促进了Bax和C-caspase-3表达,抑制了Bcl-2的表达。同时CH25H表达促进了LC3Ⅱ和Beclin-1的表达,抑制了p62的表达,表明过表达CH25H可促进LSCC细胞的凋亡和自噬。此外,CH25H抑制了PI3K/Akt致癌信号通路的激活。在移植瘤裸鼠模型中,过表达CH25H可抑制体内LSCC肿瘤生长。结论CH25H在LSCC细胞中通过PI3K/Akt信号通路调控细胞自噬和凋亡进而影响肿瘤进展。