火焰原子吸收法测定阿戈美拉汀原料中镍残留量

目的：建立阿戈美拉汀原料中镍残留量的检测方法。方法：采用火焰原子吸收分光光度法,以吡咯烷二硫代氨基甲酸铵-甲基异丁基酮体系萃取富集制备样品,在232.0 nm波长处测定吸光度,按外标法计算镍含量。结果：镍在0.05～4.00μg·ml-1浓度范围内有良好的线性关系（r=0.999 0）,平均回收率为93.3%。结论：该法简便快捷,重复性好,能准确测定阿戈美拉汀原料中镍残留量。     

天然胶乳橡胶避孕套的体外细胞毒性试验研究

目的研究天橡避的体外细胞毒性,调查国内市售避孕套的细胞毒性现状。方法遵照GB/T16886.5和GB/T14233.2-2005(第2部分:生物学试验方法)体外细胞毒性的实验原则,采用琼脂覆盖法、显微镜观察法、噻唑蓝(MTT)比色法,在小鼠成纤维细胞(L929株)上对受试避。结果用琼脂覆盖法检测,6批不同品牌避孕套均具有2级细胞毒性反应。用显微镜观察法检测,6批不同品牌避孕套(按6 cm2/ml比例浸提)在浸提液浓度为100%、50%、20%和10%时,分别具有4级、4级、2级、1或0级细胞毒性反应。用MTT比色法检测,来自6个品牌的15批避孕套(按6 cm2/ml比例浸提),在浸提液浓度为50%、20%、10%时,分别具有4级(RGR≤15%)、2级(RGR:50%～70%)、1级(RGR≥80%)细胞毒性反应。结论试验表明受试天然胶乳橡胶避孕套均有不同程度的细胞毒性反应。MTT比色法具有定量评价的优点,易于操作,与琼脂覆盖法和显微镜观察法相比更适合避的细试验。     

健胃喜食宝片促进消化功能动物试验研究

目的研究健胃喜食宝片促进动物消化功能的效果。方法将昆明种雄性小鼠随机分为空白组、模型对照组和3个剂量(0.53、1.06、1.60g/kgBW)的给药组。各剂量组分别连续经口给予受试样品15d,空白组和模型对照组给予实验用水。用复方地芬诺酯制造小鼠便秘模型,进行小鼠小肠运动试验,测定小鼠的墨汁推进率。将SD雄性大鼠随机分为空白组和3个剂量(0.265、0.53、1.06g/kgBW)的给药组。各剂量组分别连续经口给药30d,观察大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率,测定大鼠的胃蛋白酶活性和排出量。结果健胃喜食宝片(1.06、1.60g/kgBW)能显著增加小鼠小肠墨汁推进率(P<0.01),能显著增加大鼠体重增重和摄食量,对食物利用率增加不明显。健胃喜食宝片(0.53、1.06g/kgBW)能显著增加大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量(P<0.01)。结论健胃喜食宝片具有促进消化功能,即能增进动物食欲和进食量,增加胃液和胃酶分泌量,增加动物体重,增进小肠蠕动;此外还具有润肠通便的功能。     

参黄胶囊对环磷酰胺致免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的 探讨参黄胶囊对环磷酰胺致免疫抑制模型小鼠免疫功能的作用.方法 分别用环磷酰胺和限食法结合环磷酰胺两种方法建立小鼠免疫抑制模型,分别给予0.26、0.53、1.06 g/kg参黄胶囊,观察其对小鼠外周血T淋巴细胞率、胸腺指数、脾脏指数、白细胞数、巨噬细胞吞噬指数、血清溶血素含量(半数溶血值)的影响.结果 应用环磷酰胺后,免疫抑制模型小鼠外周血T淋巴细胞率、胸腺指数、脾脏指数、白细胞数、巨噬细胞吞噬指数、血清溶血素含量均显著降低.0.26、0.53、1.06g/kg参黄胶囊均可明显提高用限食法结合环磷酰胺致免疫低下(气虚模型)小鼠外周血T淋巴细胞率、胸腺指数和脾脏指数和环磷酰胺致免疫低下小鼠体内白细胞数和巨噬细胞吞噬指数;0.53、1.06 g/kg参黄胶囊可明显促使溶血素生成增加.结论 参黄胶囊可明显改善环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫功能,具有扶正固本、增强机体特异性免疫和非特异性免疫功能作用.     

降纤酶质量研究

摘 要 目的： 考察降纤酶的质量现状及存在问题。方法: 对国家食品药品监督管理总局（CFDA）网站数据库上检索到的有降纤酶生产批文的生产企业进行问卷调查,对部分生产企业进行现场调研,针对上述两个环节中发现的问题,对降纤酶原液、中间体、半成品、成品开展了降纤酶原料（液）蛋白质序列分析等一系列实验室探索性研究,提升其安全性、有效性、稳定性和可控性。结果: 目前市场上流通的大部分样品的纯度均较低,其中尖吻蝮蛇降纤酶的主要成分为蕲蛇酶,白眉蝮蛇降纤酶的主要成分为NCBI蛋白数据库中编号为gi|143681919|（sp|P85109.1|）的蛋白;降纤酶效价测定影响因素中Tris的浓度影响最大;加入大分子保护剂可以改善样品中的辅料右旋糖酐对效价测定结果的影响。效价测定中两种仪器法（磁珠法和光学法）测定的结果差距较大,均比目测法低,目前尚不适用于降纤酶效价的测定。热稳定性表明注射用降纤酶热稳定性较好,降纤酶注射液的热稳定性较差。本研究采用浓缩一倍的Tris缓冲液稀释纤原,并加入适当的保护剂,建立了降纤酶半成品效价测定的方法。结论:目前降纤酶的质量有待提高。两种蛇毒来源的降纤酶结构、纯度等差别较大,现行的标准项目设置不全面;缺少专属性较强目前的鉴别;异常毒性、效价测定可操作性差等,不能有效地控制降纤酶的质量。有必要将尖吻蝮蛇和白眉蝮蛇来源的降纤酶作为两个品种管理,同时加强降纤酶的标准化研究。     

乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素凝胶法的检测

目的建立乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素检测方法和质量标准,检测样品中的内毒素含量。方法中国药典2010年版三部细菌内毒素检测法(凝胶限度试验、凝胶半定量试验)。结果选用λ为0.5 EU/ml的鲎试剂,采用凝胶限度法对乙型脑炎减毒活疫苗进行细菌内毒素检查,样品经稀释至80倍或以上稀释度后对内毒素检查均无干扰,确定该疫苗的内毒素限度值为40 EU/ml[即20 EU/剂(0.5 ml)]。凝胶限度试验结果显示,疫苗每1 ml中含内毒素的量均小于40EU,即每1次人用剂量(0.5 ml)中含内毒素的量均小于20 EU。凝胶半定量测定结果显示,1人份规格疫苗中含内毒素的量为2.50～10.00 EU/ml(平均5.36 EU/ml);5人份规格疫苗中含内毒素的量为1.50～6.00 EU/ml(平均3.02 EU/ml)。结论凝胶法两种试验均可用于乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素检测,与凝胶半定量试验相比,凝胶限度试验更为简便、且易于操作;采用凝胶限度法本研究建立了乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素检测方法和质量标准;凝胶半定量法测定结果用准确数据显示该疫苗的内毒素含量均在人体安全限度以内。     

余仁生发宝长期毒性试验对大鼠肾脏功能的影响

目的：分析余仁生发宝对大鼠肾脏功能的影响,评价其长期毒性试验的安全性。方法：健康SD大鼠随机分成低、中、高3组,设立纯水空白对照组。每天灌胃给药1次,给药后3个月、6个月及停药4周后,观察大鼠体重及一般情况、检测肾功进行统计分析。结果：连续给药6个月后,UREA高、中剂量组、Crea高剂量组与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）,连续给药3个月及停药恢复4周后,各组UREA、Crea检测结果与对照组比较无统计学差异（P〉0.05）。结论：余仁生发宝在高剂量、长期运用时对肾功UREA/Crea有一定的影响,但在拟定的人体临床用量较为安全,但针对长期使用的患者,应该定期监测肾功较为恰当。     

UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析人血白蛋白及人免疫球蛋白中非目标蛋白成分

目的 采用超高效液相色谱-串联线性离子阱-轨道阱组合高分辨质谱技术对人血白蛋白及人免疫球蛋白中非目标蛋白成分进行定性分析。方法 采用ACQUITY UPLC peptide BEH C₁₈(300Å,1.7 μm,2.1 mm×100 mm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,质谱采用Full MS/dd-MS²(TopN)扫描模式。结果 从人血白蛋白及人免疫球蛋白中共鉴定出非目标蛋白52个,其中人血白蛋白样本中鉴定非目标蛋白25个,人免疫球蛋白样本中鉴定非目标蛋白27个。结论 建立的定性方法可快速、准确、系统地识别出人血白蛋白及人免疫球蛋白中多种蛋白,为该类制剂质量控制及进一步的临床应用提供参考。     

疟疾DNA疫苗在夜猴中的最佳免疫应答

为了开发能对恶性疟原虫红细胞内期抗原产生保护性抗体的DNA疫苗,本实验选用夜猴为模型进行编码尤氏疟原虫环子孢子蛋白(PyCSP)DNA疫苗免疫后最佳抗体应答的研究。     

HS-GC-MS同时测定沙芬酰胺中磺酸酯类基因毒性杂质

目的 建立同时测定沙芬酰胺原料药中5种磺酸酯类基因毒性杂质（甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、甲磺酸异丙酯、甲磺酸丙酯、甲磺酸丁酯）的方法。方法 采用顶空进样气相色谱-质谱联用法,在线衍生,RESTEK Rxi-624Sil毛细管柱（30 m×0.25 mm,1.4 μm）,四级杆质量检测器,离子化模式为电子轰击离子化（EI）模式,采集模式为选择离子监测。结果 5种杂质检测限为0.3~1.3 ng·mL^-1,定量限为0.9~4.3 ng·mL^-1;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<5%;浓度在5~300 ng·mL^-1内,5种杂质的峰面积与其相对应的浓度有良好的线性关系,相关系数（r²）均>0.995;回收率为99.4%~100.6%,RSD为0.8%~2.6%（n=9）。结论 该法操作简便,重复性好,结果准确可靠,可用于沙芬酰胺中磺酸酯类基因毒性杂质的测定。